从组织分离粗制质膜组分的另一实验方法
从组织分离粗制质膜组分的另一实验方法 试剂、试剂盒 匀浆缓冲液 仪器、耗材 Dounce 氏玻璃匀浆器(15-ml) 带 A 杵 实验步骤 设备Dounce 氏玻璃匀浆器(15-ml),带 A 杵试剂匀浆缓冲液(配方,见 试剂的配制 PP.234-240)操作程序全部操作在 0~4℃ 下进行。1) 在冰冷的匀浆缓冲液屮切碎组织块,倾出血水。用匀浆缓冲液漂洗组织碎块, 并将它们置于冰上。重复上述......阅读全文
从组织分离粗制质膜组分的另一实验方法
Neville(1968) 所述的方法对分离鼠肝质膜的效果较好,但对分离其他组织的质膜不一定适用。这里,介绍一种从其他组织制备粗制质膜组分的方法。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒匀浆缓冲液仪器、耗材Dounce 氏玻璃匀浆器(15-ml)带 A 杵实验步骤设备Doun
从组织分离粗制质膜组分的另一实验方法
从组织分离粗制质膜组分的另一实验方法 试剂、试剂盒 匀浆缓冲液
分离肝脏质膜的-Neville-法实验
分离肝脏质膜的 Neville 法实验 实验材料 切碎的大鼠肝脏 试剂、试
分离肝脏质膜的-Neville-法实验
实验材料切碎的大鼠肝脏试剂、试剂盒溶液 A蔗糖溶液 B仪器、耗材Doimce 氏玻璃匀浆器离心管折射仪SW-28 转头及薄壁 polyallomer(同质异晶聚合物)SW-28 离心管实验步骤材料与设备切碎的大鼠肝脏(约 25 g; 冷冻保存至用前)注:人的胎盘是极好的制取胰岛素受体的原料。遗憾的是
分离肝脏质膜的-Neville-法实验
实验材料 切碎的大鼠肝脏试剂、试剂盒 溶液 A 蔗糖溶液 B仪器、耗材 Doimce 氏玻璃匀浆器离心管 折射仪SW-28 转头及薄壁 polyallomer(同质异晶聚合物)SW-28 离心管实验步骤 材料与设备切碎的大鼠肝脏(约 25 g; 冷冻保存至用前)注:人的胎盘是极好的制取胰岛素受体的原
质膜的液态二相离心分离
用葡聚糖(Dextran)和聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)二相不连续梯度分离纯化动植物样品的细胞膜片断(特别是质膜)的方法始于1989年(文献1)。这种方法的特点是快速,操作简单,重复性好。只需要低速离心机(4,000rpm),分离成本低。用PEG和Dextran 混合
质膜的液态二相离心分离
用葡聚糖(Dextran)和聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)二相不连续梯度分离纯化动植物样品的细胞膜片断(特别是质膜)的方法始于1989年(文献1)。这种方法的特点是快速,操作简单,重复性好。只需要低速离心机(4,000rpm),分离成本低。用PEG和Dextran 混合后再
组织的分离实验
机械分散法 胰蛋白酶消化消化分离法 胶原酶消化分离法 离心分离法 EDTA 消化分离法 试剂、试剂盒
组织的分离实验
试剂、试剂盒 Hanks仪器、耗材 镊子网筛碟皿吸管注射器培养瓶实验步骤 一、切割分离法在进行组织块培养时,可采用剪切法,一般多剪切成1 mm3大小的块。具体操作如下:1. 无菌切取1 cm3组织一块,置入青霉素瓶或小烧杯中,左手斜持容器,右手持眼科尖剪或弯剪(剪柄较长为好)伸入容器中,反复剪切组
牙髓组织的分离
试剂和材料:1. 无镁和钙的PBS平衡盐溶液(PBSA);2. MSC培养基:含2mmol/L 谷氨酰胺的α-MEM,添加15%胎牛血清,0.1mmol/L左旋抗坏血酸磷酸盐,100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素;3. 培养皿;4. 精细镊(小号和大号);5. 牙科碳化钻头;6. 牙挖器;7
质膜外面
中文名称质膜外面英文名称exoplasmic face定 义质膜朝向细胞外的一面应用学科细胞生物学(一级学科),细胞结构与细胞外基质(二级学科)
从豌豆组织分离叶绿体实验_叶绿体分离
实验材料叶子组织试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液山梨醇BSAHEPES-KOHEDTA仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 制备 Percoll 梯度(1) 两个 50 ml 的聚碳酸酯离心管中分别加入 25 ml 50% 的 PBF-Percoll 溶液。50% PBF-Percoll0.
