从大规模裂解物中制备λ噬菌体颗粒
材料：缓冲液和溶液：氯仿NaCl（固体）聚乙二醇（PEG 8000）SM酶和缓冲液：胰Dnase I (1mg/ml)胰Dnase I (1mg/ml)于TE中（ph7.6）离心机和转子：Sorvall GSA 转子或相当型号专用设备：量筒（2L）载体和菌株：大肠杆菌培养物，经λ噬菌体感染和裂解方法：用PEG沉淀噬菌体颗粒1、 将含有λ噬菌体的裂解培养物冷却至室温，加胰Dnase I和Dnase 至终浓度约为1ug/ml，室温温育30min。2、 每500ml培养物加入29.2固体NaCl（终浓度为1mon/L），搅拌使其溶解。将培养物冰浴1h。3、 4℃，11000g（8300r/min于Sorvall GSA转子中）离心10min以去除细胞碎片，将四份培养物的上清混合置于2L的干净量筒中。4、 测定所收集上清的总体积，然后转移至2L的烧瓶中，加固体PEG至终浓度为1......阅读全文
从大规模裂解物中制备λ噬菌体颗粒
材料：缓冲液和溶液：氯仿NaCl（固体）聚乙二醇（PEG 8000）SM酶和缓冲液：胰Dnase I (1mg/ml)胰Dnase I (1mg/ml)于TE中（ph7.6）离心机和转子：Sorvall GSA 转子或相当型号专用设备：量筒（2L）载体和菌株：大肠杆菌培养物，经λ噬菌体感染和裂解方
从大规模裂解物中制备λ噬菌体颗粒实验
实验方法原理 从大规模培养物中制备的 λ 噬菌体，可在高盐存在下用聚乙二酵 ( PEG ) 沉淀的办法从裂解物中回收得到。残余的细胞碎片和 PEG 可用氯仿抽提。在进一步纯化之前，建议测定噬菌体制备物的得率。实验材料 大肠杆菌培养物试剂、试剂盒 氯仿NaCl聚乙二醇SM胰 DNaseⅠ仪器、耗材 S
从大规模裂解物中制备λ噬菌体颗粒实验
从大规模培养物中制备的 λ 噬菌体，可在高盐存在下用聚乙二酵 ( PEG ) 沉淀的办法从裂解物中回收得到。残余的细胞碎片和 PEG 可用氯仿抽提。在进一步纯化之前，建议测定噬菌体制备物的得率。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理从大规模培养物中制备的 λ 噬菌体，可在高盐存
从大规模裂解物中制备λ噬菌体颗粒实验
实验方法原理 从大规模培养物中制备的 λ 噬菌体，可在高盐存在下用聚乙二酵 ( PEG ) 沉淀的办法从裂解物中回收得到。残余的细胞碎片和 PEG 可用氯仿抽提。在进一步纯化之前，建议测定噬菌体制备物的得率。
制备DNA测序模板实验——小量裂解物中制备λ噬菌体DNA
实验材料重组λ噬菌体试剂、试剂盒DNA酶ⅠRNA酶ⅠPEGSMSDSEDTA异丙醇乙酸钠TE仪器、耗材巴斯德吸管试管离心机实验步骤1. 在新鲜配制的λ顶层琼脂糖和λ琼脂糖平板上，通过在平板上裂解适于λ噬菌体生长的大肠杆菌菌株，制备重组λ噬菌体毒种原液。2. 取700 μl 毒种液加入无菌的1.5
λ噬菌体分离物的快速分析(从平板裂解物中纯化λDNA)实验
对有希望的基因组或 cDNA 克隆的分析，通常开始于用限制酶消化 λ 噬菌体 DNA 的小量制备物，并对消化产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。所获得的 DNA 可用作限制酶的底物、RNA 合成（由噬菌体 SP6、T3 和 T7 编码的依赖于 DNA 的 RNA 聚合酶来完成）的模板以及 PCR 的模板。本
λ噬菌体分离物的快速分析(从平板裂解物中纯化λDNA)实验
实验方法原理 对有希望的基因组或 cDNA 克隆的分析，通常开始于用限制酶消化 λ 噬菌体 DNA 的小量制备物，并对消化产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。所获得的 DNA 可用作限制酶的底物、RNA 合成（由噬菌体 SP6、T3 和 T7 编码的依赖于 DNA 的 RNA 聚合酶来完成）的模板以
λ噬菌体分离物的快速分析(从平板裂解物中纯化λDNA)实验
实验方法原理 对有希望的基因组或 cDNA 克隆的分析，通常开始于用限制酶消化 λ 噬菌体 DNA 的小量制备物，并对消化产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。所获得的 DNA 可用作限制酶的底物、RNA 合成（由噬菌体 SP6、T3 和 T7
通过凝胶电泳测定λ噬菌体原种和裂解物中DNA
