细胞总RNA的提取
提取细胞RNA的步骤：1) 六孔板每孔细胞中加入1ml Trizol，冰上放置5min，枪头吹打。2) 将各孔裂解液吸到1.5 ml EP管中，加入氯仿0.2ml/管，用力振摇15s。15－30℃下孵育2-3min，离心（4℃，12，000g，15min）。3) 离心后液体分为三层（上层－无色水样层为RNA，中层白色为DNA和底层红色为蛋白质），小心吸取上层无色液体移入一新的EP管中。4) 加入等体积异丙醇，0.4－0.5ml，混匀，15-30℃下孵育10－30min，离心（4℃，12，000g，10min）。其中如果加入等体积异丙醇后，置于试管架上用PE手套密封后，放于4℃冰箱中，沉淀30min效果更好。5) 去上清，沉淀加入75％乙醇1ml，漩涡振荡30s，离心（4℃，7，500g，5min）。6) &nb......阅读全文
脂肪细胞RNA提取原理
氯仿是分子量比较大的有机溶剂，在提取RNA时，氯仿可以有效的使有机相和无机相迅速分离。DNA提取过程 有机相中主要是酚和蛋白结合，从而使得蛋白和DNA脱离，DNA进入水相。但是在RNA的提取过程就要避免蛋白和DNA脱离，否则DNA会释放到水相。不管有酚也好，没有酚也好，氯仿本身也对蛋白有变性作用，剧
组织/细胞RNA快速提取
操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）提示： 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量无水乙醇! 操作前在裂解液RLT中加入β-巯基乙醇至终浓度1%，如1 ml RLT 中加入10μl β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的RLT 4℃可放置一个月。1. 组织培养细胞a. 收
植物总RNA的提取实验原理和操作步骤
一、实验目的通过本实验学习从植物组织中提取RNA的方法二、实验原理RNA是一类极易降解的分子，要得到完整的RNA，必须最大限度地抑制提取过程中内源性及外源性核糖核酸酶对RNA的降解。高浓度强变性剂异硫氰酸胍，可溶解蛋白质，破坏细胞结构，使核蛋白与核酸分离，失活RNA酶，所以RNA从细胞中释放出来时不
miRNA研究之动物总RNA的提取与电泳
动物总RNA的提取与电泳I．实验目的与要求A. 理解和掌握提取和纯化动物总RNA的技术原理和操作方法。B. 理解和掌握通过电泳鉴定提取所得的动物总RNA的技术原理和操作方法。II． 实验原理和背景知识A. RNA是生命活动中基因表达过程非常重要的生物大分子，如mRNA,它携带了DNA的全部编码信息。
TriQuick总RNA提取试剂（TriQuick－Reagent）操作说明
操作说明: 自备新开封或专用氯仿，异丙醇，75%乙醇，DEPC处理水。1. 细胞裂解或组织匀浆： 1)贴壁细胞：吸尽培养液，每10平方厘米（6孔板孔或35 mm平皿）细胞加入1 ml TriQuick Reagent,使其覆盖培养细胞，再用吸管或加样器吹打2~3次，细胞应完全裂解，然后转移至
总RNA提取试剂（Trizol法）使用说明
『用途与特点』1. 本试剂盒可用于几乎所有新鲜或液氮保存的动物和植物组织、昆虫和细胞RNA的快速提取，通用性好。2. 无须DNA酶、RNA酶抑制剂等。3. 所需样品量少，并且可根据起始材料的多少自行调整。4. 操作简便，整个过程
真菌菌丝的总RNA的提取的操作方法
试剂：RNA提取缓冲液（CTAB）：2% CTAB（W/V），2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP（W/V），100 mM Tris-HCl（pH8.0,DEPC处理的水配置），25mM EDTA, 0.5g/L 亚精胺Spermidine，2.0M NaCl，2%巯基乙醇（V/V，使用前加入）。由于
真核细胞总RNA的制备（Total－RNA－Isolation）2
Total RNA Isolation Guanidine-based isolation Objective: To obtain total RNA from zebrafish embryos. Required Materials Denaturing Solution
