抗血清中去除交叉反应性抗体实验
试剂、试剂盒 封闭缓冲液 封闭液 细胞悬浮缓冲液 抗体 LB 培养基 仪器、耗材 Sorval GSA 转子或相当转子 适用于处理细菌的超声波破碎仪 大肠杆菌 Y1090 hsdR 实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存缓冲液和试剂的组分请见时录 12。将贮存液稀释到适当的浓度。封闭缓冲液10 mmol/L Tris-Cl(pH8.0)150 mmol/L NaCl0.05%(V/V)Tween-20封闭液(1%m......阅读全文
亲和层析法去除交叉反应性抗体实验
本节介绍一种利用结合细菌蛋白质的基质去除粗制免疫球蛋白中与细菌编码蛋白质发生反应成分的方法(de Wet et al.1984)。该方法也适用于利用培养的细胞或组织抽提物去除交叉反应抗体。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒缓冲液和
亲和层析法去除交叉反应性抗体实验
试剂、试剂盒 缓冲液和溶液 细胞裂解缓冲液 NaOH Tris-缓冲盐溶液 TBS Triton X-100 溶菌酶
亲和层析法去除交叉反应性抗体实验
试剂、试剂盒 缓冲液和溶液细胞裂解缓冲液NaOHTris-缓冲盐溶液TBSTriton X-100 溶菌酶胰 DNA 酶 I制备用于文库筛选的抗体大肠杆菌培养液仪器、耗材 离心和转子亲和层析柱溴化氢活化的 Sepharose 4B实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液,缓冲液和试剂的组分请见附录 12将贮
烯丙基三烷氧基硅的交叉偶联反应
2007年,EmilioAlacid等人[9]提出了烯丙基三烷氧基硅和苯乙烯卤化物的交叉偶联反应。烯丙基三烷氧基硅是由相应的炔和三烷氧基硅用金属铑催化得到,操作较简便。产物没有立体选择性,有机硅化物具有高稳定性,低毒性,高回收率,可适用于工业化大生产。
烯丙基三氟硼酸钾的交叉偶联反应
Pd催化的偶联反应已经广泛应用于C-C键的形成[7]。Pd催化的烯丙基三氟硼酸钾和卤代芳基或烯烃的新型Suzuki交叉偶联反应,于2009年由Gary等人[8]提出。传统的Suzuki交叉偶联反应是使用BH3做有机金属衍生物,如今已经被广泛应用于生产,但是这条路线有其缺陷和不足:首先,硼酸容易二
抗血清有哪些鉴定方法?
1.抗体特异性的鉴定常用双向免疫扩散法。(1)粗抗原及纯抗原之间皆有一条沉淀线,且两者互相融合,则已产生单价特异性抗体;(2)若纯化抗原出现一条,而粗抗原出现多条线,且一条沉淀线与纯抗原沉淀线相连接,需去除杂抗;(3)若不出现沉淀线,表示免疫失败。2.抗体效价的测定 颗粒性抗原采用凝集试验,可溶性抗
异源抗血清的定义
中文名称异源抗血清英文名称heterologous antiserum定 义来源于异种动物(如马对人),含特异性抗体的血清。应用学科免疫学(一级学科),免疫病理、临床免疫(二级学科),感染免疫(三级学科)
异源抗血清的定义
中文名称异源抗血清英文名称heterologous antiserum定 义来源于异种动物(如马对人),含特异性抗体的血清。应用学科免疫学(一级学科),免疫病理、临床免疫(二级学科),感染免疫(三级学科)
抗血清的纯化与保存
(1)采血:加强免疫的动物2—3次后,可通过耳静脉或眼球(小鼠)采血,进行抗血清效价测定。当效价达到理想的高度后,可以采血。采血方式可以从心脏直接取血,也可通过动脉放血。待血液凝固后用针筒或吸管吸取血清。 (2)抗血清的纯化与保存:除抗体外血清中含有多种其他蛋白成分。为了避免这些蛋白质干扰抗体
抗血清制备法生化检验
