酵母表达载体的构建与酵母转化
实验概要本实验介绍了酵母表达载体的构建、酵母转化方法及酵母抗逆实验。主要试剂试剂配制：1 .1 M Tris.Cl(pH 7.5)(100 ml)：12.1g Tris碱，加80 ml ddH2O，浓HCl调pH 7.5，定容至100 ml；2. 0.5 M EDTA(pH 8.0) (100 ml)：18.6g EDTANa2.2H2O， 70 ml ddH2O，NaOH调pH 8.0，定容至100 ml；3. 1xTE(pH 7.5) (100 ml)：1 ml 1 M Tris.Cl(pH7.5)，0.2 ml 0.5 M EDTA(pH 8.0)，加水定容至100 ml；4. I0XTE(pH 7.5)(100 ml)：10 ml 1 M Tris.Cl(pH7.5)，2 ml 0.5 M EDTA(pH8.0)，加水定容至100 ml；5. I0XLiAC(1 M LiAC)：3.15 g LiAC，加水定容至50 m......阅读全文
克隆化酵母DNA的操作实验——整合性转化
实验材料酵母实验步骤1. 将待研究的基因亚克隆到YIP质粒。 2. 用限制性内切酶在克隆化基因内部切开，使质粒线性化。 3. 用1~10 μg DNA加上担体DNA转化适合的菌株，通过质粒上带的标记进行选择，在选择培养基上纯化几个转化子，制备DNA，应用Southern 杂交确证整合是否发生在
酿酒酵母的电穿孔转化法实验_材料的准备
实验材料高分子量 DNA试剂、试剂盒TE 缓冲液仪器、耗材微量离心管实验步骤一、单链载体 DNA 的制备1. 在 100 ml TE 缓冲液中溶解 1 g 高分子量 DNA，用磁力搅拌器于 4℃ 搅拌过夜。2. 用大直径探头以最大功率超声处理 30 秒；应将探头在溶液中持续移动，以保证超声处理的均一
酵母双杂交系统逆双杂交系统的介绍
在研究蛋白质的结构功能特点、作用方式过程中，有时还要通过突变、加抑制剂等手段破坏蛋白质间的相互作用。针对实际工作中的这种需要，Vidal等人发展了所谓的逆双杂交系统（reverse two-hybrid system）。这项技术的关键是报道基因URA3的引入。URA3基因在这里起到了反选择的作用
酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验_快速简便的转化法
实验材料酵母菌试剂、试剂盒LiAc仪器、耗材YPAD 平板YPAD 液体培养基实验步骤1. 将 10 μl 接种物在 YPAD 平板上涂布 2.0 cm2，培养过夜。2. 对一个转化来说，在微量离心管中用 1.0 ml 灭菌水悬浮一接种环酵母菌。3. 离心沉淀细胞，将水去掉。4. 用 500 μl
毕赤酵母LiCl－转化方法
实验概要本文介绍了毕赤酵母LiCl 转化方法。该程序是电转化的替代方法。转化效率为102-103cfu/ug线性化DNA。主要试剂溶液准备：不能用醋酸锂，一定要用氯化锂1. 用无菌去离子蒸馏水配制1M LiCl，过滤除菌，用无菌水稀释2. 用无菌去离子蒸馏水配制50%PEG(3350)，过滤除菌，存
酵母转化的几种方法
Modified Yeast Transformation Inoculate cells from an overnight culture into 50 ml YEPD and incubate at 30°C with shaking. Typically, add 0.1 to 0.2 m
酵母菌落直接质粒转化法
酵母菌落直接质粒转化法1．用牙签从平板中挑取单菌落（直径2～3mm），转移到1.5ml的无菌离心管中。2．将10μl载体DNA（100μg）与10μl转化质粒DNA混合，振荡均匀。（若转化DNA是用未经RNA酶处理的“mini－prep DNA”方法制得，则不需加载体DNA）。3．加0.5ml PL
逆自旋霍尔效应－微波能量转化为电能？（二）
一言以蔽之，逆自旋霍尔效应是可行的(如本文相关图表和论文)；它是自旋电子学的新应用，在某些方面丰富了业已不断成长可用于收集磁自旋的自旋电子效应和装置工具箱。接下来，需要精确测量其效率并尝试进行一些适当的应用，以便检测逆自旋霍尔效应对于未来的有机半导体多么有帮助。 “我们研究的目标在于展