实验方法原理 本方案阐述了一种快速估计 λ 噬菌体原种中 DNA 含量的方法。该方法首先可用于发现原种和裂解物中的噬菌体颗粒的得率是否能满足大量纯化的需要，其次可用于检测纯化过程，以找到出问题步骤。
用甲酰胺从大规模培养物中提取λ噬菌体DNA实验
实验方法原理 可用甲酰胺代替 SDS/蛋白酶 K 将纯化的噬菌体颗粒去除外壳。这种方法虽然不是很有效，但在某种意义上它比以前的操作方法更快。 实验材料 限
用甲酰胺从大规模培养物中提取λ噬菌体DNA实验
可用甲酰胺代替 SDS/蛋白酶 K 将纯化的噬菌体颗粒去除外壳。这种方法虽然不是很有效，但在某种意义上它比以前的操作方法更快。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理可用甲酰胺代替 SDS/蛋白酶 K 将纯化的噬菌体颗粒去除外壳。这种方法虽然不是很有效，但在某种意义上它比以前的操
用甲酰胺从大规模培养物中提取λ噬菌体DNA实验
实验方法原理 可用甲酰胺代替 SDS/蛋白酶 K 将纯化的噬菌体颗粒去除外壳。这种方法虽然不是很有效，但在某种意义上它比以前的操作方法更快。实验材料 限制性内切核酸酶λ 噬菌体颗粒试剂、试剂盒 EDTA乙醇甲酰胺NaClTETris-Cl仪器、耗材 琼脂糖凝胶硼硅酸盐巴斯德吸管实验步骤 一、材料1.
通过凝胶电泳测定λ噬菌体原种和裂解物中DNA的含量实验
实验方法原理 本方案阐述了一种快速估计 λ 噬菌体原种中 DNA 含量的方法。该方法首先可用于发现原种和裂解物中的噬菌体颗粒的得率是否能满足大量纯化的需要，其次可用于检测纯化过程，以找到出问题步骤。实验材料 λ 噬菌体 DNAλ 噬菌体裂解物或原种试剂、试剂盒 2.5X SDS-EDTA 染料混合物
通过凝胶电泳测定λ噬菌体原种和裂解物中DNA的含量实验
本方案阐述了一种快速估计 λ 噬菌体原种中 DNA 含量的方法。该方法首先可用于发现原种和裂解物中的噬菌体颗粒的得率是否能满足大量纯化的需要，其次可用于检测纯化过程，以找到出问题步骤。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理本方案阐述了一种快速估计 λ 噬菌体原种中 DNA 含量
λ噬菌体噬菌斑的挑取实验
遗传上同源的 λ 噬菌体原种是通过 "挑取” 一个完全独立的噬菌斑并将含有裂解物的琼脂/琼脂糖保存于贮存液中而获得的。获得的原种可用于制备噬菌体的平板裂解物或液体培养物，也可用于以后的分析。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理遗传上同源的 λ 噬菌体原种是通过 "挑取” 一个
用蛋白酶K和SDS从大规模培养物中提取λ噬菌体DNA实验
通过一种有效的蛋白酶（如蛋白酶 K ) 的消化作用及随后的酚：氯仿抽提，就能从大规模制备的 λ 噬菌体中很好地分离到 DNA。该方法也适用于小量（50~100 ml ) 制备物。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理通过一种有效的蛋白酶（如蛋白酶 K ) 的消化作用及随后的酚：
用蛋白酶K和SDS从大规模培养物中提取λ噬菌体
实验方法原理 通过一种有效的蛋白酶（如蛋白酶 K ) 的消化作用及随后的酚：氯仿抽提，就能从大规模制备的 λ 噬菌体中很好地分离到 DNA。该方法也适用于小量（50~100 ml ) 制备物。
用蛋白酶K和SDS从大规模培养物中提取λ噬菌体DNA实验
实验方法原理 通过一种有效的蛋白酶（如蛋白酶 K ) 的消化作用及随后的酚：氯仿抽提，就能从大规模制备的 λ 噬菌体中很好地分离到 DNA。该方法也适用于小量（50~100 ml ) 制备物。实验材料 蛋白酶 K限制性内切核酸酶λ 噬菌体颗粒试剂、试剂盒 氯仿透析缓冲液EDTA乙醇酚酚：氯仿SDS乙
培养细胞标记和裂解物的制备实验
温和去污裂解法 SDS煮沸法 实验材料 培养细胞 试剂、试剂盒
培养细胞标记和裂解物的制备实验
温和去污裂解法 SDS煮沸法 实验材料 培养细胞 试剂、试剂盒
培养细胞标记和裂解物的制备实验
实验材料 培养细胞试剂、试剂盒 DMEMHClTBSTris仪器、耗材 微量离心管Plexiglas盒吸头细胞刮子冷冻离心机实验步骤 1. 培养待标记的细胞至适当的生长期。 对于贴壁细胞： 2a. 吸去培养液，用37℃的含血清不加标记物的标记培养液洗尽残存的含磷酸盐培养液，吸尽该培养液。 3a.
