细胞系或细胞株的建立

一、概念1、细胞系(Cell Line):原代培养舞经首次传代成功即成细胞系,由原先存在于原代培养物中的细胞世系(Lineage of Cells)所组成。2、细胞株(Cell Strain):通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。如果不能继续传代或传代数有限,称为有限细胞株(finitecell strain);如果可以连续传代,称为连续细胞株(continuous cellstrain)。对于人类肿瘤细胞,在体外培养半年以上,生长稳定,并连续传代的即可称为连续性株或系。二、建立细胞系(或株)的要求什么样的体外培养群可被认可为己鉴定的细胞,视具体情况而定,无统一规定。对于用作原代培养的细胞只要供体均一,取材部位及组织种类等条件稳定即可,如用做长期培养,特别是反复传代的细胞,常需做如下说明:1、组织来源:细胞供体所属物种,来自人体或者动物......阅读全文

反转录病毒产毒细胞系建立实验

反转录病毒载体导入包装细胞系 测定病毒滴度 培养细胞的Xgal染色             实验材料 包装细胞系

用EBV转染淋巴细胞建立永生化细胞株的方法

一、 试剂1、 淋巴细胞分离液:避光4度保存,用前在37度水浴中加温。整个分离过程中,温度应控制在8-28度,温度过高或过低均影响分离质量。2、 全培养基(用前配置):RPM1640培养基,内含20%胎牛血清(Gibco){56℃灭活30分钟},1.6-1.8% 1M的HEPES,1.2% 0.2m

研究建立始发态豚鼠多能干细胞系

1月9日,中国科学院广州生物医药与健康研究院研究员刘晶研究组与广东省人民医院教授朱平合作,在《干细胞报告》(Stem Cell Reports)上在线发表了题为Capture Primed Pluripotency in Guinea Pig的研究论文。该研究建立并表征了豚鼠始发态胚胎干细胞系(gp

人胚胎干细胞系:衍生与培养实验—人胚胎干细胞系的建立

实验步骤方 案 2. 6 人 胚 胎 干 细 胞 系 的 建 立试剂与材料无菌或无菌制备□ 5〜6 天的人胚泡,经 H F E A 允许,并且像先前讨论的完全经病人同意。 HFEA所要求的全部细节能够在 H E F A 的网站找到(http//:www.hfea.g0v.uk)。□链霉蛋白酶, 0

小鼠孤雄单倍体胚胎干细胞系首次建立

  中国科学院上海生科院生物化学与细胞生物学研究所李劲松研究组和徐国良研究组在一项合作研究中,首次建立了来自孤雄囊胚的单倍体胚胎干细胞系,而这些细胞保持了一定水平的雄性印记,并进一步验证这些细胞能够代替精子在注入卵母细胞后产生健康的小鼠。相关研究成果今天在线发表于国际著名学术期刊《细胞》(Cell)

毛冠鹿胚胎有限细胞系的建立的方法和意义

鹿科动物具有较高的经济价值,毛冠鹿属是鹿科麂亚科的2个属之一,仅有毛冠鹿(Elaphodus cephalophus)一种动物,为我国特有的二类保护动物。近年来,由于生态环境恶化,食物链遭到破坏,该动物日趋减少。1983年张锡然等首次报道了毛冠鹿2种核型,王宗仁又发现了第3种核型。3种核型差异较大,

食蟹猴孤雌单倍体胚胎干细胞系建立

  中科院生物化学与细胞生物学研究所李劲松研究组、神经科学研究所孙强领导的非人灵长类研究平台(苏州)和健康科学研究所金颖研究组合作,建立了来自食蟹猴孤雌囊胚的单倍体胚胎干细胞系,为揭示灵长类动物生命规律提供了新的重要的研究工具。相关研究成果日前发表在《细胞研究》。   单倍体细胞为研究重要的生命科

成功建立小鼠孤雌单倍体滋养层干细胞系

  真核生物的遗传信息都在细胞核中以染色体的形式存在。二倍体细胞中有两套染色体,这是哺乳动物遗传信息的呈递模式。而单倍体细胞中只具有一套染色体,这降低了其基因组的复杂程度,有利于隐性纯合体的获得,是极具价值的遗传学研究工具。  2011年及2012年,小鼠的孤雌与孤雄单倍体胚胎干细胞系被成功建立。此