逆自旋霍尔效应－微波能量转化为电能？（一）
随着来自手机讯号基地台、行动装置、Wi-Fi、蓝牙与5G等产生越来越多的微波充斥全世界，很自然地，科学家开始探讨将这些微波转化成能量的方法。美国犹他大学(University of Utah)的科学家们发现了一种新方法，可在有机半导体中将微波能量转化为电能。 在实验室中，研究人员证
概述γ氨酪酸的抗逆及调控作用
GABA长久以来被认为与植物多种应激和防御系统有关。GABA会随着植物受到刺激而升高，被认为是植物中响应于各种外界变化、内部刺激和离子环境等因素如pH、温度、外部天敌刺激的一种有效机制。GABA还可以调节植物内环境如抗氧化、催熟、保鲜植物等作用。近年来GABA在植物中也被发现作为信号分子在植物中
美洲狼尾草抗逆研究取得新进展
美洲狼尾草 四川农业大学草业科技学院供图 土壤盐渍化对植物生长，发育和产量造成许多不利影响，被认为是对世界农业和粮食生产可持续发展的重要环境威胁之一。据报道，目前全球10%的土地和50%的农业用地受到盐渍化的影响，给农业产生造成了巨大的损失。如何提高作物对盐渍化胁迫的耐受能力，对缓解全
毕氏酵母氯化锂转化法
试剂1M LiCl 50% PEG3350 (氯化锂转化法只能PEG3350,不能用PEG8000,PEG3350在北京莱博生物有售,80元/100克)2mg/ml salmon sperm DNA / TE（10mM Tris-Cl, pH8.0, 1.0mM EDTA）-20℃保存注：醋酸锂对毕
LiCl法转化毕赤酵母菌
实验概要本实验介绍了用LiCl法将重组质粒导入毕赤酵母菌X-33的转化方法。主要试剂甘油，YPD培养基，50% PEG，1 mol/L LiCl，Sac I主要设备摇床，高速离心机，1.5 ml微量离心管，水浴锅实验材料重组质粒pPIC6αA-APC，毕赤酵母菌X-33实验步骤1. 取毕赤酵母甘油种
朱健康：期待中国植物抗逆研究实现突破
4月19日，“国际高等植物表观遗传学会议”在中科院遗传与发育所举行。美国科学院院士、著名生物学家朱健康应邀作了《DNA去甲基化在拟南芥中的研究》的报告。 会后，在接受记者采访时，朱健康表示，植物抗逆境的遗传机理是一个很有意思的科学问题，虽然许多科学家已进行了研究，但植物抗逆的表观遗传
概述γ氨基丁酸的抗逆及调控作用
GABA长久以来被认为与植物多种应激和防御系统有关。GABA会随着植物受到刺激而升高，被认为是植物中响应于各种外界变化、内部刺激和离子环境等因素如pH、温度、外部天敌刺激的一种有效机制。GABA还可以调节植物内环境如抗氧化、催熟、保鲜植物等作用。近年来GABA在植物中也被发现作为信号分子在植物中
酵母转化实验_单链高分子量的担体DNA制备
实验材料DNA试剂、试剂盒TE酚氯仿乙酸钠乙醇仪器、耗材超声波发生器实验步骤1. 将DNA溶于pH8.0的1×TE缓冲液，终浓度为10 mg/ml。于4℃搅拌过夜。 2. 用一个大的超声探头，在75%的满功率下超声处理DNA 30 s，以降低DNA溶液的粘度。取1 μg DNA在0.8%琼脂糖凝
烟草抗虫“化学武器”谜题破解－抗逆育种有新靶点
尼古丁是烟草属植物合成的含量最丰富的生物碱，本是抵御植食性昆虫的有力“化学武器”。然而植株的生长素，竟能强烈抑制尼古丁生物合成。其中的潜在机制一直成谜。记者1月2日从中国科学院昆明植物研究所获悉，该所研究团队近期以渐狭叶烟草为研究对象，揭开了这一分子调控机制的神秘谜题。相关成果在线发表在国际期刊《植
酵母双杂交实验
实验概要本实验构建了Bait载体和prey载体，酵母双杂交后，应用CPRG法定量测试了蛋白质相互作用。实验步骤1. Bait载体的构建将高保真PCR扩增的OsCCTlb(引物为OsCCT1bEcoRI5'和OsCCTlbXhoI3')和OsCNTlb(引物为OsCNTlb Eco
酵母功能互补实验
实验概要本实验将在构建了大蒜重金属抗性基因表达载体并转入大肠杆菌DH5α的基础上，选择鉴定准确的质粒转化酵母细胞，对转化子进行了PCR鉴定和RT-PCR分析，及重金属抗性实验。主要试剂YPD培养基，醋酸锂，PEG(50%)，乙醇，少量酵母菌总RNA快速抽提试剂盒主要设备摇床，离心机，水浴锅，PCR仪
