关于明胶酶谱法的注意事项介绍
1、明胶酶谱法注意事项—制备聚丙烯酰胺凝胶时应注意排除气泡 。 2、明胶酶谱法注意事项—明胶酶谱的活性受钙离子,锌离子,和pH值等因素的影响,因此缓冲液配制应严格准确,尽量用超纯水,孵育温度也掌握好。 3、明胶酶谱法注意事项—用大梳子。 4、明胶酶谱法注意事项—孵育液的pH最好在7.5-7.6,复性的Triton时间长了会有絮状物,所以实验时尽量使用新鲜配置的。 5、明胶酶谱法注意事项—孵育的37℃不要在CO2培养箱中,因为会改变孵育液的pH值,在普通孵箱即可。 6、明胶酶谱法注意事项—明胶要4℃保存,配好后1周内使用......阅读全文
明胶酶谱法操作
原理: Ø 酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明胶)电泳分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲 系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶,最后用考马斯亮蓝将凝胶染色,再脱色,在 蓝色背景下可
明胶酶谱法操作
明胶酶谱法 原理: Ø 酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明胶)电泳分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲 系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶,最后用考马斯亮蓝
明胶酶谱法操作
实验概要酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明胶)电泳分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶,最后用考马斯亮蓝将凝胶染色,再脱色,在蓝色背景下可出现白色条带,条带的强弱与MMP-2
明胶酶谱法操作
明胶酶谱法原理: Ø 酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明胶)电泳分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶,最后用考马斯亮蓝将凝胶染色,再脱色,在蓝色背景下可出现白色条带,条
明胶酶谱实验
实验材料 细胞匀浆组织提取物试剂、试剂盒 聚丙烯酰胺凝胶明胶浓缩胶Tris-甘氨酸缓冲液Triton X-100过硫酸铵甲醇醋酸考马斯亮蓝蛋白质上样缓冲液仪器、耗材 电泳糟凝胶成像仪实验步骤 在整个测定过程中,要避免可抑制酶活性的成分污染;Triton X-100洗涤过程要充分,这对恢复酶的活性十分
明胶酶谱实验
明胶酶谱法 实验方法原理 细胞外基质(ECM)是细胞生存的重要内环境,不仅含有胶原、糖蛋白、蛋白多糖等成分,而且含有大量的蛋白酶、细胞因子、黏附分子。ECM,
明胶酶谱实验
明胶酶谱法可用于:(1)明胶酶A(MMP-2)和明胶酶B(MMP-9)的测定;(2)测定明胶酶的抑制剂;(3)细胞与组织中明胶酶的定位。实验方法原理细胞外基质(ECM)是细胞生存的重要内环境,不仅含有胶原、糖蛋白、蛋白多糖等成分,而且含有大量的蛋白酶、细胞因子、黏附分子。ECM,尤其是其中的基底膜,
明胶酶谱实验
