就这样做轻松搞定实时PCR探针设计

除了为克隆基因、预测编码蛋白而需要研究基因的构成外,当前在基因组学上的努力也包括对基因组构成的研究,以分析具有结构和调控因子插入的基因。近源物种分析成为比较基因组学的主要内容,被认为是研究进化、基因功能和人类疾病的重要方法。 利用该方法分析微生物,特别是细菌的基因组,早在 1996 年就已开始识别出细菌中的保守基因和与亚种相关的毒性基因(Fredricks and Reiman 1996)。这方面的进展促生了新的、大规模的检测和识别致病菌的方法。近源种 PCR 可以用来研究进化上相关的种,它们在基因组上有一 些共同的特点,这些保守的区域可被用于在基因组水平识别新种。还可以用该技术在尚未测序的物种的基因组中扩增同源基因。 设计策略 根据多元序列比较和引物设计的一般规律来设计近源种 PCR 引物。通过比较少数几个大的相近序列识别出保守区域,这些区域即是近源种引物的可能结合位点。近源种的比较需要对少数大的相近序列......阅读全文

扫描探针显微镜共享

仪器名称:扫描探针显微镜仪器编号:04001035产地:美国生产厂家:美国维易科精密公司型号:DI-3100出厂日期:200307购置日期:200402所属单位:航院>强度与振动中心>电镜室放置地点:103-105固定电话:固定手机:固定email:联系人:华心(010-62772379,13701

离子探针分析仪应用

目前可以应用于下列五个方面的分析研究:1. 表面分析(包括单分子层的分析),诸如催化、腐蚀、吸附、和扩散等一些表面现象均通过SISM获得了成功的分析研究。2. 深度剖面分析(深度大于50nm的分析),在薄膜分析、扩散和离子诸如等有关研究中,SISM是测定杂质和同位素的深度浓度 分布最有效的表面分析工

核酸探针标记的实验过程

实验原理分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于转基因植物拷贝数的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将

杂交探针的检测实验3

实验步骤1.  暗室中,以42~45℃水浴,温育盛有4盎司(113.3 g)Kodak NTB-2放射自显影胶乳瓶30 min。同时,在500 ml 三角瓶中预热等体积的水至相同温度。2.  胶乳熔化后,缓慢沿三角瓶壁(以一角度)倒入瓶中并混匀(轻旋1~2次,防止气泡产生)。 3.  分装胶乳于尼龙

开尔文探针显微镜概述

  开尔文探针显微镜是一种用于材料科学领域的分析仪器,于2013年9月2日启用。  技术指标  可持续稳定得到原子级图像。用原子力显微镜模式对云母样品进行5-10nm范围的扫描成像,测量图像中相邻云母原子的间距值;要求测量值在:0.5-0.55nm范围内。STM模式下对HOPG样品进行10nm范围内

扫描探针显微镜共享

仪器名称:扫描探针显微镜仪器编号:05017496产地:日本生产厂家:日本精工公司型号:SPI4000/SPA300HV出厂日期:200410购置日期:200512所属单位:材料学院>新型陶瓷国家重点实验室>王晓慧实验室放置地点:逸夫楼2202固定电话:固定手机:固定email:联系人:张辉(010

扫描俄歇微探针(SAM)

   扫描俄歇微探针(SAM);    基本功能:   (1)可进行样品表面的微区选点分析(包括点分析,线分析和面分析);   (2)可进行深度分析;   (3)化学价态研究    用途:   纳米薄膜材料,微电子材料的表 面和界面研究及摩擦化学研究。

DNA探针根据其来源分类

DNA探针根据其来源有3种:一种来自基因组中有关的基因本身,称为基因组探针(genomic probe);另一种是从相应的基因转录获得了mRNA,再通过逆转录得到的探针,称为cDNA探针(cDNA probe)。与基因组探针不同的是,cDNA探针不含有内含子序列。此外,还可在体外人工合成碱基数不多的