为什么质粒酵母电转化不进去
酿酒酵母的电转感受态制备方法和电转化方法(1)接种工业酒精酵母至30 mL液体YEPD培养基，30度培养12 h；(2)取培养物以1%的接种量转接到30 mL新鲜YEPD液体培养基中，30度培养8 h，使菌体达到同步生长状态；(3)将酵母培养物置于冰上放置30 min后，6,000 r/min离心5
抗酿酒酵母抗体(ASCA)测定的介绍
抗酿酒酵母抗体(ASCA)测定是消化系统自身免疫性疾病中炎症性肠病、克罗恩病的辅助诊断指标。
棉花干旱抗逆胁迫新基因表达及特征分析
干旱等非生物胁迫因素导致作物在形态、生理、生物化学及细胞水平上产生一些不利于其生长的反应，严重地阻碍着现代农业的发展。随着全球气候变暖和人类活动加剧，干旱有明显加重的趋势。棉花生产是纺织工业及国防建设的重要物质基础，也是中国农业重要组成部分，对中国国民经济的发展有着重要的影响，而且在世界棉花贸易市场
毕赤酵母PEG1000转化方法
实验概要本文介绍了毕赤酵母PEG1000转化方法。据称PEG比LiCl 方法好，但不如去壁细胞及电转化法，但对没有电转装置的人来说，更方便，效率为102-103/ugDNA。主要试剂Buffer A：1M山梨醇，10mM bicine(N－二(羟乙基)甘氨酸)pH8.35，3%(v/v)乙二醇Buf
毕赤酵母遗传霉素抗性转化子的筛选
实验概要本实验介绍了毕赤酵母遗传霉素抗性转化子的3种筛选方法。实验步骤1. (去壁细胞)方法：从含HIS 转化子的平板开始 1) 用灭菌刮片将含有HIS 转化子的顶层琼脂最上层刮下，放入无菌的50ml 离心管中。 2) 加入10-20ml灭菌水，量应为琼脂的两倍，剧烈振荡1-2min。
酿酒酵母培养条件实验_酵母培养物的储存
实验方法原理酵母在琼脂或液体培养基中的理想培养温度是30℃，培养皿平板应倒置放入塑料盒中，于孵箱或培养室内进行培养。当孵育时间超过2或3天时，塑料盒可防止平板上的琼脂干裂。当使用液体培养基培养时，要使用旋转式或往复式摇床，至少每分钟200转，以保证充分通气；进行大体积液体培养时使用锥形瓶，培养基为瓶
香稻高产抗逆栽培调控研究获新进展
近日，华南农业大学农学院、亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室唐湘如团队在香稻高产抗逆栽培调控取得新进展。相关研究分别发表于European Journal of Agronomy和Antioxidants。针对华南双季稻区的早季香稻种植因多雨和台风天气常发生而导致的产量和倒伏问题严重，该研究
华南植物园铁皮石斛抗逆机制研究取得进展
铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）是兰科（Orchidaceae）石斛属（Dendrobium）多年生附生草本植物，是我国传统名贵中药材。 铁皮石斛自然分布区域很广，我国秦岭淮河以南的大分布地区均有发现，野生状态下的铁皮石斛主要附生于树干、岩石
Science－|－抗逆突破！泛素化介导叶绿体蛋白降解新途径
为了应对全球气候变化带来的频繁逆境胁迫，全面而清晰地了解植物面对胁迫反应的不同调控机制具有重要的意义。在植物抗逆研究中，研究发现非生物胁迫会抑制植物的光合作用，影响叶绿体的稳定性并诱导叶绿体的降解，叶绿体降解进而会引发植物早衰，最终影响作物产量。 叶绿体是为植物提供能量来源的重要细胞器
科研人员在鸭茅抗逆研究中获进展
全球变暖、干旱加剧、土壤盐渍化和极端天气对植物生长、繁殖和产量等方面的不利影响是不可避免的，并对粮食安全构成重大挑战。如何提高作物产量和抗非生物胁迫能力，对缓解全球粮食安全具有重要意义。作为地球生态系统的重要组成部分，草类植物在应对全球气候挑战方面具有重要价值，是作物改良的最佳遗传基础，也是应
Science－|－抗逆突破！泛素化介导叶绿体蛋白降解新途径
为了应对全球气候变化带来的频繁逆境胁迫，全面而清晰地了解植物面对胁迫反应的不同调控机制具有重要的意义。在植物抗逆研究中，研究发现非生物胁迫会抑制植物的光合作用，影响叶绿体的稳定性并诱导叶绿体的降解，叶绿体降解进而会引发植物早衰，最终影响作物产量。 叶绿体是为植物提供能量来源的重要细胞器。