实验方法原理细胞外基质(ECM)是细胞生存的重要内环境,不仅含有胶原、糖蛋白、蛋白多糖等成分,而且含有大量的蛋白酶、细胞因子、黏附分子。ECM,尤其是其中的基底膜,是肿瘤转移过程中必须克服的生理屏障。基质金属蛋白酶家族(MMPs)可以降解细胞外基质,帮助肿瘤细胞克服这一屏障并为细胞增殖提供空间。MM
明胶酶谱实验
明胶酶谱法可用于:(1)明胶酶A(MMP-2)和明胶酶B(MMP-9)的测定;(2)测定明胶酶的抑制剂;(3)细胞与组织中明胶酶的定位。实验方法原理细胞外基质(ECM)是细胞生存的重要内环境,不仅含有胶原、糖蛋白、蛋白多糖等成分,而且含有大量的蛋白酶、细胞因子、黏附分子。ECM,尤其是其中的基底膜,
关于明胶酶谱法的凝胶制备介绍
1、明胶酶谱法凝胶的制备—玻璃板对齐后放入夹中,垂直卡紧,加满水检漏。 2、明胶酶谱法凝胶的制备—配10%分离胶,APS和TEMED作用为促凝,最后灌胶前加。若板不漏水,则将水倒出,并用吸水纸洗净后灌胶,灌至大约3/4处,上面加满水压平。 3、明胶酶谱法凝胶的制备—配浓缩胶,同样地,APS和
关于明胶酶谱法的实验步骤介绍
1、明胶酶谱法实验步骤:取对数期的癌细胞在的无血清培养基DMEM中培养24h。 2、明胶酶谱法实验步骤:次日收集上清液,将上清液移入离心管中 2000rpm 离心10min,-70℃储存备用。 3、明胶酶谱法实验步骤:根据细胞计数调整各组细胞培养上清液中的蛋白浓度(或者测定蛋白浓度调整使所上
关于明胶酶谱法的基本信息介绍
酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明胶)电泳分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶,最后用考马斯亮蓝将凝胶染色,再脱色,在蓝色背景下可出现白色条带,条带的强弱与MMP-2和M
关于明胶酶谱法的注意事项介绍
1、明胶酶谱法注意事项—制备聚丙烯酰胺凝胶时应注意排除气泡 。 2、明胶酶谱法注意事项—明胶酶谱的活性受钙离子,锌离子,和pH值等因素的影响,因此缓冲液配制应严格准确,尽量用超纯水,孵育温度也掌握好。 3、明胶酶谱法注意事项—用大梳子。 4、明胶酶谱法注意事项—孵育液的pH最好在7.5-7
关于明胶酶谱法的基本原理介绍
明胶酶谱法的复性原理:在电泳过程中,SDS与样品中的MMPs结合(当然是可逆性结合),破坏其氢键、疏水键而使MMPs不能发挥其分解明胶的作用,而只有当将胶置Triton中洗脱(最好是放在摇床上摇,30min/次,做2次或15min/次,4次。静置于Trition中是不妥的。)时,由于SDS被Tr
明胶酶谱分析法
实验概要本实验介绍了明胶酶谱分析法的基本原理及操作步骤。实验原理酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明胶)电泳分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶,最后用考马斯亮蓝将凝胶染色,再
酶法生产明胶的相关介绍
酶催化胶原降解制备明胶,与传统的碱法制备明胶的工艺相比,生产周期将会大大缩短,因此国外的明胶工作者一直重视对酶的研究。酶法制胶的研究从1962年开始,已经有50多年的历史,人们已经认识到了,经过酶对胶原降解能够制取明胶,但这样制取的明胶,其分子量分布偏宽,高分子量组份偏多,工艺上控制较难等。这些
YIJI基质金属蛋白酶(MMP)明胶酶谱法电泳分析试剂盒...
