透射电镜超薄切片和染色实验
实验步骤1. 取材 对一般的动物组织取材的要求如下：(1) 标本材料要新鲜，取材速度要快：由于生物组织离体后，细胞将会立即释放出各种水解酶而引起细胞自溶，使其微细结构发生改变而产生假象，故要尽量保持材料的新鲜，经解剖、手术或活检取材后迅速投入固定液内，以尽量保持细胞在活体状态的结构。(2) 取材小，取材部位要准确：由于用于电镜标本制备的固定液其渗透速度极慢，同时超薄切片的面积又很小，一般取材不超过 0.5-1mm3, 故取材时必须注意取材部位。如取材部位不当，则无法获得预期的结果。(3) 所用的固定液及器材都必须预冷，以尽可能降低离体细胞内水解酶的活性，减少细胞自溶，一般均将固定液保存于 4℃冰箱内，取材用的剪刀或手术刀片及载玻片可置于冰块上预冷。(4) 切割组织的刀、剪必须很锋利，操作时避免拉、扯、锯、压等动作所造成的机械损伤。如果标本是病毒的分离培养物，则必须注意其数量、浓度。这种培养物取材后可用塑料离心管离心取其沉淀物，其......阅读全文
制备超薄切片仪器所需样本的方法与步骤
制备超薄切片的设备为超薄切片机，使用的刀为玻璃刀或钻石刀。为了能切成薄片，包埋标本的包埋剂一定要达到一定的硬度，通常是用树脂聚合包埋。方法与步骤：锇酸和戊二醛固定样品→丙酮逐级脱水→环氧树脂包埋_→以热膨胀或机械伸缩的方式切片_→重金属（铀，铅）盐染色．
聚焦离子束法制备冷冻含水超薄切片
低温电子断层成像三维重构（cryo-ET）技术是发展结构生物学和细胞生物学重要的研究手段。该技术可以得到更真实的接近天然状态的细胞内部高分辨率的三维结构以及蛋白质大分子定位及相互作用的信息，是蛋白质组学研究的重要辅助手段被成为“可视化蛋白质组学”（Visual Approach to Prote
扫描电镜的原理
成像原理1.透射电镜技术透射电镜是以电子束透过样品经过聚焦与放大后所产生的物像，投射到荧光屏上或照相底片上进行观察。透射电镜的分辨率为0.1~0.2nm，放大倍数为几万~几十万倍。由于电子易散射或被物体吸收，故穿透力低，必须制备更薄的超薄切片(通常为50~100nm)。其制备过程与石蜡切片相似，但要
石蜡切片免疫组化染色实验操作流程
1．石蜡切片脱蜡至水：（石蜡切片染色前应置 60℃ 1 小时） 。① 二甲苯 、II，各 10 分钟。② 梯度酒精：100%，2 分钟 95%，2 分钟 80%，2 分钟 70% 2 分钟。③ 蒸馏水洗：5 分钟，2 次（置于摇床）。2．过氧化氢封闭内源性过氧化物酶：3%H2 O2 ，室温 10 分
细胞固定切片和包埋实验
哺乳动物肌梭的初级终末—使 用 1 um 连续切片的光学显微镜研究实验实验材料猫 部分显露肌梭试剂、试剂盒二甲砷酸钠缓冲液戊二醛四氧化锇乙醇环氧乙烷甲苯胺蓝派罗宁仪器、耗材玻片实验步骤一、固定将取出的肌肉置于含 5% 戊二醛的 0.1mol/l 二甲砷酸钠缓冲液内，PH 值为 7.2, 原位固定 5
细胞固定切片和包埋实验
经验交流（0）实验材料猫 部分显露肌梭 试剂、试剂盒二甲砷酸钠缓冲液
细胞固定切片和包埋实验
哺乳动物肌梭的初级终末—使 用 1 um 连续切片的光学显微镜研究实验 实验材料 猫 部分显露肌梭
超薄切片机在单个动物特定组织基因和蛋白多个基因调...