新鲜组织分离原代细胞
新鲜手术取得或冻存的组织于37 ℃ 快速复温,原代细胞培养工作液清洗3次,尽量修剪去除纤维组织,将组织块剪成约1 mm3大小的小块,弯头吸管吸取组织块均匀种植于75 cm2 培养瓶瓶底,瓶内加入少量原代细胞培养工作液,小心翻转培养瓶使组织块黏附于瓶底,置于37 ℃、5% CO2培养箱中培养6-8
线粒体分离实验—从组织中分离线粒体
实验材料肝脏试剂、试剂盒MS仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 取出肝脏,注意不要弄破胆囊。放进一置于冰上的烧杯中,剪去任何结缔组织。称其质量后放回烧杯中。用锋利的剪刀、手术刀或剃须刀片将之切成 1~2 mmol/L 的薄片,用匀浆缓冲液(1x MS) 冲洗两次以去除大部分的血。转移至匀浆器中。加入足够的
质膜的特性
一、质膜的不对称性质膜的内外两层的组分和功能有明显的差异.称为膜的不对称性。膜脂、膜蛋白和复合糖在膜上均呈不对称分布,导致膜功能的不对称性和方向性,即膜内外两层的流动性不同,使物质传递有一定方向,信号的接受和传递也有一定方向等。膜脂的不对称性:脂分子在脂双层中呈不均匀分布.质膜的内外两侧分布的磷脂的
什么是质膜?
质膜(plasma membrane)是每个细胞把自己的内容物包围起来的一层界膜又称细胞膜(cell membrane),一般厚度在5~10 nm。质膜与细胞内膜(即各种细胞器的膜)具有共同的结构和相近的功能,统称为生物膜,也常统一简称为膜(membrane)。质膜使细胞与外界环境有所分隔,而又保持
从豌豆组织分离叶绿体实验
叶绿体分离 实验材料 叶子组织 试剂、试剂盒
从豌豆组织分离叶绿体实验
叶绿体分离实验材料叶子组织 试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液
组织的分离实验_EDTA-消化分离法
实验方法原理EDTA是一种非酶性消化物,常用不含Ca2+和Mg2+的BSS 配成0.02%的工作液。关于EDTA的作用机制一般认为是:一些组织,尤其是上皮组织,在生存中需要Ca2+和Mg2+才能维持组织的完整性。EDTA能从这些组织生存环境中吸收这些离子,形成螯合物,能促进细胞相互分离。EDTA 作
组织的分离实验_离心分离法
实验方法原理如培养物为血液、羊水、腹水和胸水等细胞悬液时,可采用离心法分离。一般用低速500~1000 转/分速度,离心5~10 分钟即可。如悬液量大,离心时间可适当延长,但如离心速度过大和时间太长,易压挤细胞使之受损或死亡。微量全血法淋巴细胞培养时,可不必进行淋巴细胞分离,可采用全血培养法。在需用
质膜的特化结构
质膜常带有许多特化的附属结构。如:微绒毛、褶皱、纤毛、鞭毛等等,这些特化结构在细胞执行特定功能方面具有重要作用。由于其结构细微,多数只能在电镜下观察到。(一)、微绒毛微绒毛(microvilli)是细胞表面伸出的细长指状突起,广泛存在于动物细胞表面。微绒毛直径约为0.1μm。长度则因细胞种类和生理状
质膜的基本作用
质膜的基本作用是维护细胞内微环境的相对稳定,并参与同外界环境进行物质交换、能量和信息传递。另外,在细胞的生存、生长、分裂、分化中起重要作用。
质膜的化学组成
细胞膜主要由脂质和蛋白质组成。构成膜的蛋白质与脂的比例依据膜的类型(如质膜、内质网膜、高尔基体膜)、细胞类型(肌细胞、肝细胞)、生物类型(动物、植物和原核生物)的不同而不同。一般而言,脂占50%,蛋白质占40%,碳水化合物约占1~10%。膜脂主要包括磷脂、糖脂和胆固醇三种类型。
