细胞培养大攻略

一、细胞培养基础和步骤细胞培养基大全细胞原代培养步骤细胞传代培养步骤二、细胞培养常见问答1、加到培养基中的血清 必须灭活吗?答:不是必须的,看做什么实验了。2、四季青胎牛血清灭活是56 ℃30分钟吗?答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子 。但是如果用于培养一些表面具有补体受体的细胞,如内皮细胞,血清是需要灭活,一般是56 ℃,30 min。3、我要做滋养细胞培养,胎牛血清要灭活吗?答:进口的一般都已灭活,国产的不一定,最好还是灭活一下再用较安全。4、我用病毒上清转染细胞,培养用的血清需要灭活吗?因为血清中可能有些补体和抗体 ,是不是会影响转染?我想未灭活的血清中含些抗体 补体可能会和病毒相结合,影响转染,正确吗?细胞是单核细胞白血病细胞,病毒是病毒包装细胞PT67 收集的病毒上清。为什么要用无血清培养基加病毒孵育几小时,目的是什么?答:血清一定要......阅读全文

细胞培养大攻略

一、细胞培养基础和步骤细胞培养基大全细胞原代培养步骤细胞传代培养步骤二、细胞培养常见问答1、加到培养基中的血清 必须灭活吗?答:不是必须的,看做什么实验了。2、四季青胎牛血清灭活是56 ℃30分钟吗?答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子 。但是如

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44、细胞冷冻管解冻培养时, 是否应马上去除DMSO? 除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外, 绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞), 在解冻之后, 应直接放入含有10-15 ml新鲜培养基之培养角瓶中, 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。 

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24、昆虫细胞培养的最适PH值和渗透压是多少?   生长培养基的PH值对细胞的增值和病毒或重组蛋白的生产均会产生影响。对于大部分鳞翅类昆虫细胞系,在PH值 6.0-6.4范围的大部分应用效果良好。培养鳞翅类昆虫细胞系时,培养基的最适渗透压是 345-380 mOsm/kg.。为保证可靠和持久的细胞培

细胞培养大攻略8

79、细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗? 不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH 8.0 , 温度 37℃其作用能力最强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前,一定

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26、PFHM-II 和HYBRIDOMA-SFM之间有什么差别? PFHM-II (Protein-free Hybridoma Medium)是不包含有蛋白质的单克隆抗体生产培养基。如果作为杂交瘤生产培养基使用,PFHM-II可能需要补充低水平的血清。HYBRIDOMA-SFM即是杂交瘤生产培养

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70、 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?血清中沉淀物的出现有许多种原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。 若欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清

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62、贮存在冰箱中的瓶口已开的培养基,在放置几天后颜色变紫? 这主要是由于在暴露到周围的CO2水平时,碳酸氢纳导致了pH值的上升。您可以在使用前松开瓶口,在CO2培养箱孵育培养基10-15分钟,来校正溶液的pH值(确定松开瓶口以保证气体交换)。 63、 细胞培养基偶然被冻,可否继续使用? 如果细胞培

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10、为什么培养基中可以省去加酚红?   酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不

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85、培养液出现沉淀,但pH值不变 可能原因 (1)洗涤剂清洗后残留有磷酸盐,将培养基成分沉淀下来。 (2)冰冻保存培养液。 建议解决方法 (1)用去离子水反复冲洗玻璃器皿,然后灭菌。 (2)将培养液加热到37℃,摇动使其溶解如沉淀仍然存在,丢弃培养液。 86、培养液出现沉淀, 同时pH 发生变化 

PCR技术大攻略

一、PCR技术及步骤聚合酶链式反应(PCR)PCR扩增产物的克隆上述两个实验包含基本原理、步骤、问题等。二、PCR常见问题汇总1. 没有得到扩增产物 (1)酶失活或在反应体系中未加入酶。Taq DNA聚合酶因保存或运输不当而失活,往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。 (2)模板含有杂质

细胞培养攻略:细节决定成败

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细胞培养攻略:细节决定成败

培养细胞就像养育BABY一样,要精心照料,用心呵护。-好每天都去看看它们,满足它们所需要的物质需求,防止出现培养箱缺水、二氧化碳不足、温度不够等各种小意外,还要注意很多小细节,以免开展重复的实验导致不必要的人力物力浪费。 那培养细胞都要注意哪些小细节呢?就让我们一起来看看吧! 1.细胞生长的营养来源