超薄切片机在单个动物特定组织基因和蛋白多个基因调节网络同时研究中的应用Compresstome VF-700超薄切片机实现单个动物特定组织基因和蛋白多个基因调节网络的同时研究研究者使用最新型的切片仪器Compresstome VF-700(Precisionary Instruments Inc.,
透射电镜灌注固定戊二醛用多大浓度
物品, 透射电镜, 制备步骤 ．一、取材： 组织块于1立毫米 二、固定：2.5%戊二醛磷酸缓冲液配制固定2或更间 用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15 三 1%锇酸固定液固定 2-3 用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15 三三、脱水：50%乙醇
关于病理切片的染色和封片的介绍
病理切片常用的染色方法是苏木素-伊红（Hematoxylin-Eosin）染色法，简称H.E染色法。这种方法对任何固定液固定的组织和应用各种包埋法的切片均可使用。苏木素是一种碱性染料，可使组织中的嗜碱性物质染成蓝色，如细胞核中的染色质等；伊红是一种酸性染料，可使组织中的嗜酸性物质染成红色，如多数
断裂—标记免疫电镜技术介绍
此法是先进行冷冻断裂，再做免疫标记，从而可以对断裂开的各种膜结构及胞浆断面进行标记。（1）临界点干燥法①固定：1.0%～2.5%戊二醛PBS液4℃1～2h，PBS冲洗3min×3。如为细胞悬液，可加入30%BSA后加入1%戊二醛，使BSA凝胶化，将凝胶切成2mm左右的小块，用30%的甘油—PBS浸透
三色书虱体内Wolbachia形态的超微结构观察
实验概要本研究运用透射电镜对三色书虱进行了超微结构观察，旨在进一步证实Wolbachia的存在，同时也进一步丰富Wolbachia的研究。主要试剂饿酸[Polysciences Inc.]戊二醛25%水溶液[国药集团化学试剂有限公司]环氧树脂[Tousimis research corporatio
电镜与样品制备技术
电镜样品取材方法 1 动物及人体组织的取材 动物组织的取材，应在麻醉（1%戊巴比妥钠按5ml/kg体重腹腔注射）或断头急性处死，解剖出所需器官，用解剖剪刀剪取一小块组织，放在干净的纸板上，滴一滴冷却的固定液，用新的、无油污锋利的（双面）刀片将材料切成大约1㎜宽，2～3㎜长的小块，从中挑选损伤小的小条
河蚌、田螺和乌贼切片观察实验
实验方法原理 1. 通过对河蚌外形及内部解剖的观察，了解软体动物门瓣鳃纲的一般结构及其特征。2. 通过对田螺外形及内部解剖的观察，了解软体动物门腹足纲的一般结构及其特征。3. 通过对乌贼外形及内部解剖的观察，了解软体动物门头足纲的一般结构及其特征。实验材料 河蚌切片田螺切片乌贼切片实验步骤 1
河蚌、田螺和乌贼切片观察实验
实验方法原理1. 通过对河蚌外形及内部解剖的观察，了解软体动物门瓣鳃纲的一般结构及其特征。2. 通过对田螺外形及内部解剖的观察，了解软体动物门腹足纲的一般结构及其特征。3. 通过对乌贼外形及内部解剖的观察，了解软体动物门头足纲的一般结构及其特征。实验材料河蚌切片田螺切片乌贼切片实验步骤1.
电子显微镜生物标本的制备及观察实验1
实验方法原理电子显微镜是细胞生物学研究的重要工具，它以电子束为照明源，利用电子流具有波动的性质，在电磁场的作用下，电子改变前进轨迹，产生偏转、聚焦，因而电子束透过标本后在电磁透镜的作用下可放大成像。高速运动的电子流其波长远比光波波长短，所以电镜分辨率远比光镜高，可达0.14 nm，放大倍率可达80万
电子显微镜生物标本的制备及观察实验_透射电子显微镜
实验方法原理电子显微镜是细胞生物学研究的重要工具，它以电子束为照明源，利用电子流具有波动的性质，在电磁场的作用下，电子改变前进轨迹，产生偏转、聚焦，因而电子束透过标本后在电磁透镜的作用下可放大成像。高速运动的电子流其波长远比光波波长短，所以电镜分辨率远比光镜高，可达0.14 nm，放大倍率可达80万
电子显微镜生物标本的制备及观察实验
透射电子显微镜 扫描电子显微镜 实验方法原理 电子显微镜是细胞生物学研究的重要工具，它以电子束为照明源，利用电子流具有波动的性质，在电磁场的作用下，
电子显微镜生物标本的制备及观察实验
透射电子显微镜 扫描电子显微镜 实验方法原理 电子显微镜是细胞生物学研究的重要工具，它以电子束为照明源，利用电子流具有波动的性质，在电磁场的作用下，
电子显微镜免疫细胞化学技术1