真核细胞总RNA的制备（Total－RNA－Isolation）1
从细胞中分离RNA的纯度于完整性对于许多分子生物学实验至关重要。如Northern印迹与杂交分析、寡聚（dT）纤维素选择分离 mRNA，cDNA合成及体外翻译等实验的成败，在很大程度上决定于RNA的质量。RNA分离的最关键因素是尽量减少RNA酶的污染。快速一步法提取总RNA组织及有核细胞在匀浆过程中
总RNA提取实验——一步法
实验材料RNA试剂、试剂盒乙酸钠氯仿异戊醇异丙醇乙醇SDS酚仪器、耗材离心机分光光度计摇床实验步骤1. 组织来源材料：100 ng 组织加1 ul 变性液，在玻璃Teflon匀浆器中将其匀浆。2. 培养细胞：离心弃悬浮细胞培养液或倒去单层培养细胞培养液（不需用生理盐水洗涤），每107细胞加入1
培养细胞的RNA提取方法介绍
1. 贴壁细胞，需要先用胰酶消化后，然后收集到离心管中，离心，去上清，然后用PBS多洗2-3次，以去除多余的胰酶。悬浮细胞，直接用吸管或者加样枪吹打评壁，以使细胞基本可以被吹下来。然后离心去上清，不需要用PBS洗。2. 然后将少量细胞悬液转移到预冷的DEPC泡过的1.5毫升EP管中，然后加入一定量的
细胞质RNA提取实验
基本方案 实验材料 RNA 试剂、试剂盒
细胞质RNA提取实验
由于RNA的种类来源很多，因而提取制备方法各异，一般有苯酚法，去污剂法和盐酸胍法，其中苯酚法实验室最常用。组织匀浆后用苯酚处理离心，RNA即溶于上层被酚饱和的水相中，向水相加冷乙醇后， RNA即以白色絮状沉淀析出。此法较好除去DNA和蛋白质，且获得生物活性的RNA。实验材料RNA试剂、试剂盒PBS细
细胞质RNA提取实验
实验材料 RNA试剂、试剂盒 PBS细胞裂解液SDS蛋白酶K酚氯仿异戊醇无水乙醇仪器、耗材 离心机培养箱实验步骤 1. 对于单层培奍细胞（1）每10 cm 培养皿培养的细胞，用冰冷PBS洗涤3次。（2）每次1 ml 然后用小体积PBS刮下细胞，转移至冰浴的离心管中。（3）300 g 离心5 min
动物组织细胞总RNA的提取（异硫氰酸胍法和TRIzol法）1
一、实验原理RNA是基因表达的中间产物，存在于细胞质与核中。对RNA进行操作在分子生物学中占有重要地位。获得高纯度和完整的RNA 是很多分子生物学实验所必需的，如Northern杂交、cDNA合成及体外翻译等实验的成败，在很大程度上取决于RNA的质量。由于细胞内的大部分RNA是以核蛋白复合体的形
动物组织细胞总RNA的提取（异硫氰酸胍法和TRIzol法）2
（二）TRIzol试剂提取RNA1.取新鲜动物组织0.1～0.2g置于组织匀浆器中，加入预冷的Trizol液 1ml 于玻璃匀浆器中，在冰浴中迅速匀浆15～30s，以充分研碎组织。然后将细胞悬浮液吸入另一1.5ml Ep管中，于室温下静置5min。2.加入200μl氯仿，剧烈振摇15s混匀后，室温静
纯化RNA实验——从培养的细胞中纯化总RNA
实验材料细胞试剂、试剂盒RNA 提取缓冲液变性液水饱和酚仪器、耗材培养皿Falcon 2063 管实验步骤1. 取 1 个细胞已长满的 100 ml 培养皿，吸出培养液，加 2 ml RNA 提取缓冲液，用橡胶刮棒刮下细胞。RNA 提取缓冲液：变性液，20 mlβ-巯基乙醇，0.144 ml2 mo
细胞总蛋白质的分离提取
细胞器是一种动态的结构，如内质网、细胞核和高尔基体等，其蛋白质组成除了驻留蛋白质之外，还包括穿梭蛋白质和瞬间相互作用的蛋白质。对于这些组成成分的研究，即亚细胞蛋白质组研究将有助于对这些蛋白质做全面的挖掘，从而对细胞器的功能作深入的阐述。蛋白质提取与制备具体操作方法如下：一、材料的选择早年为了研究的方
提取的总RNA跑胶从大到小有几条带
提取的总RNA跑胶从大到小有带3条。三条是主带。哺乳动物的RNA包括mRNA，rRNA，tRNA和du小RNA，根据分子量和沉降系数的不同，rRNA又可分为28s, 18s 和5.8s 的rRNA。从RNA的含量上看，rRNA是几种RNA中最多的，高达90%以上，而mRNA很少，只有1-2%，而其他
提取的总RNA跑胶从大到小有几条带
