噬菌体的检查及效价测定
1、目的:1.1 了解噬菌体效价的含义及其测定原理。1.2 学会检查噬菌体的方法。1.3 掌握用双层琼脂平板法测定噬菌体效价的操作技能。2、原理:噬菌体是一类专性寄生于细菌和放线菌等微生物的病毒,其个体形态极其微小,用常规微生物计数法无法测得其数量。当烈性噬菌体侵染细菌后会迅速引起敏感细菌 裂解,释放出大量子代噬菌体,然后它们再扩散和侵染周围细胞,最终使含有敏感菌的悬液由混浊逐渐变清,或在含有敏感细菌的平板上出现肉眼可见的空斑──噬 菌斑。了解噬菌体的特性,快速检查、分离,并进行效价测定,对在生产和科研工作中防止噬菌体的污染具有重要作用。检样可以是发酵液、空气、污水、土壤等(至于无法采样而需检查的对象,可以用无菌水浸湿的棉花涂拭表面作为检查样品)。为了易于分离可先经增殖培养,使样品中的噬菌体数量增加。采用生物测定法进行噬菌体检查,约需12h左右,因而不能及时判断是否有噬菌体污染。通过快速检查可大致确定是否有噬菌体污染,以采取必要......阅读全文
噬菌体的检查及效价测定
1、目的:1.1 了解噬菌体效价的含义及其测定原理。1.2 学会检查噬菌体的方法。1.3 掌握用双层琼脂平板法测定噬菌体效价的操作技能。2、原理:噬菌体是一类专性寄生于细菌和放线菌等微生物的病毒,其个体形态极其微小,用常规微生物计数法无法测得其数量。当烈性噬菌体侵染细菌后会迅速引起敏感细菌 裂解,释
噬菌体的检查及效价测定
实验方法原理噬菌体是一类专性寄生于细菌和放线菌等微生物的病毒,其个体形态极其微小,用常规微生物计数法无法测得其数量。当烈性噬菌体侵染细菌后会迅速引起敏感细菌裂解,释放出大量子代噬菌体,然后它们再扩散和侵染周围细胞,最终使含有敏感菌的悬液由混浊逐渐变清,或在含有敏感细菌的平板上出现肉眼可见的空斑──噬
噬菌体的检查及效价测定(二)
六、结果:1. 噬菌体检查① 离心分离加热法OD650光密度值正常发酵液(对照) 异常发酵液(试验)离心上清液(A1)离心上清液加热煮沸后(A2)A2/A1② 绘出平板上的噬菌斑检测结果,指出噬菌斑和宿主细菌。2. 噬菌体效价测定① 平板上噬菌斑数目噬菌体稀释度10-4、10-5、10-6 对照噬菌
噬菌体的检查及效价测定(一)
一、目的:1. 了解噬菌体效价的含义及其测定原理。2. 学会检查噬菌体的方法。3. 掌握用双层琼脂平板法测定噬菌体效价的操作技能。二、原理:噬菌体是一类专性寄生于细菌和放线菌等微生物的病毒,其个体形态极其微小,用常规微生物计数法无法测得其数量。当烈性噬菌体侵染细菌后会迅速引起敏感细菌裂解,释放出大量
噬菌体效价的测定
实验方法原理 噬菌体的效价就是 1 ml 培养液中所含活噬菌体的数量。效价测定的方法,一般应用双层琼脂平板法。由于在含有特异宿主细菌的琼脂平板上,噬菌体产生肉眼可见的噬菌斑,因此,能进行噬菌体的计数,但因噬菌斑计数方法其实际效率难以接近 100%(—般偏低,因为有少数活噬菌体可能未引起感
噬菌体的分离、纯化及效价测定
一、目的要求 1、学习分离、纯化噬菌体的基本原理和方法。 2、学习噬菌体效价测定的基本方法。 二、基本原理 因为噬菌体是专性寄生物,所以自然界中凡有细菌分布的地方,均可发现奇特异的噬菌体的存在,亦即噬菌体是伴随着宿主细菌的分布而分布的,例如粪便与阴沟污水中含有大量大肠杆菌,故也能很容
噬菌体效价的测定实验
实验方法原理噬菌体的效价就是 1 ml 培养液中所含活噬菌体的数量。效价测定的方法,一般应用双层琼脂平板法。由于在含有特异宿主细菌的琼脂平板上,噬菌体产生肉眼可见的噬菌斑,因此,能进行噬菌体的计数,但因噬菌斑计数方法其实际效率难以接近 100%(—般偏低,因为有少数活噬菌体可能未引起感染),所以为了
微生物学技术:噬菌体的检查及效价测定
一、目的:1. 了解噬菌体效价的含义及其测定原理。2. 学会检查噬菌体的方法。3. 掌握用双层琼脂平板法测定噬菌体效价的操作技能。二、原理:噬菌体是一类专性寄生于细菌和放线菌等微生物的病毒,其个体形态极其微小,用常规微生物计数法无法测得其数量。当烈性噬菌体侵染细菌后会迅速引起敏感细菌裂解,释放出大量
噬菌体效价的计算和技术优点
