明胶酶谱法操作
原理: Ø 酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明胶)电泳分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲 系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶,最后用考马斯亮蓝将凝胶染色,再脱色,在 蓝色背景下可出现白色条带,条带的强弱与MMP-2和MMP-9活性成正比。 复性原理:在电泳过程中,SDS与样品中的MMPs结合(当然是可逆性结合),破坏其氢键、疏水键而使MMPs不能发挥其分解明胶的作用,而只有当将胶置Trition中洗脱(最好是放在摇床上摇,30min/次,做2次或15min/次,4次。静置于Trition中是不妥的。)时,由于SDS被Trition结合而去除,从而使MMPs恢复了活性。 试剂的配制(1)配制10%SDS聚丙烯酰胺凝胶(含1.0mg/ml 明胶......阅读全文
明胶酶谱法操作
明胶酶谱法原理: Ø 酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明胶)电泳分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶,最后用考马斯亮蓝将凝胶染色,再脱色,在蓝色背景下可出现白色条带,条
明胶酶谱法操作
原理: Ø 酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明胶)电泳分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲 系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶,最后用考马斯亮蓝将凝胶染色,再脱色,在 蓝色背景下可
明胶酶谱法操作
实验概要酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明胶)电泳分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶,最后用考马斯亮蓝将凝胶染色,再脱色,在蓝色背景下可出现白色条带,条带的强弱与MMP-2
明胶酶谱法操作
明胶酶谱法 原理: Ø 酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明胶)电泳分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲 系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶,最后用考马斯亮蓝
明胶酶谱实验
实验材料 细胞匀浆组织提取物试剂、试剂盒 聚丙烯酰胺凝胶明胶浓缩胶Tris-甘氨酸缓冲液Triton X-100过硫酸铵甲醇醋酸考马斯亮蓝蛋白质上样缓冲液仪器、耗材 电泳糟凝胶成像仪实验步骤 在整个测定过程中,要避免可抑制酶活性的成分污染;Triton X-100洗涤过程要充分,这对恢复酶的活性十分
明胶酶谱实验
实验方法原理细胞外基质(ECM)是细胞生存的重要内环境,不仅含有胶原、糖蛋白、蛋白多糖等成分,而且含有大量的蛋白酶、细胞因子、黏附分子。ECM,尤其是其中的基底膜,是肿瘤转移过程中必须克服的生理屏障。基质金属蛋白酶家族(MMPs)可以降解细胞外基质,帮助肿瘤细胞克服这一屏障并为细胞增殖提供空间。MM
明胶酶谱实验
明胶酶谱法可用于:(1)明胶酶A(MMP-2)和明胶酶B(MMP-9)的测定;(2)测定明胶酶的抑制剂;(3)细胞与组织中明胶酶的定位。实验方法原理细胞外基质(ECM)是细胞生存的重要内环境,不仅含有胶原、糖蛋白、蛋白多糖等成分,而且含有大量的蛋白酶、细胞因子、黏附分子。ECM,尤其是其中的基底膜,
明胶酶谱实验
明胶酶谱法 实验方法原理 细胞外基质(ECM)是细胞生存的重要内环境,不仅含有胶原、糖蛋白、蛋白多糖等成分,而且含有大量的蛋白酶、细胞因子、黏附分子。ECM,
明胶酶谱实验
明胶酶谱法可用于:(1)明胶酶A(MMP-2)和明胶酶B(MMP-9)的测定;(2)测定明胶酶的抑制剂;(3)细胞与组织中明胶酶的定位。实验方法原理细胞外基质(ECM)是细胞生存的重要内环境,不仅含有胶原、糖蛋白、蛋白多糖等成分,而且含有大量的蛋白酶、细胞因子、黏附分子。ECM,尤其是其中的基底膜,
明胶酶谱分析法
实验概要本实验介绍了明胶酶谱分析法的基本原理及操作步骤。实验原理酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明胶)电泳分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶,最后用考马斯亮蓝将凝胶染色,再
酶法生产明胶的相关介绍
酶催化胶原降解制备明胶,与传统的碱法制备明胶的工艺相比,生产周期将会大大缩短,因此国外的明胶工作者一直重视对酶的研究。酶法制胶的研究从1962年开始,已经有50多年的历史,人们已经认识到了,经过酶对胶原降解能够制取明胶,但这样制取的明胶,其分子量分布偏宽,高分子量组份偏多,工艺上控制较难等。这些
YIJI基质金属蛋白酶(MMP)明胶酶谱法电泳分析试剂盒
YIJI基质金属蛋白酶(MMP)明胶酶谱法电泳分析试剂盒产品说明书(中文版) 主要用途 YIJI基质金属蛋白酶(MMP)明胶酶谱法(gelatin-zymography)电泳分析试剂是一种旨在通过明胶聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,在分离、蛋白复性、底物水解、染色等一系列步骤下,观察并半定
YIJI基质金属蛋白酶(MMP)明胶酶谱法电泳分析试剂盒...
