PC12细胞培养
PC12细胞是大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株,具神经内分泌细胞的一般特征,因其具可传代特点,广泛应用于神经生理和神经药理学研究。1. PC12细胞有两种:未分化型和分化型。其中未分化型的PC12细胞贴壁能力强,传代时需要胰酶消化,形状不规则。分化型PC12细胞传代时不需要胰酶,直接可以吹下来,形状规则。这两种细胞没有很大的区别,但我在实验中发现,未分化型的PC12细胞对药物的敏感性较之分化型的要差一些。2. 由于PC12细胞是一种肿瘤细胞,在传代次数较多后,它的形状和性状会发生改变。这些改变尤见于未分化型PC12细胞。主要是细胞形状变得更加不规则,对药物的敏感性愈加下降。因此,建议长期用PC12细胞作实验的战友最好严格控制细胞的传代次数。3.在复苏细胞时动作一定要迅速,放入温水中1~2min后要马上加入培养液中,培养12~24小时后更换一次培养液,这样不仅可以把DMSO吸掉,而且可以将死亡的细胞也吸掉。细胞一天一看即可,经常动会......阅读全文
PC12细胞培养
PC12细胞是大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株,具神经内分泌细胞的一般特征,因其具可传代特点,广泛应用于神经生理和神经药理学研究。1. PC12细胞有两种:未分化型和分化型。其中未分化型的PC12细胞贴壁能力强,传代时需要胰酶消化,形状不规则。分化型PC12细胞传代时不需要胰酶,直接可以吹下来,形状规
PC12细胞培养方法步骤
PC12细胞是大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株,具神经内分泌细胞的一般特征,因其具可传代特点,广泛应用于神经生理和神经药理学研究。1. PC12细胞有两种:未分化型和分化型。其中未分化型的PC12细胞贴壁能力强,传代时需要胰酶消化,形状不规则。分化型PC12细胞传代时不需要胰酶,直接可以吹下来,形
PC12细胞培养所用血清问题
问:我正准备购买上海细胞所的未分化的PC12细胞,需要灭活的马血清,可现在买血清很困难,好像是海关有封锁,代理商这么说的,我原定购买的Gibco的horse surum,现在无法买到了,好容易找到一个目前可以进血清的公司Hyclone,有一种Donor Equine serum是马血清吗?答:H
PC12-Cell-Culture-and-Fusion
Cell CultureMaterials1. Falcon Primaria culture dishes.2. Culture medium: DME (or F12K) with glutamine, supplemented with 7% heat-deactivated horse se
45Ca2+-uptake-study-in-PC12-cells
45Ca2+ uptake study in PC12 cells 1. Plate the cells on to the poly-D-Lysine-coated six well plates 2 days prior to study. 2. Rinse the cells with 1 m
五味子属植物或可治疗神经系统疾病
近日,中科院昆明植物研究所罗怀容和孙汉董研究组合作发现,五味子属三萜类化合物的神经药理活性,可促进脑源性神经营养因子的表达,为该化合物的生物活性研究提供了新思路。研究成果在线发表于《民族药理学》杂志。 五味子属植物除含有丰富的木脂素类化合物外,还含有结构多样的三萜类化合物,如尼哥纳乐酸等,
细胞培养实验——悬浮细胞培养
实验材料冻存 HeLa S3 细胞试剂、试剂盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶/EDTA仪器、耗材旋转瓶完全培养基-525 cm2 组织培养瓶C02 培养箱Sorvall H-6000A 转子100 ml 或 200 ml 通气旋转瓶和带滤膜的瓶盖实验步骤1. 将含有冻存 HeLa S3 细胞的安
细胞培养技术的细胞培养方式
高等生物是由多细胞构成的整体,在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内(in vivo)的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外(in vitro)培养进行观察和研究,则要方便得多。活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动,特别是高等动植物细胞要求的生存条件极其严格,稍有不
动物细胞培养——细胞培养介绍
实验方法原理目的细胞培养的评判性检查。应用检查常规维持的一致性;在复苏、传代、冻存前培养状况的评估;对新的或实验性情形反应的评估;确认明显的污染物。训练目标熟悉不同类型和不同密度的细胞培养的外观;数码或胶片相机的使用;灭菌物品和污染物间的区别,健康的和不健康的培养物间的区别;培养物生长阶段的评估。监
细胞培养实验——贴壁细胞培养
实验材料冻存细胞试剂、试剂盒70% 乙醇PBS胰酶/EDTA仪器、耗材25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒,打开安瓿,用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起始培养基的 25 cm
常用细胞凋亡检测方法(图)3
过氧化物酶标记测定法原理:脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端,与dATP形成异多聚体,并可与连接了报告酶(过氧化物酶或碱性磷酸酶)的抗地高辛抗体结合。在适合底物存在下,过氧化物酶可产生很强的颜色
细胞培养
细胞培养是一种常用的实验室技术,其中原核或真核细胞在受控条件下生长。大规模哺乳动物细胞培养被广泛用于生物技术中,特别是用于生产疫苗,蛋白质,酶,抗体和激素。细胞培养还用于许多研究**域,特别是在制药**域,其中将细胞用作研究许多疾病(例如癌症或心脏病)的模型。细胞用于靶标鉴定和验证,基于细胞的测定法
