原位杂交组织化学常用试剂及处理2
九、原位杂交信号显示 目前应用原位杂交方法中，信号的显示主要有放射自显影，酶底物及免疫金银等方法，在此归纳有关的主要试剂。 1．A-B显影液 称取上述试剂，按配方分别溶于50ml ddH2O中，于显影前，在室温将两者（A液及B液）按1：1混合，稍加摇动促进混合，即可将贴有切片标本的切片放入显影液，于室温避光（可暗室）反应5～15min。显影时间和温度相关，需自己根据情况摸索。终止反应只需将显影液倒出，自来水冲洗即可。倒出的AB显影液可暂时不扔，光镜下观察，若明显显影不够，还可重新或继续显影。AB显影液要求临用前配制，在显影时才将AB二液混合。否则，A液过久会产生黄色沉淀，增加背景。 AB液用于免疫金银法中，使金标记颗粒信号放大，形成棕黑色沉淀。 2．DAB-H2O显色液 配制方法见附录一。 该液用于标本被标记上辣根过氧化物酶（HRP）的方法。产物为棕黄色。 3．NBT-BCIP显色液 配制方法，详见附录一。 ......阅读全文
常用免疫组织化学方法的原理
1. 免疫荧光细胞化学技术 将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察.当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后会发出一定波长的荧光,从而可以确定组织中的抗原定位或定量. 2. 免疫酶细胞化学技术 是免疫组织化学研究中最常用的技术．基本原理是先以酶标
常用免疫组织化学方法的原理
1. 免疫荧光细胞化学技术 将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察.当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后会发出一定波长的荧光,从而可以确定组织中的抗原定位或定量. 2. 免疫酶细胞化学技术 是免疫组织化学研究中最常用的技术．基本原理是先以酶标
免疫组织化学常用的检测方法
免疫组织化学（immunohistochemistry）技术的基本原理是抗原-抗体的反应。利用带有标记物（如荧光素或辣根过氧化物酶等）的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起
常用免疫组织化学染色方法－1
一)、ABC法： (注，下面各种方法，均为手工操作，如没特别说明，均在室温下进行)1.切片经二甲苯Ⅰ 5分钟。2.切片经二甲苯Ⅱ 5分钟。3. 无水酒精Ⅰ 30秒。4. 无水酒精Ⅱ 30秒。5. 95% 酒精Ⅰ 30秒。6. 95%酒精Ⅱ 30秒。7. 90%酒精 30秒。8.80%酒精 30秒。9
人小鼠α2抗纤溶酶ELISA试剂盒本处理及要求
人小鼠α2抗纤溶酶（α2-AP）ELISA试剂盒本处理及要求： 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，
人小鼠α2抗纤溶酶ELISA试剂盒本处理及要求
人小鼠α2抗纤溶酶（α2-AP）ELISA试剂盒本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离
实验室前处理仪器微波消解样品常用的试剂
常用试剂:硝酸、过氧化氢、逆王水、盐酸、HF、王水等。硝酸:样品消解中最常用的酸,是一种强氧化剂,沸点(120℃)相对较低,硝酸能在微波能力下有很理想的反应能力,迅速产生氮氧化物所形成的红褐色气体,能破坏复杂的有机基体。氢氟酸HF:是一种溶解硅基物料的有效溶剂。主要与硝酸混用。盐酸:对某些金属氧化物
病理制片技术——常用试剂及染液的配制
1．试剂准备：苏木精10 g，硫酸铝钾80 g，无水乙醇200 ml，蒸馏水2000 rnl，氧化汞3 g，冰乙酸40ml。2．配制步骤(1)将2000 ml蒸馏水注入一只3000 的大号三角烧瓶内，加入80 g硫酸铝钾后置电炉或电磁炉上加热硫酸铝钾完全溶解。(2)将200 ml无水乙醇注入一只30
常用试剂配制－4