又称噬菌斑形成单位(pfu)数,指每毫升试样中含有侵染性噬菌体的粒子数。测定方法有双层平板法,其优点有:1)弥补平板不平2)噬菌斑位于同个平面,较清晰3)上层为半固体培养基,有利噬菌体扩散
胰酶肠溶片的检查及效价测定方法
检查微生物限度取本品,照胰酶项下的方法检查应符合规定。其他应符合片剂项下有关的各项规定(通则0101)。效价测定胰蛋白酶照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定供试品原液取本品5片(0.3g规格)或3片(0.5g规格),除去肠溶衣,研细,加冷至5℃以下的氯化钙溶液适量,研磨均匀,移至200ml量瓶
注射用绒促性素的检查及效价测定
检查干燥失重取本品约0.1g,置五氧化二磷干燥器中,室温减压干燥至恒重,减失重量不得过5.0%(通则0831)。异常毒性与细菌内毒素照绒促性素项下的方法检查,均应符合规定。其他应符合注射剂项下有关的各项规定(通则0102)。效价测定取本品5支,按标示效价分别加适量含0.1%牛血清白蛋白的0.9%氯化
免疫血清的制备及效价测定
实验概要本实验制备了抗绵羊红细胞 (SRBC)的免疫血清并对其效价进行了测定。实验原理1. 制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B 细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B 细胞系产生该决定簇的
免疫血清的制备及效价测定
实验概要本实验制备了抗绵羊红细胞 (SRBC)的免疫血清并对其效价进行了测定。实验原理1. 制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B 细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B 细胞系产生该决定簇的
免疫血清的制备及效价测定
制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B 细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B 细胞系产生该决定簇的抗体,因此用抗原免疫机体获得的免疫血清一般均为多克隆抗体。 制备的免疫血清的质量(特异性、
IgG抗A效价测定的检查过程
采集被检对象静脉血,取血清标本50微升加入等体积的牛血清白蛋白,37度水浴温育30-60分钟,倍比稀释后依次将稀释血清分别加入标记的为主凝胶抗人球蛋白卡中,在所有孔中加入等量A型0.5%红细胞悬液后37度孵育5分钟,用专用离心机离心5分钟并观察结果。
尿激酶的效价测定
1 酶活力(1)试剂 牛纤维蛋白原溶液取牛纤维蛋白原,加巴比妥一氯化钠缓冲液(pH 7.8)制成每1ml中含6.67mg可凝结蛋白的溶液。牛凝血酶溶液 取牛凝血酶,加巴比妥一氯化钠缓冲液(pH 7.8)制成每1ml中含6.0单位的溶液。牛纤维蛋白溶酶原溶液 取牛纤维蛋白溶酶原,加三羟甲基氨基甲烷缓冲
尿激酶的效价测定
1 酶活力(1)试剂 牛纤维蛋白原溶液取牛纤维蛋白原,加巴比妥一氯化钠缓冲液(pH 7.8)制成每1ml中含6.67mg可凝结蛋白的溶液。牛凝血酶溶液 取牛凝血酶,加巴比妥一氯化钠缓冲液(pH 7.8)制成每1ml中含6.0单位的溶液。牛纤维蛋白溶酶原溶液 取牛纤维蛋白溶酶原,加三羟甲基氨基甲烷缓冲
双层平板法测噬菌体效价的优缺点
双层平板法的优点:①加了底层培养基后,可使原来底面不平的玻璃皿的缺陷得到了弥补;②所形成全部噬菌体斑都接近处于同一平面上,因此不仅每一-噬菌斑的大小接近、边缘清晰,而且不致发生上下噬菌斑的重叠现象;③因上层培养基中琼脂较稀,故形成的噬菌斑较大,更有利于计数。
IgG抗A效价测定的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群:暂无。 检查前:空腹,清晨取血为佳。 检查时:放松身体,积极配合医生。 检查过程 采集被检对象静脉血,取血清标本50微升加入等体积的牛血清白蛋白,37度水浴温育30-60分钟,倍比稀释后依次将稀释血清分别加入标记的为主凝胶抗人球蛋白卡中,在所有孔中加入等量A型0.
