用肽适配体正向分析细胞过程实验1
实验材料用于遗传学筛选的酵母株肽适配体库试剂、试剂盒完全极限(CM) 缺失成分液体培养基和平板仪器、耗材30℃ 培养箱实验步骤1. 用高效乙酸锂转化法将 50~100 ug 肽适配体库(在 pJM-2 或 pJM-3 中)转化酵母筛选株(106~107 转化株)。将转化株涂布到 10 cm Glu/CM-Trp 平板上并于 30℃ 培养至克隆直径为 1 mm (2~3 天)。2. 收集酵母细胞,测定平板效率。3. 接种 10 个库等价物到 1 ml Gal/Raf/CM-Trp 液体培养基中。于 30℃ 振荡培养 4 h。4. 室温下,于 3000 g 离心 4 min。吸去上清,将酵母沉淀重悬于无菌水中。5. 将酵母涂布到 10 cm Gal/Raf/CM-Trp 筛选平板上并于选择条件下培养。6. 将阳性克隆划线接种到 Glu/CM-Trp 主平板上。7. 将主平板复印到 Glu/CM-Trp 和 Gal/Raf/......阅读全文
用肽适配体正向分析细胞过程实验1
实验材料用于遗传学筛选的酵母株肽适配体库试剂、试剂盒完全极限(CM) 缺失成分液体培养基和平板仪器、耗材30℃ 培养箱实验步骤1. 用高效乙酸锂转化法将 50~100 ug 肽适配体库(在 pJM-2 或 pJM-3 中)转化酵母筛选株(106~107 转化株)。将转化株涂布到 10 cm Glu/
用肽适配体正向分析细胞过程实验
实验方法原理 实验材料 用于遗传学筛选的酵母株肽适配体库试剂、试剂盒 完全极限(CM) 缺失成分液体培养基和平板仪器、耗材 30℃ 培养箱实验步骤 1. 用高效乙酸锂转化法将 50~100 ug 肽适配体库(在 pJM-2 或 pJM-3 中)转化酵母筛选株(106~107 转化株)。将转化株涂布到
用肽适配体正向分析细胞过程实验2
辅助方案 肽适配体靶点的鉴定实验方法原理通过配对相互作用或捕获法鉴定的肽适配体的假定靶点应当通过遗传学测试进行验证,例如:1. 用免疫沉淀法确定体内适配体的相互作用;2. 通过上位(显)性分析以确定适配体在与靶蛋白相同的区域发挥功能;3. 比较由靶蛋白删除或过表达引起的表型与由适配体造成的表型。实验
构建硫氧还蛋白肽适配体组合库实验
实验材料E.coli MC 1061 (Bio-Rad)硫氧还蛋白表达载体质粒DNA 洗脱液试剂、试剂盒DNA 聚合酶DNA 连接酶小牛肠碱性磷酸酶(CIP)限制性内切核酸酶反应缓冲液4dNTPTris·Cl培养基仪器、耗材QIAquick 胶回收试剂盒质粒制备试剂盒DNA 合成仪16℃ 和 95℃
肽适配体的亲和力成熟实验
实验材料质粒 DNA酵母株试剂、试剂盒Taq 聚合酶10×缓冲液引物dATPdGTPdCTPdTTPMgCl2MnCl2完全极限(CM) 缺失成分培养基和平板Xgal 平板仪器、耗材PCR 管PCR 纯化柱自动热循环器30℃ 培养箱实验步骤实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1. 制备
肽适配体的亲和力成熟实验
实验方法原理 实验材料 质粒 DNA酵母株试剂、试剂盒 Taq 聚合酶10×缓冲液引物 dATPdGTP dCTPdTTPMgCl2 MnCl2完全极限(CM) 缺失成分培养基和平板Xgal 平板仪器、耗材 PCR 管PCR 纯化柱自动热循环器 30℃ 培养箱实验步骤 实验所需「材料」、「试剂」、「
构建硫氧还蛋白肽适配体组合库实验
实验方法原理 实验材料 E.coli MC 1061 (Bio-Rad)硫氧还蛋白表达载体质粒DNA 洗脱液试剂、试剂盒 DNA 聚合酶DNA 连接酶小牛肠碱性磷酸酶(CIP)限制性内切核酸酶反应缓冲液 4dNTPTris·Cl培养基仪器、耗材 QIAquick 胶回收试剂盒质粒制备试剂盒DNA 合
抗肽抗体的制备实验1
实验材料抗体试剂、试剂盒磷酸钠缓冲液MBS二甲基酰胺EDTAPBS仪器、耗材分光光度计离心机实验步骤1. 将10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠缓冲液中,置于一个2 ml 的玻璃试管,加50 μl MBS/DMF溶液,于室温下温和搅拌30 min。 2. 加
用肽底物检测蛋白质激酶的活性和特异性实验1