抗血清制备法:抗血清指含有抗体的血清。传统的抗血清制备方法是将某种抗原通过多次注入动物,数十天后或数月后,采集动物血,立即分离出血清。此抗血清在保存或应用前必须作效价和特异性鉴定及纯化。(一)免疫动物的选择免疫动物的选择基本要求:1.抗原与免疫动物的种属差异越远越好。2.动物必须适龄、健壮、无感染、
多克隆抗血清的制备
材 料(带 V 项 目 见 附 录 1)家兔、大鼠、小鼠或合适品系的仓鼠弗 氏 完 全 佐 剂(CFA; Sigma)含 1〜2 mg/m l 纯化蛋白抗原的 PBS 溶液:吸取其中 10〜20 Mg,在考马斯亮蓝染色的 SDS-聚丙烯酰胺凝胶上分析未见有污染的条带VPBS弗 氏 不 完 全 佐 剂
放射免疫分析含有特异性抗体的抗血清检定
含有特异性抗体的抗血清是放射免疫分析的主要试剂,常以抗原免疫小动物诱发产生多克隆抗体而得。抗血清的质量直接影响分析的灵敏度和特异性。抗血清质量的指标主要有亲和常数、交叉反应率和滴度。①亲和常数(affinityconstant):常用K值表示。它反映抗体与相应抗原的结合能力。K 值的单位为 mol/
抗交叉的反应性抗原的抗体致的疾病
急性风湿热是抗与自身蛋白质有交叉反应的外来抗原的抗体所致疾病的最好例子。其特征是关节炎、心脏瓣膜损伤引起的心内膜炎和心肌炎。抗链球菌细胞壁蛋白质的抗体与心肌细胞上的交叉抗原结合而引起心肌损伤。
关于免疫组织化学的交叉反应原因
指抗体除与其相应的抗原发生特异性反应外还与其它抗原发生反应。产生的原因有以下几个方面: 1. 抗原特异性指用于免疫动物的抗原性物质中含有多种抗原分子,它引起动物产生针对多种抗原分子特异性的相应抗体。任何其它物质只要含有一种或多种与上述物质相同的抗原分子,必将与上述多特异性的抗血清发生交叉反应。
抗血清的纯化技术生化检验
抗血清的纯化技术:纯化的目的是尽量去除抗血清中与目的抗体不相关的成分,防止与特定抗原反应时起干扰作用。最常见的纯化方式是提取特异性IgG或单价特异性抗血清。一、特异性IgG抗血清制备首先用硫酸铵或硫酸钠盐析法粗提丙种球蛋白,再进一步纯化,常用的方法有:1.离子交换层析法:离子交换剂有DEAE纤维素和
异源抗血清的功能介绍
中文名称异源抗血清英文名称heterologous antiserum定 义来源于异种动物(如马对人),含特异性抗体的血清。应用学科免疫学(一级学科),免疫病理、临床免疫(二级学科),感染免疫(三级学科)
抗血清的制备方法和过程
1、动物的选择羊、马、鸡、猴、豚鼠,都是常用的免疫动物,在实验中,选择动物时应考虑抗原与动物的种属关系、抗原性质与动物种类、免疫血清的需要量、免疫血清的要求以及动物个体等因素。免疫用动物应选适龄、健壮.最好为雄性。最常用的实验动物是家兔,一般选择选择年龄在6个月以上当年繁殖的♂性,体重2 ~3公斤,
抗血清的保存有哪些条件?
1.2~8℃保存:用于短期保存; 2.冷冻保存:是常用的抗体保存方法。将抗体分为小包装,在-80~-20℃保存,一般可保存5年,但应避免反复冻融; 3.真空干燥保存:用真空冻干机进行干燥,封装后可长期保存,一般在冰箱中可保存5~10年。
多克隆抗血清的制备1
首要的问题是需要制备多克隆抗体还是单克隆抗体。多克隆抗体的优势在于可在多种不同生物种系中制备,花费精力较少。另外 ,多克隆抗体特别适用于分析变性蛋白质以及免疫沉淀法和免疫印迹法。作者:J.E.科利跟等,译者:曹雪涛等,本实验来自「精编免疫学实验指南」—使用弗氏佐剂制备多克隆抗体的免疫接种法实验步骤材
Chemical-Reviews:Pd金属催化剂用于交叉偶联反应和相关反应
2001-2012年发布的具有钯催化剂负载的Heck反应机理模式的示意图 交叉偶联和相关反应是一类高效合成方案,通常由分子Pd作为催化剂来促进。 然而,基于或多或少高度分散的Pd金属的催化剂也被用于此领域,并且它们的使用已经延伸到其中大多数反应。近日,来自帕多瓦大学的Andrea Biffis(通
私有独特型和交叉反应性独特抗原的介绍