巨噬细胞培养常用细胞培养器皿介绍
常用细胞培养器皿有培养瓶、培养板、培养皿等。常准备量是使用量的三倍。器皿应选择透明度好,无毒,利于细胞粘附和生长的材料,常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。常用的器皿有下面几种。巨噬细胞1、液体储存瓶:用于储存各种配制好的培养液、血清等液体,常用规格有500ml、250ml、100ml等几
小鼠肝细胞培养实验——细胞培养技术
实验方法原理直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步,是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEMDMEM胰酶PBS仪器、耗材饭盒纱布小剪子小镊子大镊子大烧杯平皿研
细胞培养细胞培养的具体步骤
一、细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移入15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10ml DMEM培养基清洗,弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5
体外荧光法检测核内体早期动力学4
Top of pageProcedureOverviewSteps 1 - 8 Preparation of rat brain cytosolSteps 9 - 10 Culture of PC12 cellsSteps 11 - 30 Preparation of postnuclear sup
骨骼肌细胞培养和肌细胞培养
骨骼肌细胞培养 1.杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5厘米小块。 2.用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过,合成培养基加10%小牛血清培养,为促进分化可加1%的胎汁。 3.细胞接种量为2×106/皿,接种在胶原或明胶的底物上能促进细胞分化
猪甲状腺细胞培养实验_细胞培养技术
实验方法原理由于甲状腺富含纤维性组织,所以甲状腺的消化分离一般采用胶原酶与胰蛋白酶联合消化法,用单一的胰蛋白酶消化效果一般;促甲状腺激素(TSH)是培养甲状腺细胞必备的,它能够起到促进甲状腺细胞生长的作用。实验材料猪甲状腺试剂、试剂盒F-12培养基胎牛血清胰蛋白酶胶原酶Ⅳ牛 TSH仪器、耗材眼科剪滴
细胞培养细胞培养的一般过程
一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。二、取材在无菌
特殊细胞培养实验_球体细胞培养实验
实验方法原理大多数培养细胞都具有贴附在底物上生长成单层细胞的性质,如细胞长成片之后,让细胞片与底物脱离,更换到使细胞不易贴附的底物上继续生长时,则细胞片能卷聚成球体形,成为球体培养。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1. 琼脂铺底的培养瓶30 ml无菌培养瓶,每
大鼠肝星状细胞培养实验——细胞培养技术
大鼠肝星状细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料雄性 SD 大鼠试剂、试剂盒戊巴比妥钠小牛血清DMEM
肿瘤细胞培养
食管癌细胞株表达MMP-2:1.细胞种类:食管癌细胞株;2.培养的天数:2d;细胞倍增时间--24h左右;3.放大倍速:倒置荧光显微镜,100倍;4.培养基种类:1640+10%胎牛血清;5.细胞状态与特征简述:细胞贴壁生长;6.图片目的:鉴定食管癌细胞表达MMP-2,胞浆中绿色荧光为MMP-2,细
LSCM细胞培养
细胞培养上述生化介导的质粒转染方法是瞬时导入。这种方法使细胞能暂时但高水平表达目的蛋白。一般在转染后 1 ~ 4d 内可获得大量的表达蛋白。此外还有物理方法(电转方法和显微注射)和病毒介导的方法。当细胞用常规方法很难转染(如原代细胞),或转染试剂的毒性较大,这时可使用显微注射 (microinjec
细胞培养方法
一、准备工作 准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。 二、取材
细胞培养实验
实验方法原理 实验材料 冻存细胞试剂、试剂盒 70% 乙醇PBS胰酶/EDTA仪器、耗材 25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤 1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒,打开安瓿,用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起
细胞培养实验
贴壁细胞培养 悬浮细胞培养 实验方法原理 实验材料 冻存细胞
HUVEC细胞培养
1、实验室设计细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养工作包括:工作液配制、无菌操作(采样)、温育、无菌处理,细胞和用品贮存等。细胞培养室的设计实
细胞培养FAQ
1 冷冻管应如何解冻? 取出冷冻管后, 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻, 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化, 并注意水面不可超过冷冻管盖沿, 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时, 必须注意安全, 预防冷冻管之爆裂。2 细胞冷冻管解冻培养时, 是否应马上去除DMSO? 除少数特别
细胞培养实验
贴壁细胞培养 悬浮细胞培养 实验方法原理 实验材料 冻存细胞
细胞培养方法
一、准备工作 准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。 二、取