Phytohemaglutinin (PHA)Available as kidney bean lectin. It is typically used as a stock solution of 10-20 g/ml in balanced salt solution. For tissue c
常用试剂的规格
四种常用规格有四种常用规格:优级纯或一级品(GR,精密分析和科学研究工作);分析纯或二级品(AR,重要分析和一般研究工作);化学纯或三级品(CP,工矿及学校一般化学实验);实验试剂(L.P.)。优级纯(GR,绿标签): 主成分含量很高、纯度很高,适用于精确分析和研究工作,有的可作为基准物质。分析纯(
微波消解常用试剂
(1) 硝酸：硝酸是一种强氧化剂，能氧化侵蚀金属和有机物质，使之成为可溶性的硝酸盐，能够溶解大多数的硫化物，通常与双氧水同时使用，使消解完全，主要用于有机样品如：脂肪、饮料、蛋白质、颜料和聚合物，也应用于金属氧化物和土壤等。(2) 硫酸：硫酸是许多物质的有效溶剂，可完全破坏几乎所有的有机化合物，进行
常用生化试剂作用
1.蛋白酶K：能水解消化蛋白质，特别是与DNA结合的组蛋白。再尿素和SDS中稳定。一般工作浓度是50—100μg/ml，推荐反应缓冲液：50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。2.SDS:十二烷基硫酸钠. 溶解细胞膜上的脂类与蛋白质，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜，并解离细胞中
常用生化试剂作用
1.蛋白酶K：能水解消化蛋白质，特别是与DNA结合的组蛋白。再尿素和SDS中稳定。一般工作浓度是50—100μg/ml，推荐反应缓冲液：50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。2.SDS:十二烷基硫酸钠. 溶解细胞膜上的脂类与蛋白质，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜，并解离细胞中
常用试剂配制－5
Sodium citrate (MW 294.10)0.09 MDissolve 2.65 grams of sodium citrate to a final concentration of 100 ml with water.Sodium citrate/formaldehyde (for s
试剂的常用规格
四种常用规格有四种常用规格：优级纯或一级品（GR，精密分析和科学研究工作）；分析纯或二级品（AR，重要分析和一般研究工作）；化学纯或三级品（CP，工矿及学校一般化学实验）；实验试剂(L.P.)。优级纯（GR，绿标签）： 主成分含量很高、纯度很高，适用于精确分析和研究工作，有的可作为基准物质。分析纯（
常用试剂配制－3
Magnesium chloride (MgCl MW 95.23)1 mMDissolve 95.2 mg of magnesium chloride per final volume of 1 liter.4 mMDissolve 0.381 grams of magnesium chlorid
HER2显色原位杂交法
一、预处理1. 脱蜡至水（1）二甲苯5分钟，2次（2）100%酒精1分钟，2次（3）95%酒精1分钟，1次（4）85%酒精1分钟，1次（5）双蒸水1分钟，3次2. 加热预处理（1）热预处理液（试剂盒内带）加热至98-100℃时，放入切片，15-20分钟。（2）双蒸水洗1分钟，3次3. 胃蛋白酶消化（
常用电镜原位杂交技术的基本程序
原位杂交技术自创立以来，为基因的定位和表达、基因进化、发育生物学、肿瘤学、微生物学、病理学、医学遗传学和遗传分析等领域研究提供了极其宝贵的资料，发挥了其他技术难以取代的作用。但不论是使用放射性核素探针，还是非放射性探针，大部分研究工作都还限于光镜水平。为了对检测的靶核酸进行更精确的亚细胞定位，以及能
层析法常用数据表及性质(2)
（三） 琼脂糖凝胶的技术数据 （ 琼脂糖是琼脂内非离子型的组分，它在0 ~ 4℃，pH 4~9范围内是稳定的。） 名称、型号
