蛋白质复合体性质的研究
方案1 用 FLAG抗原表位标记蛋白质进行蛋白质免疫共沉淀 方案2 细胞裂解液中相互作用蛋白的亲和纯化 方案3 多蛋白质复合体的非变性琼脂糖凝胶电泳实验 方案4 BN-PAGE 蛋白质分析法 方案5 采用交联法和质谱法对蛋白质复合体进行拓扑学分析实验 方案6 亚秒级光交联：用水溶性金属复合体监控蛋白质-蛋白质相互作用实验 方案7 位点特异性蛋白质-DNA 光交联法实验 方案8 用 FRET 法分析体内蛋白质的相互作用实验 方案9 用 GFP 嵌合体监控蛋白质-蛋白质相互作用实验 方案10 蛋白质阵列：显微镜玻片的制备 方案11 蛋白质阵列：标记蛋白并通过阵列检测来探究蛋白质-蛋白质相互作用 方案12 蛋白质阵列：标记复合体并通过阵列检测来研究蛋白质-小分子相互作用 方案13 蛋白质阵列：阵列......阅读全文
如何分离DNA蛋白质复合体与RNA蛋白质复合体的混合物
可以借助一些多组分抽提试剂，比如TRIzol可以将RNA/DNA/蛋白质分开。经TRIzol处理后，RNA位于上层水相中，DNA处于中间层，蛋白质则在下层。可分别取出水相用异丙醇沉淀回收RNA；用乙醇沉淀中间层回收DNA；用异丙醇沉淀有机相回收蛋白质。
蛋白质复合体性质的研究
方案1 用 FLAG抗原表位标记蛋白质进行蛋白质免疫共沉淀 方案2 细胞裂解液中相互作用蛋白的亲和纯化 方案3 多蛋白质复合体的非变性琼脂糖凝胶电泳实验 方案4 BN-PAGE 蛋白质分析法 方案5 采用交联法和质谱法对蛋白质复合体进行拓扑
高尔基复合体的蛋白质糖基化
N-连接的糖链合成起始于内质网，完成于高尔基体。在内质网形成的糖蛋白具有相似的糖链，由Cis面进入高尔基体后，在各膜囊之间的转运过程中，发生了一系列有序的加工和修饰，原来糖链中的大部分甘露糖被切除，但又被多种糖基转移酶依次加上了不同类型的糖分子，形成了结构各异的寡糖链。糖蛋白的空间结构决定了它可
mRNA“戴帽”后能多产两百倍蛋白质
日本名古屋大学研究团队在最新一期《自然·生物技术》杂志上发表了一项名为“内部帽启动翻译”（ICIT）机制的创新研究。该机制下的仿佛戴着帽子的mRNA可产生200倍以上的蛋白质，为治疗癌症和蛋白质合成异常疾病提供了新思路。该成果为mRNA医学带来了革命性的进展，还揭示了通过长链非编码RNA和mRNA相
超级计算机帮助“组装”大型蛋白质复合体
红细胞中的血红蛋白分子通过以全有或全无的方式改变其形状来传输氧气。血红蛋白中相同蛋白质的四个拷贝像花瓣一样打开和关闭，在结构上相互耦合以相互作用。使用超级计算机，科学家们能够设计自组装的蛋白质，以组合和类似生命的分子，如血红蛋白。科学家表示，他们的方法可以应用于有用的技术，如药物靶向，人工能量收
方案6－用水溶性金属复合体监控蛋白质蛋白质相互作用
实验材料待测蛋白质样品试剂、试剂盒过硫酸铵4 X 凝胶上样缓冲液甲醇PdCl25 X 反应缓冲液TMPyP三氟乙酸Tris-二吡啶钌仪器、耗材加热器光交联反应器SepPak C18 容器分光光度计注射器滤膜实验步骤一、用 Pd（Ⅱ）金属化 TMPyP1.将 1mg (1.2umol) 的 TMPyP
研究发现两种蛋白质复合体促进神经细胞黏结
新华网东京4月19日电 日本庆应义塾大学研究人员日前在动物实验中发现，在老鼠小脑中，有两种蛋白质的复合体能促进神经细胞的黏结和成熟。这一研究成果已刊登在新一期美国《科学》杂志上。 研究人员发现，在老鼠小脑的颗粒细胞和“Purkinje”细胞之间，“Cbln1”和“GluD2”这两种蛋白质形
起始复合体
中文名起始复合体外文名pre-replicative complex 2(PRC2)定义DNA复制起点的引发体，亦称为起始复合体。在DNA复制起点（简写为ori）形成。作用即为启动DNA复制。
Polyadenylation－of－mRNA
Gene expression requires the coordination and integration of multiple processes, including transcription, splicing, polyadenylation, nucleocytoplasmic
核孔复合体的功能