ELISA测定抗体效价方法
我用的是间接ELISA,以下copy自我的毕业论文:将抗原用包被液稀释至约10 ?g/mL;分别将阳性血清和阴性血清用TBS倍比稀释,稀释梯度从1:200,1:400至1:204800,二抗用的是HRP标记的羊抗兔IgG(1:5000稀释) 。酶标仪测定450nm处各个孔的吸光度(A450),计算阳
肝素钙的效价测定方法
照肝素钠项下的方法测定抗Ⅱa因子效价应为标示值的90%~110%,抗Xa因子效价与抗Ⅱa因子的效价比应符合规定。
硫酸鱼精蛋白的效价测定
效价测定照硫酸鱼精蛋白生物测定法(通则1213)测定,应符合规定,测得的结果应为标示值的90%~110%。
凝血酶的效价测定
纤维蛋白原溶液的制备 取纤维蛋白原约30mg,精密称定,用0.9% 氯化钠溶液1.5ml溶解,加凝血酶0.1ml(约3单位),快速摇匀,室温放置约1小时至完全凝固,取出凝固物,用水洗至洗出液加硝酸银试液不产生浑浊,在105℃干燥3小时,称取重量,计算纤维蛋白原中含凝固物的含量(%)。然后用0.
抑肽酶的效价测定方法
底物溶液取N-苯甲酰-L精氨酸乙酯盐酸盐171.3mg,加水溶解并稀释至25ml。临用新制。胰蛋白酶溶液取胰蛋白酶对照品适量,精密称定,加盐酸滴定液(0.01mol/L)溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.8单位(每1ml中约含1mg)的溶液,临用新制并置冰浴中。胰蛋白酶稀释液精密量取胰蛋白酶溶液1
尿激酶的效价测定介绍
1、酶活力 (1)试剂 牛纤维蛋白原溶液取牛纤维蛋白原,加巴比妥一氯化钠缓冲液(pH 7.8)制成每1ml中含6.67mg可凝结蛋白的溶液。 牛凝血酶溶液 取牛凝血酶,加巴比妥一氯化钠缓冲液(pH 7.8)制成每1ml中含6.0单位的溶液。 牛纤维蛋白溶酶原溶液 取牛纤维蛋白溶酶原,加三羟
凝血酶的效价测定
效价测定纤维蛋白原溶液的制备取纤维蛋白原,加0.9%氯化钠溶液适量溶解,用0.05 mol/L磷酸氢二钠溶液或0.05mol/L磷酸二氢钠溶液调节pH值至7.0~7.4,再用0.9%氯化钠溶液稀释成含0.1%凝固物的溶液,备用。标准品溶液的制备取凝血酶标准品,加0.9%氯化钠溶液溶解并分别定量稀释制
临床化学检查方法介绍IgG抗A效价测定
IgG抗A-效价测定介绍: IgG抗A-效价测定是检查孕妇血清中有无IgG性质的抗A抗体并滴定其效价,评估ABO-HDN发生的可能性。IgG抗A-效价测定正常值: IgG抗A效价
抗生素效价生物测定
实验方法原理 管碟法是扩散法中的一种,是将已知浓度的标准抗生素溶液与未知浓度的样品溶液分别加到一种标准的不锈钢小管(即牛津小杯)中,在含有敏感试验菌的琼脂表面进行扩散渗透。比较两者对被试菌的抑制作用,测量出抑菌圈的大小,以计算抗生素的浓度。在一定的浓度范围内,抗生素的浓度与抑菌圈直径在双周半对数表上
垂体后叶粉的效价测定方法
升压素照升压素生物测定法(通则1205)测定,即得。缩宫素照缩宫素生物测定法(通则1210)测定,并将测得结果与升压素效价进行比较,即得。
替考拉宁的效价测定方法
效价测定取本品适量,精密称定,用灭菌水溶解并定量稀释制成每1ml中约含1000单位的溶液,照抗生素微生物检定法(通则1201第一法)测定。1000替考拉宁单位相当于lng的替考拉宁。