1.私有(或个体)独特型 私有独特型(individual Id,IdI)是指某一特异的抗体分子所特有的独特型,一般认为V区中D基因片段所编码的CDR3与此关系较为密切。 2.交叉反应性独特型 交叉反应性独特型(cross-reactive idiotype,CRI或IdX)是指来自不同个
基于过渡金属催化脱羧的交叉偶联反应研究获进展
联芳烃化合物普遍存在于天然产物、药物和有机功能材料的结构骨架之中,以廉价易得、易于控制的原料出发,经过简洁方便的路径合成联芳烃化合物吸引了众多化学工作者的关注。 在国家重大科学问题导向项目、国家自然科学基金重点项目和中科院重要方向项目的资助下,中国科学院福建物质结构研究所结构化学国家重点实验室
免疫球蛋白抗血清制备方法
免疫球蛋白抗血清制备方法此法用于制备间接法抗抗体。因抗原为可溶性,故多需加佐剂。(1)淋巴结注射法1)选择体重2~3Kg的健康雄性家兔( 2只以上),编号;2)在家兔两后脚掌共注射活卡介苗,50mg(约0.6mL.每只足庶部皮下0.1mL,皮内0.2mL)。7~10d后,鼠或国窝处淋巴结肿大如黄豆或
兔多克隆抗血清的制备实验
实验材料 抗原试剂、试剂盒 PBS乙醇仪器、耗材 注射针头注射器培养箱实验步骤 1. 取2 ml 的弗氏完全佐剂加到2 ml 的溶于PBS的纯化抗原中,使之乳化。用3 ml 注射器抽取此乳化液,接上22G注射针头,排出注射器中的气泡。 2. 将兔子敢在固定架上,用一只手抓住兔的颈背部毛皮,另一只
抗血清的鉴定与保存生化检验
抗血清的鉴定与保存:一、特异性抗体的鉴定1.抗体特异性鉴定:常采用双向免疫扩散法。2.抗体的效价的鉴定:常采用双向免疫扩散法。一是仅稀释抗血清,与同一浓度抗原反应;另一种是抗血清、抗原同时稀释作棋盘滴定。3.抗体的纯度鉴定:常用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定医|学教育网整理。二、抗血清的保存动物血
学科“交叉”比交叉学科更重要
■王义遒 ◎ 形成交叉学科要有相对固定、共同且比较复杂的科学或技术研究对象。 ◎ 不同学科的领头人必须对母学科有相当深入的理解,能掌握其精神实质和处理问题方法的精髓,并具有一定的融合能力。 ◎ 交叉学科成员应与母学科保持经常性联系,不断从母学科中获得新知识、新技术的滋养,并在交叉学科中发挥
镍催化剂催化的交叉偶联反应研究取得系列进展
在现代有机反应新方法学的研究领域,以廉价镍为催化剂催化的交叉偶联反应是其中的热点之一,特别是在铃木偶联反应方面,已有许多创新性成果见诸报道。但是,目前依然存在大量的科学问题亟待解决:首先,以膦/磷基团活化的酚类化合物为反应物的偶联反应无法进行;其次,在已报道的其它底物的反应中,绝大多数反应存在催
如何理解抗原抗体结合的特异性和交叉反应性
如何理解抗原抗体结合的特异性和交叉反应性。 抗原与抗体结合的特异性,是指某一抗原表位与相应抗体结合的特异性。这种结合的分子机制是抗原表位的空间结构与抗体分子超变区互补的结果。而交叉反应是指两种抗原分子表面存在有相同或相似的抗原表位时,同一种抗体结合的现象。因此,交叉反应实质上也是抗原与抗体的特
学科交叉不等于交叉学科-成功的交叉奇点关键在哪里
当下,高校的学科交叉发展和学科共融共生成为大势所趋。但正如英国学者迈克尔·吉本斯提出的,学科交叉被广泛认为是积极的,所有人都相信只要努力追求,就可以实现学科交叉,但最终实现的只是多学科的简单叠加。吉本斯所言一语成谶,我国高校在学科交叉建设的过程中,学科假交叉、不愿交叉和交叉同质化等问题逐渐显露。“假
抗血清的制备的免疫程序有哪些?
1.免疫原的剂量:免疫原剂量过大或过小都可使动物产生免疫耐受,在一定剂量范围内,免疫原剂量越大,产生的抗体效价越高。2.免疫途径:有皮内、皮下、肌内、静脉、腹腔、淋巴结等途径。皮内或皮下免疫时一般采用多点注射。初次免疫一般选择皮内接种,加强免疫和颗粒性抗原一般选择静脉注射。宝贵抗原可选择淋巴结内微量