胸腹水细胞染色体制备方法
在恶性肿瘤的胸腹水中有大量的分裂期细胞,其中多以非整倍体细胞存在,并含有各种标记染色体。 1、 实验材料 2.5%碘精、75%酒精、无菌棉球、镊子20-22号无菌腰穿包、50ml离心管、秋水仙素、KCL、甲醇、冰乙酸、载玻片等。 2、 操作过程(1)采样:选择有胸或腹水患者,在无菌条件下,轻腹穿刺或于手术取胸或腹水20-50ml;(2)培养:立即加入秋水仙素培养,最终浓度为0.02-0.04ug/ml胸腹水,置37℃培养箱内4-6小时;(3)低渗及后期制作羊水细胞。......阅读全文
胸腹水细胞染色体制备方法
在恶性肿瘤的胸腹水中有大量的分裂期细胞,其中多以非整倍体细胞存在,并含有各种标记染色体。 1、 实验材料 2.5%碘精、75%酒精、无菌棉球、镊子20-22号无菌腰穿包、50ml离心管、秋水仙素、KCL、甲醇、冰乙酸、载玻片等。 2、 操作过程(1)采样:选择有胸或腹水患者,在无菌条件下,轻腹
脱落细胞单细胞悬液的制备——胸、腹水脱落细胞的制备
实验方法原理在临床工作中,可以收集到大量自然脱落细胞,这些细胞标本经过简单处理,便可成为较好的单细胞悬液供流式细胞术分析。主要包括脱落细胞、胸腹水细胞、尿液、内镜刷检细胞等。实验材料胸、腹水试剂、试剂盒肝素液PBS仪器、耗材尼龙网实验步骤1. 抽取胸、腹水 50~100 ml,加入 1000 U/m
胸腹水染色体标本制备
一、原理 某些肿瘤细胞可脱落入胸腹水中,并继续生长、增值。因此,由胸腹水细胞可制备较好的染色体标本。胸腹水细胞染色体分析对恶性肿瘤具有辅助诊断的价值。如分裂相多,异倍性,有结构畸变,常支持阳性诊断。二、用品和试剂 同外周血染色体制备。三、操作步骤 l.新鲜胸腹水20—40毫升,以1
胸腹水染色体标本制备
某些肿瘤细胞可脱落入胸腹水中,并继续生长、增值。因此,由胸腹水细胞可制备较好的染色体标本。胸腹水细胞染色体分析对恶性肿瘤具有辅助诊断的价值。如分裂相多,异倍性,有结构畸变,常支持阳性诊断。二、用品和试剂同外周血染色体制备。三、操作步骤1. 新鲜胸腹水20-40毫升,以1000rpm离心10分钟。弃去
骨骼细胞染色体制备方法
1. 在含有细胞培养基的细胞培养管中无菌添加骨髓样本1ml(参考细胞密度
淋巴细胞染色体制备方法
1. 向含有细胞培养基的细胞培养管中无菌添加全血0.5ml,盖紧培养瓶,充分混均;2. 水平培养72 h(37℃);3. 加入20ul 秋水溶液,培养2 h;4. 离心5 min(2000 rpm);5. 去除上清液,保留0.5ml的细胞;6. 重新充分混悬细胞1;7. 加入5ml 低渗溶液(KCl
羊水细胞染色体制备方法(原位法)
细胞培养1. 将羊水(约20ml)转移到无菌的离心管中,1000rpm离心10分钟;2. 去除上清液,用于其它分析,保留细胞悬液约0.5~1ml,用培养基混匀到2~2.5ml左右;3. 将细胞悬液平分到3只Chromslide培养皿中;4. 培养24/48小时后,向每只Chromslide培养皿中加
组织培养细胞染色体制备方法
组织细胞用于遗传学分析最常见的是体外培养的细胞株,多为恶性肿瘤细胞株,且呈贴壁生长,仅小数细胞株为悬浮生长。培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和染色体标本制出清晰度高等优点。组织细胞染色体制备的关键是掌握好体外细胞的生长动态,只有处在对数生长期的细胞才能出现较高的分裂相,所以积水仙素处理的时机及量是染
绒毛染色体制备方法
绒毛来源于胚胎的中胚层,最早的初级干绒毛出现于孕三周初,孕8周左右是绒毛发育最旺盛时期。目前国内外绒毛取材多选于8-9周。研究资料表明,绒毛取样不影响胚胎的发育及胎盘的功能。但取样的失败可导致胚胎丢失而终止妊娠。绒毛取样前者首先要检查阴道分泌物以判别阴道的洁净度,防止取样导致宫内感染。其次需做B超检
人癌细胞染色体制备
实验概要本实验介绍了人癌细胞染色体制备的基本原理及操作步骤。有助于学习人类染色体制备的常规方法,了解人癌细胞染色体及其变异。实验原理目前大多数癌症都建立了相应的细胞株或细胞系,体外培养的癌细胞多属于连续的周期细胞,可以用来制备染色体。国内外制备动物和人类染色体的常规方法是空气干燥法,该方法的关键包括