YIJI基质金属蛋白酶(MMP)明胶酶谱法电泳分析试剂盒使用说明主要用途YIJI基质金属蛋白酶(MMP)明胶酶谱法(gelatin-zymography)电泳分析试剂是一种旨在通过明胶聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,在分离、蛋白复性、底物水解、染色等一系列步骤下,观察并半定量深蓝色背景中的无色清晰的基质金
YIJI基质金属蛋白酶(MMP)明胶酶谱法电泳分析试剂盒
YIJI基质金属蛋白酶(MMP)明胶酶谱法电泳分析试剂盒产品说明书(中文版) 主要用途 YIJI基质金属蛋白酶(MMP)明胶酶谱法(gelatin-zymography)电泳分析试剂是一种旨在通过明胶聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,在分离、蛋白复性、底物水解、染色等一系列步骤下,观察并半定
什么是酶谱法
每一种酶都有自己的特征谱线值,利用酶的这一特性,可以对生物的各种酶进行检测。
酸法生产明胶的相关介绍
明胶的生产主要由三部工序组成从原料的收集、保存和经过各种方式的对原料皮、骨的预处理,是明胶技术发展的前工序部分,胶原的降解即明胶的提取是第二工序部分,也是影响产率的关键部分,明胶的过滤、蒸发、灭菌、烘干等构成了明胶技术的后工序部分。 明胶的酸法与碱法生产通常是指明胶的原料前工序与提胶过程中化学
碱法生产明胶的相关介绍
碱法制备明胶过程中,含胶原的原料首先经浸灰、水洗和除脂等方式进行预处理,原料预处理后脂肪的含量较低,主要成分是胶原蛋白,在石灰或氢氧化钠和一定温度条件下胶原蛋白逐步降解为分子量不均一的多肤混合物,多肤溶液经浓缩、除湿和干燥等一系列处理后得到固体粉末。就产品的收率、性质和纯度而言,碱法能够生产出高
超滤法(ultrafiltration)分离明胶蛋白水溶液
一、实验目的1.熟悉超滤的基本原理、板式超滤器的结构及基本流程2.了解超滤过程中的影响因素如温度、压力、流量及物料分子量等因素对超滤通量的影响3.了解超滤器污染的原因及其对策 二、实验原理 超滤的技术原理近似机械筛分。当溶液体系由水泵进入超滤器时,在超滤器内的膜表面发生分离,溶剂(水)和其他
ICP法有效测定明胶中的多种有害元素
药品中使用了工业明胶,从中国国内部分制药企业生产的药品中检测出了超过安全基准的铬。中国国家食品药品监督管理局公布的药品抽检结果中,15家药用胶囊企业、1家明胶生产企业铬超标。受此事件影响,4月19日,日本厚生劳动省要求日本国内的各制药企业进行自检及安全保证。另外,由于本次中国相关部门进行的抽检中,不
什么是酶谱?
中文名称酶谱英文名称zymogram定 义酶分离实验中区带电泳的记录。样品中各种酶按照所带电荷和分子大小被分离,这些酶的活性可以通过特殊的染色反应显示,可以从酶谱上区分酶的类型和相对量。细菌样品的酶谱可辅助细菌分类。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
营养明胶
成分 蛋白胨 5g 牛肉膏 3g 明胶 120g 蒸馏水 1000mL pH6.8~7.0 制法 加热溶解、校正至pH7.4~7.6,分装小管,121℃高压灭菌10min,取出后迅速冷却,使其凝固。复查最终pH应为6.8~7.0。 试验方法 用琼脂培养
人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)酶联免疫分析
人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆,尿液及相关液体样本中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(N
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的介绍
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)是lipocalin的一种,最初是在激活中性粒细胞中被发现的一种小分子量分泌性蛋白,现代研究表明,NGAL是诊断急性肾损伤的最有效生物学标志之一,也是早期糖尿病肾病的有效标志物之一。
什么是中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)是lipocalin的一种,最初是在激活中性粒细胞中被发现的一种小分子量分泌性蛋白,现代研究表明,NGAL是诊断急性肾损伤的最有效生物学标志之一,也是早期糖尿病肾病的有效标志物之一。
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的作用
1、急性肾脏病变的早期标志物 实验发现,在缺血肾脏发生的极早期(2h内)即可在血、尿中检测到NGAL明显上调,对缺血-再灌注模型小鼠注射重组NGAL,可减少氮质血症,减轻肾脏损伤。人体研究也发现心脏术后患者在急性肾脏病发生的2h内,血、尿NGAL显著升高,据此,研究者推测NGAL可作为心脏术后
极谱法及伏安法的介绍
防腐钢管内结疤缺点是存在于钢管内表面,雷同于黄豆粒大小的凹坑,结疤内大部分有呈灰褐色或灰黑色的异物。内结疤的影响因素有:除氧化物剂、喷吹工艺、芯棒光滑等因素。底下就随防腐钢管厂家小编来看一下怎么管制防腐钢管的内表面缺点: 1、除氧化物剂 氧化物要求在芯棒预穿时处于熔融形态。其力度等严