免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献，但由于光学分辨率的限制，不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此，Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白（ferritin）标记抗体的方法，为在细胞超微结构水平研究抗原抗体反应提供了可能。在此基础上，相继发展了杂交抗体
电子显微镜免疫细胞化学技术1
免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献，但由于光学分辨率的限制，不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此，Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白（ferritin）标记抗体的方法，为在细胞超微结构水平研究抗原抗体反应提供了可能。在此基础上，相继发展了杂交抗体
免疫细胞电镜技术
免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献，但由于光学分辨率的限制，不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此，Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法，为在细胞超微结构水平研究抗原 抗体反应提供了可能。在此基础上，相继发展了杂交抗
透射电镜的基本结构和原理
电子显微镜(electron microscopy，EM) 简称电镜，经过五十多年的发展已成为生物学、医学、化学、农林和材料科学等领域进行科学研究的重要工具，是人类认识自然，特别是研究机体微细结构的重要手段，电镜技术已成为上述各领域研究工作者应掌握的一项基本技能。电镜的创制者鲁斯卡(E.Ruska)
连续断层3D重构中的超薄切片制备
当需要以纳米级分辨率观察样品超微结构时，科学家通常借助电子显微镜（观察表面结构的扫描电镜 SEM 和观察内部结构的透射电镜 TEM）——它们是当前科研界可使用的最大显微成像工具。电镜成像要求对样品进行通常 20-150 nm的超薄切片，使用超薄切片机切割的切片厚度薄、表面平整、光滑且无人为干
免疫电镜相关技术实验——胶体金标记免疫电镜技术
实验材料病毒试剂、试剂盒胶体金仪器、耗材电子显微镜实验步骤免疫胶体金标记技术又称免疫金染色技术 (immunogold staining technique), 是 Faulk 和Taylor 于 1971 年发现直径为 5~50nm 的胶体金 (colloidal gold) 在电镜下具有很高的电
清华大学仪器共享平台Leica－冷冻超薄切片机
仪器名称：冷冻超薄切片机仪器编号：16002271产地：德国生产厂家：Leica型号：UC7+FC7出厂日期：201408购置日期：201602所属单位：生命学院>蛋白质研究技术中心>冷冻电镜平台样品制备>设施细胞冷冻电镜平台放置地点：清华大学生物译学馆U6-109(何添楼北侧，地下六层出1号电梯连
连续断层3D重构中的超薄切片制备
当需要以纳米级分辨率观察样品超微结构时，科学家通常借助电子显微镜（观察表面结构的扫描电镜 SEM 和观察内部结构的透射电镜 TEM）——它们是当前科研界可使用的最大显微成像工具。电镜成像要求对样品进行通常 20-150 nm的超薄切片，使用超薄切片机切割的切片厚度薄、表面平整、光滑且无人为干扰因
石蜡切片免疫荧光TUNEL和NEUN双标染色
石蜡切片免疫荧光TUNEL和NEUN双标染色曾经作过脑组织的TUNEL，也指导过别人做心肌的TUNEL，谈谈我的意见：蛋白酶K37度30min，好像有点偏长，我是10min。你是NBT/BICP显色的话，这说明你用的是AP系统，而不是HRP这样的话就不是用3%H2O2来去除内源性酶的了，（H2O2是
徕创生物扫描电镜检测透射电镜技术服务
透射电镜是一种高分辨率、高放大倍数的显微镜，是材料科学研究的重要手段，能提供极微细材料的组织结构、晶体结构和化学成分等方面的信息。透射电镜的分辨率为0.1～0.2nm，放大倍数为几万～几十万倍。透射电镜简介：透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,简称TEM
病毒透射电镜病毒标本制备
实验方法原理 病毒等微小颗粒标本可取其培养物经稀释或分离提纯后直接滴于附有支持膜的载网上用电镜观察。实验材料 病毒试剂、试剂盒 稀释液仪器、耗材 透射电镜实验步骤 悬液应尽量除去杂质如培养基残渣，细胞碎片、糖类及各种盐类的结晶等，这些杂质的存在会干扰染色及电镜观察。用该法的缺点是由于电子穿透能力很弱