λ噬菌体噬菌斑的挑取实验
实验方法原理 遗传上同源的 λ 噬菌体原种是通过 "挑取” 一个完全独立的噬菌斑并将含有裂解物的琼脂/琼脂糖保存于贮存液中而获得的。获得的原种可用于制备噬菌体的平板裂解物或液体培养物，也可用于以后的分析。
λ噬菌体噬菌斑的挑取实验
实验方法原理 遗传上同源的 λ 噬菌体原种是通过 "挑取” 一个完全独立的噬菌斑并将含有裂解物的琼脂/琼脂糖保存于贮存液中而获得的。获得的原种可用于制备噬菌体的平板裂解物或液体培养物，也可用于以后的分析。实验材料 λ 噬菌体试剂、试剂盒 氯仿SM仪器、耗材 硼硅酸盐巴斯德设管（配有橡皮球）或微量移液
单链和双链M13噬菌体DNA的大规模制备
实验方法原理 这个方案主要用于制备大量 M13 噬菌体的双链 DNA，因在实验室中 M13 噬菌体经常被用作克隆载体，以及在某些特殊用途时需要制备大量的单链噬菌体 DNA，如当一个特定的重组体被多次用于制备反射性标记探针或构建大量定点突变体时
单链和双链M13噬菌体DNA的大规模制备
实验方法原理 这个方案主要用于制备大量 M13 噬菌体的双链 DNA，因在实验室中 M13 噬菌体经常被用作克隆载体，以及在某些特殊用途时需要制备大量的单链噬菌体 DNA，如当一个特定的重组体被多次用于制备反射性标记探针或构建大量定点突变体时。实验材料 大肠杆菌 F' 菌株M13 噬菌体原液
单链和双链M13噬菌体DNA的大规模制备
这个方案主要用于制备大量 M13 噬菌体的双链 DNA，因在实验室中 M13 噬菌体经常被用作克隆载体，以及在某些特殊用途时需要制备大量的单链噬菌体 DNA，如当一个特定的重组体被多次用于制备反射性标记探针或构建大量定点突变体时。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理这个方案主
噬菌体颗粒的分类
噬菌体颗粒在结构上有很大差别，一般可分成三种类型，即无尾部结构的二十面体，有尾部结构的二十面体和线状体，迄今已知的噬菌体大多数是有尾部结构的二十面体。噬菌体有毒（烈）性噬菌体和温和噬菌体两种类型。侵入宿主细胞后，随即引起宿主细胞裂解的噬菌体称作毒性噬菌体。毒性噬菌体被看作正常表现的噬菌体。温和噬菌体
λ噬菌体DNA的制备
实验概要本实验介绍了λ噬菌体DNA的制备、操作步骤和注意事项。实验原理λ噬菌体是最早使用的克隆载体，λ噬菌体的基因组是一长度约为50kb的双链DNA分子，它在宿主细胞有两种生活途径：其一是裂解生长，环状DNA 分子在细胞内多次复制，合成大量噬菌体基因产物，装配成噬菌体颗粒，裂解宿主菌再进行下一次
杆状病毒储液制备实验——从单层培养中制备
实验材料单层培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒（野生型的或重组）试剂、试剂盒含10％胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1
杆状病毒储液制备实验——从悬浮培养中制备
实验材料悬浮培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒（野生型的或重组）试剂、试剂盒含10％胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1