验室电子探针介绍

电子探针是通过加速和聚焦的极窄的电子束为探针,激发试样中的某一微小区域,使其发出特征X射线,由仪器配备的四道波谱仪、一道能谱仪、一个阴极发光成像系统接收并测定该X射线的波长和强度,即可对该微区的元素作定量或定性分析。将其与电镜功能相结合,能有效的把显微组织和元素成分联系起来,成为目前研究亚微观结构和

基因探针的制备相关介绍

  进行分子突变需要大量的探针拷贝,后者一般是通过分子克隆(molecular cloning)获得的。克隆是指用无性繁殖方法获得同一个体、细胞或分子的大量复制品。当制备基因组DNA探针前,应先制备基因组文库,即把基因组DNA打断,或用限制性酶作不完全水解,得到许多大小不等的随机片段,将这些片段体外

常见RNA探针的技术特点

cRNA探针:是以cDNA为模板,通过体外转录而获得的。因为它是一种单链探针,因此也避免了应用双链cDNA探针做杂交反应时存在的两条之间的复性问题。cRNA与RNA之间形成的杂交体要比cDNA-RNA杂交体稳定。cRNA-RNA之间形成的杂交体不受RNA酶的影响。因此杂交反应后可用RNA酶处理,以除

DNA探针的标记实验

探针标记法             实验方法原理 分子杂交是核酸链以碱基配对规则的一种结合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一

离子探针分析仪简介

  离子探针分析仪,即离子探针(Ion Probe Analyzer,IPA),又称二次离子质谱(Secondary Ion Mass Spectrum,SIMS),是利用电子光学方法把惰性气体等初级离子加速并聚焦成细小的高能离子束轰击样品表面,使之激发和溅射二次离子,经过加速和质谱分析,分析区域可

共聚焦荧光探针的选择

共聚焦荧光探针的选择共聚焦激光扫描显微镜是20世纪80年代来发展起来的一种新型高精度显微镜系统,辅以各类荧光探针或荧光染料与被测物质特异性结合,不仅可观察固定的细胞、组织切片,还可对活细胞的结构、分子、离子进行实时动态地观察和检测。荧光探针的发展非常迅速,目前仅美国Molecular Probes公

关于DNA探针的应用介绍

  DNA探针可以用来诊断寄生虫病,现场调查及虫种鉴定,可用于病毒性肝炎的诊断,遗传性疾病的诊断,可用于检测饮用水病毒含量。具体方法:用一个特定的DNA片段制成探针,与被测的病毒DNA杂交,从而把病毒检测出来。与传统方法相比具有快速、灵敏的特点。传统的检测一次,需几天或几个星期的时间,精确度不高,而

关于基因探针的标记介绍

  为了确定探针是否与相应的基因组DNA杂交,有必要对探针加以标记,以便在结合部位获得可识别的信号,通常采用放射性同位素32P标记探针的某种核苷酸α磷酸基。但近年来已发展了一些用非同位素如生物素-亲合素系统  、地高辛配体等作为标记物的方法。非同位素标记的优点是保存时间较长,而且避免了同位素的污染。

手动探针台的使用方式

  1.将样品载入真空卡盘,开启真空阀门控制开关,使样品安全且牢固地吸附在卡盘上。  2.使用卡盘X轴/Y轴控制旋钮移动卡盘平台,在显微镜低倍物镜聚焦下看清楚样品。  3.使用卡盘X轴/Y轴控制旋钮移动卡盘平台将样品待测试点移动至显微镜下。  4.显微镜切换为高倍率物镜,在大倍率下找到待测点,再微调

半自动探针台的功能

  通过和外接的测试仪器4156C以及温度控制设备TP03000A的连接,组成一个测试平台,完成对器件封装前的电性能测试(电阻,C/V,击穿特性等)。

消减探针的原理和应用

中文名称消减探针英文名称subtracted probe定  义经过消减杂交所构建的互补DNA探针。即将一种细胞或组织的全部信使核糖核酸(mRNA)逆转录合成单链cDNA,再与第二种细胞(不同类型或不同状态下的细胞)过量的mRNA或cDNA杂交,留下第一种细胞cDNA未被杂交的部分,制备成标记探针,

研究发展RNA“缓冲荧光探针”