YIJI基质金属蛋白酶(MMP)明胶酶谱法电泳分析试剂盒使用说明主要用途YIJI基质金属蛋白酶(MMP)明胶酶谱法(gelatin-zymography)电泳分析试剂是一种旨在通过明胶聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,在分离、蛋白复性、底物水解、染色等一系列步骤下,观察并半定量深蓝色背景中的无色清晰的基质金
什么是酶谱法
每一种酶都有自己的特征谱线值,利用酶的这一特性,可以对生物的各种酶进行检测。
伏安极谱法试验的操作步骤
1. 样品前处理:用预先加入1 mL硝酸(1+1)的取样品,采集水样100 mL。取50 mL水样于100 mL烧杯中,在电热板上加热浓缩至20~25 mL。待冷却后,用氨水(1+1)调节pH至中性,转移至50 mL容量瓶定容。 2. Cu离子的测定 (1) 移取15 mL水样至电极测量杯中
酸法生产明胶的相关介绍
明胶的生产主要由三部工序组成从原料的收集、保存和经过各种方式的对原料皮、骨的预处理,是明胶技术发展的前工序部分,胶原的降解即明胶的提取是第二工序部分,也是影响产率的关键部分,明胶的过滤、蒸发、灭菌、烘干等构成了明胶技术的后工序部分。 明胶的酸法与碱法生产通常是指明胶的原料前工序与提胶过程中化学
碱法生产明胶的相关介绍
碱法制备明胶过程中,含胶原的原料首先经浸灰、水洗和除脂等方式进行预处理,原料预处理后脂肪的含量较低,主要成分是胶原蛋白,在石灰或氢氧化钠和一定温度条件下胶原蛋白逐步降解为分子量不均一的多肤混合物,多肤溶液经浓缩、除湿和干燥等一系列处理后得到固体粉末。就产品的收率、性质和纯度而言,碱法能够生产出高
超滤法(ultrafiltration)分离明胶蛋白水溶液
一、实验目的1.熟悉超滤的基本原理、板式超滤器的结构及基本流程2.了解超滤过程中的影响因素如温度、压力、流量及物料分子量等因素对超滤通量的影响3.了解超滤器污染的原因及其对策 二、实验原理 超滤的技术原理近似机械筛分。当溶液体系由水泵进入超滤器时,在超滤器内的膜表面发生分离,溶剂(水)和其他
ICP法有效测定明胶中的多种有害元素
药品中使用了工业明胶,从中国国内部分制药企业生产的药品中检测出了超过安全基准的铬。中国国家食品药品监督管理局公布的药品抽检结果中,15家药用胶囊企业、1家明胶生产企业铬超标。受此事件影响,4月19日,日本厚生劳动省要求日本国内的各制药企业进行自检及安全保证。另外,由于本次中国相关部门进行的抽检中,不
什么是酶谱?
中文名称酶谱英文名称zymogram定 义酶分离实验中区带电泳的记录。样品中各种酶按照所带电荷和分子大小被分离,这些酶的活性可以通过特殊的染色反应显示,可以从酶谱上区分酶的类型和相对量。细菌样品的酶谱可辅助细菌分类。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
营养明胶
成分 蛋白胨 5g 牛肉膏 3g 明胶 120g 蒸馏水 1000mL pH6.8~7.0 制法 加热溶解、校正至pH7.4~7.6,分装小管,121℃高压灭菌10min,取出后迅速冷却,使其凝固。复查最终pH应为6.8~7.0。 试验方法 用琼脂培养
人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)酶联免疫分析
人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆,尿液及相关液体样本中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(N
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的作用
1、急性肾脏病变的早期标志物 实验发现,在缺血肾脏发生的极早期(2h内)即可在血、尿中检测到NGAL明显上调,对缺血-再灌注模型小鼠注射重组NGAL,可减少氮质血症,减轻肾脏损伤。人体研究也发现心脏术后患者在急性肾脏病发生的2h内,血、尿NGAL显著升高,据此,研究者推测NGAL可作为心脏术后
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的介绍
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)是lipocalin的一种,最初是在激活中性粒细胞中被发现的一种小分子量分泌性蛋白,现代研究表明,NGAL是诊断急性肾损伤的最有效生物学标志之一,也是早期糖尿病肾病的有效标志物之一。
什么是中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)是lipocalin的一种,最初是在激活中性粒细胞中被发现的一种小分子量分泌性蛋白,现代研究表明,NGAL是诊断急性肾损伤的最有效生物学标志之一,也是早期糖尿病肾病的有效标志物之一。
安谱推出明胶药用空心胶囊铬检测耗材整体解决方案
检测背景: 2012年4月15日,“一周质量报告”栏目率先爆料9家知名药厂生产的13个批次药品所用胶囊铬超标,最高超标90倍。据新华社电根据国家食品药品监督管理局网站消息,国家食品药品监督管理局日前发出公告,要求药用明胶、胶囊和胶囊剂药品生产企业对购进的原辅料和销售的产品严格实施
何为工业明胶?
工业明胶。资料图 工业明胶是一种从动物的结缔或表皮组织中的胶原部分水解出来的蛋白质。它具有许多优良的物理及化学性质,如形成可逆性凝胶、黏结性、表面活性 等,在食品工业中广泛地用作胶冻、乳化剂、稳定剂、黏合剂和澄清剂等。 基本信息 工业明胶,一种精
什么是极谱法?
极谱法(polarography)通过测定电解过程中所得到的极化电极的电流-电位(或电位-时间)曲线来确定溶液中被测物质浓度的一类电化学分析方法。于1922年由捷克化学家J.海洛夫斯基建立。极谱法和伏安法的区别在于极化电极的不同。极谱法是使用滴汞电极或其他表面能够周期性更新的液体电极为极化电极;
能谱法的简介
中文名称能谱法英文名称spectroscopy定 义用具有一定能量的粒子束轰击试样物质,根据被激发的粒子能量(或被试样物质反射的粒子能量和强度)与入射粒子束强度的关系图(称为能谱)实现试样的非破坏性元素分析、结构分析和表面物化特性分析的方法。应用学科机械工程(一级学科),分析仪器(二级学科),能谱