核孔复合体的功能是核质交换的双向选择性亲水通道，是一种特殊的跨膜运输的蛋白质复合体。他具有双功能和双向性。双功能表现在两种运输方式：被动扩散与主动运输。双向性表现在既介导蛋白质的入核运输，又介导RNA RNP等的出核运输。 1949-1950年间，H.G.Callan与S.G.Tomlin在用
mRNA差异显示技术(mRNA－differetial－display)(2)
6.技术路线 mRNA 差异显示技术 The fluoroDD System •Builds on the HIEROGLYPH™ system –TMR-labeled anchored primers –Increased primer concentrations –I
mRNA差异显示技术(mRNA－differetial－display)(1)
1.概 述mRNA差异显示技术（mRNA differetial display）是一种快速有效的克隆差异性表达基因的方法。 方法建立：1992年 Liang P和Pardee首次应用DD技术对比人类乳腺癌细胞与正常细胞所表达的mRNA，以此来克隆癌细胞所特有的基因 目前已应用于个各领域：
mRNA工艺技术平台之mRNA制剂
mRNA疫苗或药物的生产工艺，主要分为质粒DNA原液制备、mRNA原液制备、mRNA制剂制备三个阶段。本文讨论第三阶段的工艺平台，也是当前挑战最大的环节。 关键的制剂技术突破解决了mRNA的成药性问题，使其从60年的科研之路走向临床商业化应用，并在此次新冠疫苗应用中大放异彩。据公开信息， BN
方案14－蛋白质阵列：用“三明治法”研究复合体溶液
实验材料捕获抗体检测鸡尾酒混合液试剂、试剂盒裂解缓冲液磷酸盐缓冲液含40%甘油的PBS含 0.01g ml BSA的PBS含 500 mmol L 甘氨酸含0.1% Tween的PBS含 1% BSA的PBST仪器、耗材偶联有蛋白 G 或蛋白 A 珠子的亲和层析柱设备BSA-NHS玻片离心机荧光片扫
mRNA疫苗可能会产生意想不到的蛋白质
即使在新冠疫情期间接种了数十亿剂疫苗后，信使核糖核酸（mRNA）疫苗仍令人惊讶。近日，《自然》发表的一项研究表明，mRNA疫苗可能会促使细胞产生少量意想不到的蛋白质。研究人员提出一种解决方案，有助于使未来基于mRNA的疫苗或药物更安全、更有效。 mRNA引导细胞的核糖体产生新的蛋白质。 英国
开发新型－－IVTmRNA－递送平台，用于潜在蛋白质替代疗法
强大的体外转录 (IVT)-mRNA 的潜在临床应用，以恢复有缺陷的蛋白质功能，很大程度上取决于它们通过开发安全有效的传递平台成功的细胞内传递和瞬时翻译。本研究开发了一种创新的(国际ZL申请中)方法，将ivt -mrna与蛋白转导域(PTD)技术相结合，作为一种高效的递送平台。 基于 PTD
核孔复合体的结构及功能
结构 核孔复合体是指镶嵌在核孔上的一种复杂的结构。主要有以下四种结构组分： 1.胞质环：位于核孔边缘的胞质面一侧，又称外环； 2.核质环：位于核孔边缘的核质面一侧，又称内环； 3.辐：由核孔边缘伸向中心，呈辐射状八重对的纤维； 4.栓：又称中央栓。位于核孔中心，呈颗粒状或棒状。 核孔
核孔复合体的功能及定义
功能 核孔复合体的功能是核质交换的双向选择性亲水通道，是一种特殊的跨膜运输的蛋白质复合体。他具有双功能和双向性。双功能表现在两种运输方式：被动扩散与主动运输。双向性表现在既介导蛋白质的入核运输，又介导RNA RNP等的出核运输。 1949-1950年间，H.G.Callan与S.G.Toml
方案5－交联法和质谱法对蛋白质复合体进行拓扑学分析
实验材料纯化的蛋白质复合体试剂、试剂盒缓冲液交联试剂二甲基亚砜（DMSO)4 X SDS 上样缓冲液终止溶液仪器、耗材Bio-Spin 柱可鉴定蛋白质的质谱仪可根据蛋白质序列计算肽链的软件包超滤装置实验步骤一、交联反应条件的优化不同方法得到的同种蛋白质复合体的质量与纯度不同，因此建议进行各种实验来摸
mRNA的分离
与rRNA和tRNA不同的是，哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3'端均有一poly(A)尾，因此可以用oligo(dT)－纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNAdmonds等，1971;At Leder，1972）。在构建cDNA文库时， 必须经上述纯化步骤制备mRNA模板。进行