利用肽底物分析酪蛋白激酶Ⅰ和Ⅱ试剂、试剂盒酪氨酸激酶分析缓冲液酪蛋白激酶肽底物溶液实验步骤1. 在离心管里配制 50 μl 反应混合物:5X 酪氨酸激酶分析缓冲液 10 μl10 mmol/L 酪蛋白激酶肽底物溶液 5
用imagej-软件分析细胞划痕实验结果
任何实验都不会只做1次。假如在同一个处理组你重复了8次,那就测得8个结果。加一起除以10,就是均数。标准差反映的是这8个数据与均数的偏离程度。比如10±1,这个写法表明你这8个数据的平均值是10,而1代表这8个数据总体上偏离均数10的程度。如果这8个数据都在10左右,那标准差就会很小。如果8个数据里
简化肽图分析结果的确证过程
简化肽图分析结果的确证过程:基于 UNIFI 的沃特世生物制药系统解决方案的一项基本功能目的 展示 UNIFI ™ 科学信息系统的强大功能如何帮助用户查看和审核 UPLC®/MS 或 UPLC/MSE 肽图分析实验获得的 LC/MS 原始数据。 背景 肽图分析是药物蛋白鉴定的
利用双杂交系统相互作用阱/筛选特定蛋白肽适配体实验
实验材料DNA酵母株试剂、试剂盒PCR 引物聚乙二醇甘油存储液Tris·ClX-gal 平板完全极限(CM) 缺失成分培养基和平板仪器、耗材30℃ 和 42℃ 培养箱或水浴实验步骤实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1. 使用标准的亚克隆技术,将编码诱饵蛋白的 DNA 插入 PEG20
蛋白质内序列分析用肽段的分离与纯化实验
分子生物学中最重要的环节之一是对微量蛋白质进行分析,使对编码待研究蛋白的 cDNA 序列的克隆成为可能。为有效地做到这一点,通常需要知道蛋白质的内序列。在这一方面,肽段的有效分离是极重要的。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒考马斯亮蓝 G乙酸甲醇Achromobacte
蛋白质内序列分析用肽段的分离与纯化实验
试剂、试剂盒 考马斯亮蓝 G乙酸甲醇Achromobacter 胰蛋白酶 I 三氟乙酸乙腈2-丙醇仪器、耗材 SpeedVac 型旋转浓缩器Tween-20UltrafreeTM MC 滤器C18 反相 HPLC 柱实验步骤 材料与设备考马斯亮蓝 G(0.05% 的乙酸-20% 甲醇溶液)乙酸 (5
蛋白质内序列分析用肽段的分离与纯化实验
试剂、试剂盒 考马斯亮蓝 G 乙酸 甲醇 Achromobacter 胰蛋白酶 I 三氟乙酸 乙腈 2-丙醇
用流式法(FACS)分离间质SP细胞实验1
利用Hoechst33342外流性质分选角膜间质干细胞实验材料2〜4代的间质细胞试剂、试剂盒HBSS 2FBHoechst33342染料 lmg ml水溶碘化丙啶(PI) 2mg ml水溶维拉帕米 500μg ml水溶DMEM 2FB胰蛋白酶 TrypLE:TrypLEExpress或0.25%胰蛋
小鼠胸腺肽α1(Tα1)酶联免疫分析(ELISA)
小鼠胸腺肽α1(Tα1)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,细胞上清及相关液体样本中胸腺肽α1(Tα1)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胸腺肽α1(Tα1)水平。用纯化的小鼠胸腺肽α1(Tα1)抗体包被微孔
人胸腺肽α1(Tα1)酶联免疫分析(ELISA)
人胸腺肽α1(Tα1)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,细胞上清及相关液体样本中胸腺肽α1(Tα1)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人胸腺肽α1(Tα1)水平。用纯化的人胸腺肽α1(Tα1)抗体包被微孔板,制成
简述注射用胸腺肽α1的功能主治
注射用胸腺肽α1用于治疗各种原发性或继发性T细胞缺陷病,某些自身免疫性疾病,各种细胞免疫功能低下的疾病及肿瘤的辅助治疗。包括: 1.各型重症肝炎、慢性活动性肝炎、慢性迁延性肝炎及肝硬化等; 2.带状疱疹、生殖器疱疹、尖锐湿疣等; 3.支气管炎、支气管哮喘、肺结核预防上呼吸道感染等; 4.