羊水细胞染色体标本的制备
一、原理人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养,但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞,依据其外形和生长特征可区分为以下三类:上皮细胞(E)、成纤维细胞(F)和羊水细胞(AF)。E细胞在胰酶消化的连续培养中不再生长,所以在培养过程中的生长期最短。AF细胞在再培
羊水细胞染色体标本的制备
一、原理 人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养,但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞,依据其外形和生长特征可区分为以下三类:上皮细胞(E)、成纤维细胞(F)和羊水细胞(AF)。E细胞在胰酶消化的连续培养中不再生长,所以在培养过程中的生长期最短。AF细
正常细胞常规核型的标本制备_肿瘤细胞染色体标本制备
实验方法原理利用肿瘤细胞无限繁殖的特点,掌握其体外生长动态,取处于对数生长期的细胞便可获得丰富的分裂相。肿瘤细胞染色体异常包括两个方面:1. 结构异常 即在肿瘤细胞常出现的染色体畸变,包括双着丝点染色体、环状染色体、断裂的染色体、染色体裂隙及微小体等。2. 数目异常 由于肿瘤细胞分裂失去应有
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备
实验概要本文介绍了人外周血染色体制备和体外培养细胞染色体标本制备的原理、操作流程及注意事项。实验原理人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下,人外周血小淋巴细胞都处在G1期(或G0期),但在体外给予一定的条件,进行培养,经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种
单克隆抗体腹水制备实验——杂交瘤细胞接种
实验方法原理高滴度的单克隆抗体的制备可以通过在小鼠的腹腔内接种能产生 MAb 的杂交瘤细胞,从而产生腹水来获得。腹水可收集几次,经热灭活、滴定后储存。实验材料裸鼠(6~8 周龄 无特定病原体/注射了鼠鼠杂交瘤细胞的同系宿主)目的杂交瘤试剂、试剂盒完全DMEM-10培养液(含10mmol/L HEPE
单克隆抗体腹水制备实验
实验方法原理 高滴度的单克隆抗体的制备可以通过在小鼠的腹腔内接种能产生 MAb 的杂交瘤细胞,从而产生腹水来获得。腹水可收集几次,经热灭活、滴定后储存。实验材料 裸鼠(6~8 周龄 无特定病原体/注射了鼠鼠杂交瘤细胞的同系宿主)目的杂交瘤试剂、试剂盒 完全DMEM-10培养液(含10mmol/L H
胸水细胞学检查方法
1.胸水的采集、制片和染色 (1)胸水的采集:在胸水的细胞学检查和诊断过程中,除了要掌握间皮细胞和癌细胞的形态特征外,尚必须保持胸水的新鲜,否则将影响细胞学诊断的准确性和可靠性。因为胸水抽出后如不及时制片或固定,其中的各种细胞可能由于自溶性改变而被破坏。一般要求在胸水抽出后(最多不超过1h)立
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备2
⑦ 再固定:加固定液8ml,混匀,固定10min。⑧ 离心:同上,吸去上清液。⑨ 制细胞悬液:根据细胞量多少,加入适量固定液,充分混匀,制成细胞悬液。⑩ 滴片:取出预先经冰水浸泡的载玻片,用吸管吸取混匀的细胞悬液在离冰片约30cm距离进行滴片,每片约滴2~3滴细胞悬液,使细胞较好分散。一般每一培养瓶
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备1
一、 人外周血染色体制备实验原理 人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下,人外周血小淋巴细胞都处在G1期(或G0期),但在体外给予一定的条件,进行培养,经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种取材简易、用血量少的培养方法已被广泛采用。在培养液中加入植