常用不稳定试剂的分类及要求
① 易挥发、低燃点的试剂要密封，放于阴凉、通风、远离火源处保存。② 与水蒸气，水发生反应的物质要密封，并远离水源保存。③ 易与氧气作用的试剂，应将其固体或晶体密封保存，不宜长期存放其水溶液，亚硫酸，氢硫酸溶液要密封存放，钾，钠，白磷更要采用液封形式。④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存，其相应的溶液较
收藏丨实验室常用试剂管理及分类！
一、实验室试剂安全管理 1、所有药品、标样、溶液都应有标签，绝对不要在容器内装入与标签不相符的药品。2、禁止使用实验室的器皿盛装食物，也不要用茶杯、食具盛装药品，更不要用烧杯等当茶具使用。3、浓酸、烧碱具有强烈的腐蚀性，切勿溅到皮肤和衣服上，稀释硫酸时，必须用硬质耐热的烧杯或锥形瓶中进行，只要将浓硫
细胞培养常用器材及处理方法
一、玻璃器材 常用的玻璃器材有各种规格的玻璃瓶、培养瓶、培养皿、吸管、离心管等。 无论是初次使用还是培养后重复使用的玻璃器材均需要进行消毒处理。*使用的玻璃器材应先用自来水初步刷洗，然后用稀盐酸溶液（1%）浸泡过夜，再用自来水冲洗，后处理方法与重复使用的器皿的处理。重复使用的玻璃器皿的处理步
原位PCR技术
除了经典的原位杂交外。原位杂交可与其他组织化学技术相结合，或与其他分子生物学技术相结合，使其应用范围扩大，成为更有应用价值的技术。PCR技术是根据生物体内DNA复制的特点而建立的在体外经酶促反应将特定DNA序列进行高效和快速扩增的技术，它可将单一拷贝或低拷贝的待测核酸以指数形式扩增而达到用常规方法可
核酸探针标记及原位杂交3
3.注意事项（1）避光下准备反应体系：由于光敏生物素醋酸盐对光敏感，应避免光照。在分装试剂及核酸与光敏生物素混合时应在暗室安全灯下操作。（2）核酸纯度：由于光敏生物素能与任何有机物反应，因此用做标记探针的核酸要高度纯化。用作标记探针的核酸最好不用Tris溶液溶解，Tris中所含氨基会干扰标记。（3）
单克隆抗体技术方面的著名企业名录
Pharmengen： 世界上基础研究中最值得信赖的抗体生产商，其提供的小鼠单抗被最为广泛的应用于免疫学及其它研究，质量最为可靠。其主要产品涉及流式细胞、免疫化学、免疫组织化学、原位杂交、微生物检验等。此外其还提供各类免疫学研究用试剂。现以成为B.D.公司旗下主力舰之一。 DAKO： 丹麦的国际著名
分析试剂的常用规格
优级纯或一级品（GR，精密分析和科学研究 工作）；分析纯或二级品（AR，重要分析和一般研究工作）；化学纯或三级品（CP，工矿及学校一般化学实验）；实验试剂(L.P.)。 基准试剂含量应该是99.9%～100.2%。随着科学技术和新兴工业的发展，对化学试剂的纯度、净度以及精密度要求愈加严格和专门
常用离子对试剂
1-戊烷磺酸钠 CAS:22767-49-31-己烷磺酸钠 CAS:2832-45-31-庚烷磺酸钠 CAS:22767-50-61-辛烷磺酸钠 CAS:5324-84-51-癸烷磺酸钠 CAS:13419-61-9
常用试剂配制小常识
实验室常用试剂配制有要求，70%的酒精杀菌力最强，，它能使蛋白质脱水和变性，在3～5分钟内杀死细菌。高浓度的酒精杀菌能力反而减弱。天平的保持、清洗有要求。 1、哪种浓度的酒精消毒效果最好？70%酒精杀菌力最强，它能使蛋白质脱水和变性，在3～5分钟内杀死细菌。因此，它用于消毒和防腐，适用于皮肤和器械、
水处理常用技术
1.离子交换法 离子交换法是以圆球形树脂（离子交换树脂）过滤原水，水中的离子会与固定在树脂上的离子交换。常见的两种离子交换方法分别是硬水软化和去离子法。硬水软化主要是用在反渗透（RO）处理之前，先将水质硬度降低的一种前处理程序。软化机里面的球状树脂，以两个钠离子交换一个钙离子或镁离子的方式来软
废气处理常用方法
常用的废气处理方法有吸附法、吸收法、催化燃烧法、热力燃烧法等。选用废气处理方法时，应根据具体情况优先选用费用低、耗能少、无二次污染的方法，尽量做到化害为利，充分回收利用成分和余热。多数情况下，石油化工业因排气浓度高，喷漆车间废气处理采用冷凝、吸收、直接燃烧等方法；涂料施工、印刷等行业因排气浓度低，采