上海生科院等建立“类精子细胞”的单倍体细胞系

  2012年,中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所李劲松研究组与徐国良研究组合作从小鼠的精子中建立了孤雄单倍体胚胎干细胞,并证明这些细胞能够代替精子使卵母细胞“受精”产生半克隆小鼠,该项研究成果成功入选2012年中国科学十大进展。然而,单倍体细胞随着体外培养传代,特别是经过遗传编

中国科学家建立的“类精子细胞”单倍体细胞系

  近日,一则关于“两颗卵子产健康幼鼠”的消息受到了关注,有些人认为此类研究改写了生殖规则。那么改写生殖规则的研究到底是怎样的研究?该技术是否能在实验室以外的地方用?  国际顶级期刊关注中国科学家建立的“类精子细胞”单倍体细胞系  悉知,被称为改写生殖规则的研究实际上是中国科学家目前研究的“类精子细

反转录病毒产毒细胞系建立实验——培养细胞的Xgal染色

实验材料转染细胞试剂、试剂盒PBS戊二醛低聚甲醛Xgal溶液仪器、耗材培养箱离心机实验步骤1.  弃培荞上清并加固定液,室温下,在通风橱中与2%低聚甲醛共育60 min,或与0.05%戊二醛共育5~15 min。2.  根据实验室化学物弃置规程弃去固定液,室温下用PBS充分洗涤细胞3次,第1次和第3

反转录病毒产毒细胞系建立实验——测定病毒滴度

实验材料病毒原液试剂、试剂盒G418仪器、耗材离心机培养箱实验步骤1.  感染的前1天按1:10至1:20将靶细胞NIH 3T3分传于6 cm 培养皿中。 2.  进行感染的当天,移去靶细胞的培养液,加入含有病毒原液的培养液。用1~2 ml 含 有0.01 μl~0.1 ml 病毒原液的培养液感染6

大鼠的脑微血管内皮细胞株

癌细胞株(Cell Strain)是用bai单细胞分离培养或通过筛选的du方法,由单细zhi胞增殖形成的细胞群。dao细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。原代培养物经*传代成功后即为细胞系(cell line), 由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有

细胞株的概念

通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株(Cell Strain)。

细胞株的保存

1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯,开启超净台正常工作状态,用酒精消毒操作者的双手。2. 将所需的培养基,胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内,点燃酒精灯,将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次,旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖,分别放于酒精灯的两侧。特别是将培养基瓶放

细胞株的概念

  细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。原代培养物经首次传代成功后即为细胞系(cell line), 由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限, 可称为有限细胞系(finite cel

铅酸电池行业或将建立行业准入机制

  近日,记者从中国电池工业协会获知,不久前国务院批复的《重金属污染综合防治“十二五”规划》,铅酸蓄电池的整治将成为重点。在铅酸蓄电池行业的生产销售以及回收处理方面,或将建立相应的行业准入机制。  据有关部门统计数据,目前全国铅酸电池企业有2000多家,产值在500万元以上

传代细胞系的简介和特点

  传代细胞系来源于肿瘤细胞或细胞株传代过程中变异的细胞系称为传代细胞系,它们能在体外无限期地传代。重组蛋白制品哺乳动物传代细胞库建立、鉴别和检定申报资料要求解读之一 。  二倍体细胞在传代繁殖过程中,有些细胞发生改变,不仅形态发生变化,且生长更快,能以少量的细胞起始培养。由一个这样的细胞得到的细胞

我国科学家建立大熊猫诱导多能干细胞系

中国科学院广州生物医药与健康研究院研究员刘晶团队与成都大熊猫繁育研究基地合作,利用重编程技术成功建立了大熊猫成纤维细胞来源的诱导多能干细胞系(iPSCs),并从多维度揭示了大熊猫iPSC独特的细胞特征,进一步讨论了大熊猫iPSCs在物种保护和疾病治疗中潜在应用价值。相关成果近日发表于《科学进展》(S