正常细胞常规核型标本制备_人淋巴细胞染色体标本制备
实验方法原理在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的蛋白质,使染色体清晰且分散良好。再结合离心技术去掉红细胞碎片,然后采用空气干燥法制片获得中期染色体标本。实验材料HeLa细胞
CHO细胞染色体制备[Harvard-Medical-School]
Mitshison Lab, Department of Systems Biology, Harvard Medical Schoolhttp://mitchison.med.harvard.edu/protocols/chr1.htmlBuffers:Swelling Buffer (PME):
人癌细胞染色体制备及观察
一、实验目的学习人类染色体制备的常规方法,了解人癌细胞染色体及其变异。二、实验原理目前大多数癌症都建立了相应的细胞株或细胞系,体外培养的癌细胞多属于连续的周期细胞,可以用来制备染色体。国内外制备动物和人类染色体的常规方法是空气干燥法,该方法的关键包括:1.秋水仙素的预处理:秋水仙素又叫秋水仙碱,它是
骨髓细胞染色体标本的制备
一、原理骨髓染色体标本制备通常用于白血病患者,特别是慢性或急性粒细胞性白血病,因为骨髓反映粒系统细胞增生情况,这些病人不宜用外周血。即使是淋巴细胞性白血病,也不主张用外周血,因为加PHA刺激外周血培养,只能获得正常淋巴细胞分裂相,并不能反映那些病理淋巴细胞的染色体改变。骨髓细胞属不断增殖的细胞,培养
染色体制备
一、 人外周血染色体制备 1. 实验原理 人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下,人外周血小淋巴细胞都处在G1期(或G0期),但在体外给予一定的条件,进行培养,经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种取材简易、用血量少的培养方法已被广泛采用。
染色体制备
实验方法原理 固定阻滞于分裂中期的细胞,在低渗液中膨胀,将细胞滴在载玻片上,染色,观察 [ Rothfels and Siminovitch,1958;Rooney and Czepulkowski,1986 ] 。实验材料 D-PBS0.25%胰蛋白酶对数期的培养细胞秋水仙酰胺试剂、试剂盒 低渗溶
染色体制备
实验方法原理固定阻滞于分裂中期的细胞,在低渗液中膨胀,将细胞滴在载玻片上,染色,观察 [ Rothfels and Siminovitch,1958;Rooney and Czepulkowski,1986 ] 。实验材料D-PBS0.25%胰蛋白酶对数期的培养细胞秋水仙酰胺试剂、试剂盒低渗溶液醋酸
染色体制备
实验方法原理 固定阻滞于分裂中期的细胞,在低渗液中膨胀,将细胞滴在载玻片上,染色,观察 [ Rothfels and Siminovitch,1958;Rooney and Czepulkowski,1986 ] 。
染色体制备
实验方法原理固定阻滞于分裂中期的细胞,在低渗液中膨胀,将细胞滴在载玻片上,染色,观察 [ Rothfels and Siminovitch,1958;Rooney and Czepulkowski,1986 ] 。实验材料D-PBS
单克隆抗体的腹水制备实验
实验材料杂交瘤细胞试剂、试剂盒完全DMEM-10HEPES丙酮酸钠PBS仪器、耗材注射针头离心管转子离心机实验步骤1. 用20G或22G的注射针,小鼠腹膜内注射降植烷,每只鼠0.5 ~ 1 ml,1周后接种细胞。 2. 在175 cm2培养瓶中加完全DMEM-10/HEPES/丙酮酸钠培养液,进
单克隆抗体的腹水制备实验
实验材料 杂交瘤细胞试剂、试剂盒 完全DMEM-10HEPES丙酮酸钠PBS仪器、耗材 注射针头离心管转子离心机实验步骤 1. 用20G或22G的注射针,小鼠腹膜内注射降植烷,每只鼠0.5 ~ 1 ml,1周后接种细胞。 2. 在175 cm2培养瓶中加完全DMEM-10/HEPES/丙酮酸钠培