mRNA的分离
与rRNA和tRNA不同的是，哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3'端均有一poly(A)尾，因此可以用oligo(dT)－纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNAdmonds等，1971;At Leder，1972）。在构建cDNA文库时， 必须经上述纯化步骤制备mRNA模板。进行
如何提取mrna
1 细胞总RNA的提取1）、6孔板细胞（CNE-2）汇合度为90-100%时,取出无菌室,去其上清,用PBS洗两次后,每孔加TRIZOL试剂（Gibco公司） 1 ml,摇匀,无菌罩内消化3-5分钟（观察：液体变粘稠,细胞脱壁）.2）、将各孔内消化好的细胞裂解液吸到一DEPC处理过的1.5 ml E
mRNA的纯化
实验概要本文介绍了mRNA的纯化方法。实验原理mRNA的分离方法较多，其中以寡聚（dT）-纤维素柱层析法最为有效，已成为常规方法。此法利用mRNA 3‘末端含有Poly（A ）的特点，在RNA流经寡聚（dT）纤维素柱时，在高盐缓冲液的作用下，mRNA被特异地结合在柱上，当逐渐降低盐的浓度时或在低
mRNA的分离
与rRNA和tRNA不同的是，哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3'端均有一poly(A)尾，因此可以用 oligo(dT)－纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNAdmonds等，1971;At Leder，1972）。在构建cDNA文库时， 必须经上述纯化步骤制备mRNA
独品是只能在活细胞中真实的核酸蛋白质复合体包括什么
核糖核蛋白复合体,简写为RNP，是由特定蛋白与特定RNA形成的复合体。小的核糖核蛋白复合体有：信号识别颗粒、端粒酶、核糖核酸酶P等；大的核糖核蛋白复合体如核糖体。1.信号识别颗粒signal recognition particle (SRP)在真核生物细胞质中一种小分子RNA和六种蛋白的复合体，此
方案3－多蛋白质复合体的非变性琼脂糖凝胶电泳实验
实验材料含有目标蛋白的细胞提取物试剂、试剂盒琼脂糖凝胶脱色液凝胶染色液甘油2 X 上样缓冲液SDS-聚丙烯酰胺凝胶仪器、耗材玻璃纸锥形瓶凝胶电泳装置微量离心过滤装置小型离心机微波炉Ultrafree-DA 装置实验步骤一、非变性凝胶的制备在非变性凝胶缓冲液中，制备水平的 0.8% 琼脂糖凝胶，规格约
生化细胞所揭示mRNA出核复合物TREX的组装和招募分子机制
12月7日，国际学术期刊Nucleic Acids Research在线发表了中科院上海生命科学研究院生化与细胞所程红研究组题为Aly and THO are required for assembly of the human TREX complex and asso
麻省教授连发两篇Cell解析转录机制
来自麻省大学医学院的研究人员全面分析了一种对于真核细胞转录剪接十分重要的复合物：外显子拼接复合体(exon junction complex，EJC)，并研究了相关RNA互助组，从中发现EJC的作用机制，这对于深入解析转录后剪接具有重要意义。相关成果公布在Cell杂志在线版上。 文章的
正粘病毒培养和增殖
(1)培养〖HT5SS〗 甲型流感病毒虽能引起人和多种动物的疾病，但大多数毒株具有比较明显的宿主特异性。各型流感病毒都能在鸡胚内良好增殖。初代分离时最好应用羊膜腔接种法，但许多毒株也能适应于鸡胚尿囊腔，特别是已在羊膜腔内传代的毒株。丙型流感病毒只能在羊膜腔内增殖。多数流感病毒可在牛胚肾、鸡胚肾、猴
细胞蛋白水平与mRNA丰度间的依赖关系（二）
在稳定状态的时候，mRNA的水平决定了蛋白质的水平，而且蛋白质的合成会有延迟(Figures 3A and 3B)。很难严格地定义“稳定的状态”，姑且认为我们通常做组学实验时收集的细胞，如果在某个时间段内(通常几小时)的蛋白或者mRNA水平保持相对恒定，则被看做是 “稳定的状态”。在短暂的适