细胞系交叉污染或错误鉴定对研究是否有影响

细胞系交叉污染或错误鉴定对研究有影响。使用错误的细胞系或者是被污染的细胞系做研究,只会造成时间,金钱和精力的损失,以及造成实验结果的不一致和不可重复。因此如果用被污染或错误的细胞系做研究,在发表文章或做进一步研究时极有可能需要用正确的细胞再重复实验。

纤维素纳米化技术体系或将建立

  国家林业公益性行业科研专项重大项目“纳米纤维素绿色制备和高值化应用技术研究”项目启动会在北京举行。项目将致力于研发高得率、经济、绿色的纳米纤维素制备方法,研究纳米纤维素精确表征的体系及纳米纤维素高值利用的关键技术,研发具有储能、自洁、阻燃、吸附等特性的纳米纤维素高功能材料。  据项目负责人、国家

中科院学者Cell-Res建立新型单倍体胚胎干细胞系

  单倍体细胞为研究重要的生命科学问题提供了手段,但是,单倍体细胞一般只存在于低等生物中。最近的研究表明,可以从小鼠中建立孤雄或者孤雌的单倍体胚胎干细胞系,从而提出了更具挑战性的问题,即是否能从非人灵长类中获得单倍体的细胞系?   7月16日,国际著名学术期刊Cell Res发表了中国科学院生

细胞株的保存方法

1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯,开启超净台正常工作状态,用酒精消毒操作者的双手。2. 将所需的培养基,胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内,点燃酒精灯,将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次,旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖,分别放于酒精灯的两侧。特别是将培养基瓶放

细胞系的概念分歧

  现行的人教社大纲版选修教材中是这样介绍细胞株和细胞系的:  原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了,细胞的生长就会出现停滞,大部分细胞衰老死亡。但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去,这些存活的细胞一般能够传到40--50代,这种传代细胞叫做细胞株。细胞株的遗传物质没有发生改变

细胞因子依赖纯化法的方法介绍

人和动物组织中某些细胞需要有特殊的细胞因子存在的微环境才能长期存活和生长繁殖,如IL-2是T细胞生长所必需的细胞因子,BCGF是B细胞的生长因子,体外培养中淋巴细胞若加入IL-2就可使T细胞生长繁殖,形成IL-2依赖的T细胞系,如CTLL-2细胞株,而其他细胞则自然被淘汰,采用此法还建立了IL-6依

稳定细胞株构建

稳转细胞系(稳定表达细胞株)指在细胞中持续稳定表达特定基因或干扰特定基因表达。稳转细胞株的目的基因质粒DNA整合到细胞染色体上,使细胞长期稳定表达该基因。稳转细胞株包括多克隆稳转细胞株和单克隆稳转细胞株。慢病毒感染目的细胞后,通过抗性基因筛选得到的细胞株是多个细胞克隆的组合。单克隆细胞株是从多克隆细

如何保存细胞株?

 1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯,开启超净台正常工作状态,用酒精消毒操作者的双手。    2. 将所需的培养基,胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内,点燃酒精灯,将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次,旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖,分别放于酒精灯的两侧。

细胞系的简述

细胞系(cell line)指原代细胞培养物经*传代成功后所繁殖的细胞群体。 也指可长期连续传代的培养细胞。(由此便引申出了后来的有限细胞系(FiniteCellLine)、无限细胞系(InfiniteCellLine)),因此,细胞系狭义的是指可连续传代的细胞(特定环境下口语和书面语都使用),广义

稳转细胞株构建原理

稳转株即稳定表达细胞株,指的是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。稳定细胞系建立的原理将外源DNA/shRNA克隆到带有某种抗性基因的载体上,重组载体被转染至宿主细胞并整合到其染色体中,并能随细胞分裂稳定传递下去,用载体中所含抗性基因进行筛选。常用的真核表达载体抗性筛选标志物有新

哪些情况需要使用稳定细胞系

 稳定细胞系是指将外源基因整合到宿主细胞基因组中,使外源基因能够在宿主细胞中长期稳定表达,这样的细胞系称为稳定细胞系。其原理是将外源基因克隆到具有某种抗性的载体上,通过转染宿主细胞,外源基因整合到宿主染色体上,用载体中所含抗性基因进行筛选即可得到成功整合目的基因的细胞。在试验过程中,常用的真核表达载