质膜的研究历史
1. E. Overton 1895发现凡是溶于脂肪的物质很容易透过植物的细胞膜,而不溶于脂肪的物质不易透过细胞膜,因此推测细胞膜由连续的脂类物质组成。2. E. Gorter & F. Grendel 1925用有机溶剂提取了人类红细胞质膜的脂类成分,将其铺展在水面,测出膜脂展开的面积二倍于细胞表
牙髓干细胞的分离培养——牙隨组织的分离
实验材料牙试剂、试剂盒灭菌无Ca2+和Mg2+的PBS(PBSA)MSC培养基消毒液(如聚维酮碘)仪器、耗材非灭菌使用高速牙科钻时的装备(如空气压缩机)培养皿精细镊(小号和大号)牙科碳化钻头牙挖器高速牙科钻实验步骤(a)用PBSA洗三遍,充分清洁牙齿表面。(b)用消毒液消毒,然后再用PBSA充分清洗
组织的分离实验_机械分散法
试剂、试剂盒Hanks仪器、耗材镊子网筛碟皿吸管注射器培养瓶实验步骤一、切割分离法在进行组织块培养时,可采用剪切法,一般多剪切成1 mm3大小的块。具体操作如下:1. 无菌切取1 cm3组织一块,置入青霉素瓶或小烧杯中,左手斜持容器,右手持眼科尖剪或弯剪(剪柄较长为好)伸入容器中,反复剪切组织至1
中间丝的分离方法实验——从组织中分离中间丝
实验材料牛舌试剂、试剂盒解聚缓冲液组装缓冲液匀浆缓冲液抽提缓冲液柱缓冲液PEM 缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、从牛舌上皮分离角蛋白中间丝1. 从当地屠宰场拿到新鲜牛舌。一条舌头通常可以产出几十毫克纯化了的角蛋白中间丝。2. 用刀片切刮,把舌中的肌肉和黏膜分开。舌黏膜片(大约 1cmx1 cm )
线粒体分离实验—从组织培养细胞中分离线粒体
实验材料细胞试剂、试剂盒RSBMS 缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞,转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中RSB(使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液)10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210 mmol
分离核仁实验—从人肝脏或胎盘组织中分离核仁
实验材料组织试剂、试剂盒NKM仪器、耗材粗孔滤纸Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 准备溶液:NKM:0.13 mol/L NaCl,5 mmol/L KCl,8 mmol/L 乙酸镁2.2 mol/L 蔗糖,10 mmol/L MgCl20.88 mol/L 蔗糖0.34 mol/L 蔗糖,含
组织的分离实验_胶原酶消化分离法
实验方法原理胶原酶是一种由细菌中提取出的酶,对胶原有很强的消化作用,适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织等。上皮细胞本身对胶原酶有一定耐性,但胶原酶对细胞间质有好的消化作用,可使上皮细胞与胶原成分脱离而不受伤害,效果甚好。此酶在钙和镁离子存在情况下仍有活性,故可用BSS和含有血清的培养液配制。实验