简述注射用胸腺肽α1的基本信息
注射用胸腺肽α1在900ug/m2剂量下,胸腺肽α1皮下注射约1hr后血浓度峰值是25~30ug/ml。峰水平持续6hr而在随后18hr内回复到基础水平。连续每周两次注射15周后,胸腺肽α1的血浆基础值作很轻微地增加。 一、注射用胸腺肽α1的用法用量: 皮下或肌肉注射:1次10-20mg,一
用质谱数据对肽段从头测序实验
方案一 方案二 方案三 实验方法原理 单级质谱测序是分析肽段的阶梯序列,即相邻肽段间相差一个氨基酸残基,用质谱分析肽阶梯,通常用 MALD
用质谱数据对肽段从头测序实验
实验方法原理 单级质谱测序是分析肽段的阶梯序列,即相邻肽段间相差一个氨基酸残基,用质谱分析肽阶梯,通常用 MALDI-TOF,MS 分析。 MS/MS 测序用的是上文所述用于数据库检索的 CID 谱,但碎片离子由人工完全解析。用于MS 序列分析的肽阶梯是由化学或酶法降解肽段产生,由 C 未端或N未端
造血正向调控的细胞因子有哪些?
造血正向调控的细胞因子:①干细胞因子(SCF)。②Flt3配体(FL),即fam样酪氨酸激酶受体3(FLT)配体。③集落刺激因子(CSF),是细胞因子中的一大类,有四种主要的类型:粒-单细胞集落刺激因子(CSF-GM)、粒细胞集落刺激因子(CSF-G)、单核细胞集落刺激因子(CSF-M)、巨核细胞集
造血正向调控的细胞因子有哪些
造血正向调控的细胞因子:①干细胞因子(SCF)。②Flt3配体(FL),即fam样酪氨酸激酶受体3(FLT)配体。③集落刺激因子(CSF),是细胞因子中的一大类,有四种主要的类型:粒-单细胞集落刺激因子(CSF-GM)、粒细胞集落刺激因子(CSF-G)、单核细胞集落刺激因子(CSF-M)、巨核细
观察单细胞分裂过程用什么
从一个受精卵发育成多种功能的胚胎,细胞要经过上千次分裂和复杂的排列重组。据物理学家组织网6月3日报道,霍华德·休斯医学研究院珍妮莉娅法姆研究学院开发出一种最新的成像技术,能以前所未有的速度和精确度看到这一过程,让人们能追踪胚胎成形时每个细胞在几天甚至几小时内的变化。相关论文发表在6月3日出版的《自然
细胞用培养箱培养的过程
细胞用培养箱培养的过程温度下细胞保留的时间几乎是无限的。冻存过程中尽力选用细胞疏密程度降低温度速度及复苏时温度、消融速度等都对细胞活力有影响。为了保留细胞,尤其是不易取得的突变形细胞或细胞株,要将细胞冻存。而后将细胞转入低温培养箱中施行培育。 复苏普通认为合适而使用快融办法,即从液氮中抽取
细胞用培养箱培养的过程
温度下细胞保留的时间几乎是无限的。冻存过程中尽力选用细胞疏密程度降低温度速度及复苏时温度、消融速度等都对细胞活力有影响。为了保留细胞,尤其是不易取得的突变形细胞或细胞株,要将细胞冻存。而后将细胞转入低温培养箱中施行培育。复苏普通认为合适而使用快融办法,即从液氮中抽取冻存管后,迅即放入36度水中,使之
关于注射用胸腺肽α1的药理药动学介绍
一、注射用胸腺肽α1的药理作用: 在900ug/m2剂量下,胸腺肽α1皮下注射约1hr后血浓度峰值是25~30ug/ml。峰水平持续6hr而在随后18hr内回复到基础水平。连续每周两次注射15周后,胸腺肽α1的血浆基础值作很轻微地增加。 二、注射用胸腺肽α1的药物相互作用: 本品可与α干扰
JY99IIDN超声波细胞粉碎机适伤用领域介绍
JY99-IIDN超声波细胞粉碎机,又名超声波破碎仪,超声波乳化机,是一种利用超声波在液体中产生空化效应的多功能、多用途仪器;它能用于多种动植物、病毒、细胞、细菌及组织的破碎,同时可用来乳化、分立、匀化、提取、消泡、清晰、纳米材料的植被、分散及加速化学反应等。上海五相仪器JY99-IIDN超声波细胞
流式细胞仪检测实验用次GoZG1-DNA峰值计算细胞凋亡
实验材料要分析的细胞在FACS缓冲液中试剂、试剂盒FACS缓冲液冰冷的100%乙醇(如果细胞是抗体标记的则用70%乙醇)1 mg ml RNase A含50μg ml 二碘化丙锭(PI)的PBS仪器、耗材流式细胞仪实验步骤1)凋亡刺激后,从培养液中沉淀所要分析的细胞,同样沉淀一未处理的对照培养液。重