近日,中国科学院大连化学物理研究所副研究员乔庆龙和徐兆超研究员团队发展了能够与RNA特异性可逆结合,在活细胞内对细胞核核仁稳定成像的“缓冲荧光探针”Nu-AN,实现了对核仁动态轮廓的成像,并通过活细胞内药物诱导下核仁特定形态的可视化,为核仁应激试剂的筛选提供可视化的工具。相关成果发表在《先进科学》。

DNA探针的标记实验

核酸探针分子杂交是指具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下可按碱基互补原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据标记物不同,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针两大类;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀

离子探针分析仪特点

离子探针分析仪有以下几个特点:1. 由于离子束在固体表面的穿透深度(几个原子层的深度)比电子束浅,可对这样的极薄表层进行成份分析。2. 可分析包括氢、锂元素在内的轻元素,特别是氢元素,这种功能是其它仪器不具备的。3. 可探测痕量元素(~50×10-9,电子探针的极限为~0.01%)。4. 可作同位素

RNA探针的概念和分类

RNA探针是指带有标记的能与组织内相对应的核苷酸序列互补结合的一段单链cDNA或cRNA分子。根据在RNA杂交中所使用的探针依其来源可分为三种:即特异性cDNA、cRNA探针和人工合成寡核苷酸探针。

纳米探针让肿瘤组织现形

  英国《自然·生物医学工程》杂志近日在线发表的一篇论文,描述了一种进入肿瘤后发出荧光的纳米探针,可在癌症手术时作为通用显像剂。研究团队在小鼠实验中成功使用了这种类似晶体管的探针,并发现其能标记出直径小于1毫米的肿瘤结。  目前对许多癌症,尤其是早期或较早期的实体肿瘤来说,手术切除仍是主要的治疗方案

单链DNA探针技术简介

用双链探针杂交检测另一个远缘DNA时,探针序列与被检测序列间有很多错配。而两条探针互补链之间的配对却十分稳定,即形成自身的无效杂交,结果使检测效率下降。采用单链探针则可解决这一问题。单链DNA探针的合成方法主要有下列两种:(1) 以M13载体衍生序列为模板,用Klenow片段合成单链探针; (2)

DNA探针的标记实验

实验方法原理 分子杂交是核酸链以碱基配对规则的一种结合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一条用某种可以检测的进行标记,这条链就称为核酸探针。因此,核酸探针的制备是分子杂交技术的关键。放射性同位素标记是最早采用的也是目前最常用的核酸探针标记方法。

末端标记DNA探针技术

现以Klenow片段标记3'末端为例说明末端标记的方法。1、材料:待标记的双链含凹缺3'末端的DNA。2、设备:高速台式离心机,水浴锅等。3、试剂:(1)3种不含标记的dNTP各为200mmol/L。(2)合适的限制酶。(3)[α-32P] dNTP:3000Ci/mmol, 10m

“DNA探针”的分类及介绍

DNA探针分为两类:同位素标记的探针和非同位素标记的探针。同位素标记的探针通常有很高的放射比活性,杂交的灵敏度高,但使用期限短,且有放射性危害,污染物处置困难,需要特殊的仪器和设备,不适用于普通实验室。近年来非同位素标记法得到很大发展,如酶促标记法(如生物素、地高辛标记法)和化学标记法(如荧光生物素

电子探针的结构特点

电子探针X射线显微分析仪(简称电子探针)利用约1Pm的细焦电子束,在样品表层微区内激发元素的特征X射线,根据特征X射线的波长和强度,进行微区化学成分定性或定量分析。电子探针的光学系统、真空系统等部分与扫描电镜基本相同,通常也配有二次电子和背散射电子信号检测器,同时兼有组织形貌和微区成分分析两方面的功

电子探针的结构原理

(1)电子光学系统。电子束直径0.1~1μm,电子束穿透深度1~3μm。被激发原子发射特征X射线谱过程如下:围绕原子核运动的内层电子,被电子束的电子轰击后,其他外层电子为补充轰击出的电子而发生跃迁,在跃迁过程中释放出能量,即发射出X射线。(2)X射线谱仪。测量各种元素产生的X射线波长和强度,并以此对