细胞培养生化分析仪选型攻略及福利

背景:在生物制药行业,细胞培养操作在确定整个生产过程中起着至关重要的作用。在过去几十年中,该行业在从补料分批培养中获得更高的产品效价方面取得了很大的进展。细胞生产的蛋白质类产品的产量都已达克级有的甚至可达10克级,比80年代中期提高了100多倍,用于治疗各种疾病的生物产品的种类也越来越多,这些成果的

人单核细胞白血病(THP1)细胞培养攻略

THP-1细胞系是1980年Tsuchiya等人建立的人单核细胞白血病细胞系。它来自一位急性单核细胞白血病患者的血液,有分化为多种巨噬细胞的能力,是各领域研究常用的细胞系之一。THP-1是人外周血的单核细胞系,最初来源于急性单核细胞性白血病患者。属于悬浮细胞,适合用于转染或感染实验。其表面抗原HLA

家庭生活五大攻略-轻松搞定垃圾分类

  垃圾是放错地方资源的理念,所有的垃圾只要合理的分类收集,分类处理,都将转化为资源。  对于家庭来说,合理的分类回收,不仅能减少垃圾排放,还能通过垃圾分类使之重新变成资源。今天就为大家介绍几个家庭垃圾分类的处理办法,让环保的可持续理念从家居生活的点滴开始。  攻略一:居室空间充足的

细胞攻略-|-PK15(猪肾细胞)细胞培养教程(尚恩生物)

▲细胞正常生长形态照片细胞名称:PK-15(猪肾细胞)细胞别称: PK(15); PK (15); PK 15; PK15; Porcine Kidney-15细胞货号: SNL-131生长特性: 贴壁培养条件: DMEM+10% FBS+1% P/S培养环境: 空气,95%;二氧化碳 (CO2),

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常见癌症体检攻略

很多癌症的可怕之处在于,一旦发现,就是中晚期。人们不禁要问,平时所进行的体检,难道不能发现?专家指出,常规体检很难早期发现癌症,专业的设备和医生,才能捕捉到早期癌变信号。虽然癌症被称为"绝症",但早期癌症的治愈率可以高达80%,而且病人所遭受的痛苦和治疗费用也会大大降低,因此早期发现才是癌症治

精液常规检查攻略

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SCI投稿全攻略

  SCI投稿过程总结、投稿状态解析、拒稿后处理对策及接受后期相关问答综合荟萃目录(重点是一、二、四、五、六):  (一)投稿前准备工作和需要注意的事项、投稿过程相关经验总结  (二)SCI期刊投稿各种状态详解及实例综合(学习各种投稿状态+投稿经历总结)  (三)问答综合篇(是否

金相显微镜选择攻略

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PCR引物设计全攻略

1. 引物最好在模板cDNA的保守区内设计。DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因,通过序列分析软件(比如DNAman)比对(Alignment),各基因相同的序列就是该基因的保守区。2. 引物长度一般在15~30碱基之间。引物长度(primer le

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白细胞分为颗粒和无颗粒两大类,无颗粒白细胞包括了单核细胞和淋巴细胞。颗粒白细胞其胞质内含有嗜色颗粒,也就是我们常说粒细胞,它可以分为三种,即中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。今天医学之声小编就和大家分享这个其中的嗜酸性粒细胞各种检验结果的临床意义。1、生理变化在劳动、寒冷、饥锇、精神刺激等情况

图说鲜肉IHC/ICC晋级攻略

西土有一名寺,昂迪·赛司腾姆寺,有大师。一日,来了一位东土小鲜肉。鲜肉问大师:“学业有惑,可解?”大师反问:“你术业可是生物?”鲜肉惊奇:“是,大师神奇,何以得知?”大师指鲜肉鞋履:“鞋上两块蓝斑,乃考马斯亮蓝,其渍尚新,你近来必在捣弄蛋白,对否?”鲜肉羞赧:“正是近日检测蛋白,跑胶无数,不慎滴上。

金相显微镜选择攻略

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Primer-3-在线引物设计攻略

开始之前:其实非常简单,不需要你下载任何软件,但是你得有一台电脑能上网。当然,最重要的是,你要很清楚用于做引物的模板序列,至于怎么找模板序列,不再本次讨论范围。另外,要先对PCR目的序列的长度有个大致估计,好了,马上开始吧:第一步:找到Primer3的站点。 你不用记住这个站点,但是要记住“Prim

正常大兔主动脉平滑肌细胞培养

实验材料:1. 正常大兔主动脉2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.23. 消化液:0.125%胰蛋白酶,0.1%胶原酶Ⅰ4. 细胞培养瓶(T25)5. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊6. 网筛(100目)7. 离心管(15m