提取的总RNA跑胶从大到小有带3条。三条是主带。哺乳动物的RNA包括mRNA，rRNA，tRNA和du小RNA，根据分子量和沉降系数的不同，rRNA又可分为28s, 18s 和5.8s 的rRNA。从RNA的含量上看，rRNA是几种RNA中最多的，高达90%以上，而mRNA很少，只有1-2%，而其他
提取的总RNA跑胶从大到小有几条带
提取的总RNA跑胶从大到小有带3条。三条是主带。哺乳动物的RNA包括mRNA，rRNA，tRNA和du小RNA，根据分子量和沉降系数的不同，rRNA又可分为28s, 18s 和5.8s 的rRNA。从RNA的含量上看，rRNA是几种RNA中最多的，高达90%以上，而mRNA很少，只有1-2%，而其他
提取的总RNA跑胶从大到小有几条带
提取的总RNA跑胶从大到小有带3条。三条是主带。哺乳动物的RNA包括mRNA，rRNA，tRNA和du小RNA，根据分子量和沉降系数的不同，rRNA又可分为28s, 18s 和5.8s 的rRNA。从RNA的含量上看，rRNA是几种RNA中最多的，高达90%以上，而mRNA很少，只有1-2%，而其他
线虫总RNA提取及RTPCR实验方法
C. elegans RNA Isolation and RT-PCRReagents Needed:M9 (common stock)Trizol (stored at 4ºC)chloroform2-propanol70% EtOHRNase-free H2OiScript cDNA Synth
植物基因组DNA及总RNA提取技术2
（二）植物总RNA提取 （1）65°C水浴中预热15 mL CTAB提取液。 （2）液氮中研磨2～3 g新鲜或-70°C冷冻的材料。 （3）转移样品至有CTAB提取液的离心管中，立即激烈涡旋30s，短时放回 65°C水浴中（4～5 min）。 （4）加入等体积的氯仿/异戊醇并涡旋混合，10000 r
植物基因组DNA及总RNA提取技术1
幼嫩组织的细胞处于旺盛的分裂阶段，核较大而胞质较少，核酸浓度高，且内含物少、次生代谢产物少，蛋白质及多糖类物质相对较少，在SDS或 CTAB物质存在时，经机械研磨，使细胞破裂并释放出内含物，提取的DNA、RNA的产量高，纯度好。 提取DNA所用的提取液、吸头、离心管等需要高压灭菌以灭活DNase。R
RNA的提取
【实验原理】Trizol 试剂是直接从细胞或组织中提取总RNA 的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA 的完整性。加入氯仿后离心，样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后，RNA 可以通过异丙醇沉淀获得。【实验仪器】1. 匀浆机2. 低温离心机3. 涡旋器【试剂及配制】1
RNA的提取
一、准备试剂：氯仿，异丙醇，75℅乙醇，无RNase的水或0.5℅SDS（溶液均需用DEPC处理过的水配制）。二、操作步骤：1. 匀浆处理：a. 组织 将组织在液氮中磨碎，每50-100mg组织加入1ml TRIzol，用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。b. 单层培养细胞
从有限的细胞中提取－RNA－实验
实验材料 LCM 帽子试剂、试剂盒 乙醇 糖原RNA 提取试剂盒 超纯水仪器、耗材 移液器实验步骤 一、材料1. 缓冲液、试剂和溶液75% 乙醇 (超纯水配制）糖原，5 mg/ml(Ambion，Austin，TX)StratageneRNA 提取试剂盒（200345，StratageneCloni
从有限的细胞中提取－RNA－实验
RNA 样品可以在-80°C 中保存 6 个月。总细胞 RNA 采用 StratageneRNA 提取试剂盒，按照说明书进行。另外，也可选用 PicoPureRNA 提取试剂盒，尤其是细胞较少时。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。实验材料LCM 帽子试剂、试剂盒乙醇糖原R
肝脏细胞RNA的提取操作方法
一．原理RNA提取技术不仅是分子生物学技术的重要组成部分，也是功能基因组 学科研技术的重要基础。从RNA水平研究生物体内基因的调控机制，已成为分子生物学研究的一个重要手段。对某一生物或组织进行性状研究，首先要获得该性状基因，从组织细胞中分离完整的RNA对于分子克隆 和基因表达分析等实验是