细胞培养大攻略8

79、细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗? 不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH 8.0 , 温度 37℃其作用能力最强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶,以便于将含血清的培养基冲洗干净,这样就能大大提高消化液的消化能力。本中心通常使用的消化液浓度为: (1)0.05%胰蛋白酶+0.02% EDTA; (2)0.25%胰蛋白酶+0.03% EDTA;(3)0.25% 胰蛋白酶 溶液pH8.0-9.0;使用D-Hank液配制。 多数细胞传代消化可使用0.05%胰蛋白酶+0.02% EDTA这种消化液。80、培养基在使用过程中应注意的问题 (1)培养基在使用前需37℃预热或在室温平衡......阅读全文

细胞培养大攻略8

79、细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗? 不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH 8.0 , 温度 37℃其作用能力最强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前,一定

细胞培养大攻略

一、细胞培养基础和步骤细胞培养基大全细胞原代培养步骤细胞传代培养步骤二、细胞培养常见问答1、加到培养基中的血清 必须灭活吗?答:不是必须的,看做什么实验了。2、四季青胎牛血清灭活是56 ℃30分钟吗?答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子 。但是如

细胞培养大攻略4

10、为什么培养基中可以省去加酚红?   酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不

细胞培养大攻略7

62、贮存在冰箱中的瓶口已开的培养基,在放置几天后颜色变紫? 这主要是由于在暴露到周围的CO2水平时,碳酸氢纳导致了pH值的上升。您可以在使用前松开瓶口,在CO2培养箱孵育培养基10-15分钟,来校正溶液的pH值(确定松开瓶口以保证气体交换)。 63、 细胞培养基偶然被冻,可否继续使用? 如果细胞培

细胞培养大攻略9

85、培养液出现沉淀,但pH值不变 可能原因 (1)洗涤剂清洗后残留有磷酸盐,将培养基成分沉淀下来。 (2)冰冻保存培养液。 建议解决方法 (1)用去离子水反复冲洗玻璃器皿,然后灭菌。 (2)将培养液加热到37℃,摇动使其溶解如沉淀仍然存在,丢弃培养液。 86、培养液出现沉淀, 同时pH 发生变化 

细胞培养大攻略2

26、PFHM-II 和HYBRIDOMA-SFM之间有什么差别? PFHM-II (Protein-free Hybridoma Medium)是不包含有蛋白质的单克隆抗体生产培养基。如果作为杂交瘤生产培养基使用,PFHM-II可能需要补充低水平的血清。HYBRIDOMA-SFM即是杂交瘤生产培养

细胞培养大攻略5

24、昆虫细胞培养的最适PH值和渗透压是多少?   生长培养基的PH值对细胞的增值和病毒或重组蛋白的生产均会产生影响。对于大部分鳞翅类昆虫细胞系,在PH值 6.0-6.4范围的大部分应用效果良好。培养鳞翅类昆虫细胞系时,培养基的最适渗透压是 345-380 mOsm/kg.。为保证可靠和持久的细胞培

细胞培养大攻略3

70、 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?血清中沉淀物的出现有许多种原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。 若欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清

细胞培养大攻略6

44、细胞冷冻管解冻培养时, 是否应马上去除DMSO? 除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外, 绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞), 在解冻之后, 应直接放入含有10-15 ml新鲜培养基之培养角瓶中, 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。 

PCR技术大攻略

一、PCR技术及步骤聚合酶链式反应(PCR)PCR扩增产物的克隆上述两个实验包含基本原理、步骤、问题等。二、PCR常见问题汇总1. 没有得到扩增产物 (1)酶失活或在反应体系中未加入酶。Taq DNA聚合酶因保存或运输不当而失活,往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。 (2)模板含有杂质

细胞培养攻略:细节决定成败

培养细胞就像养育BABY一样,要精心照料,用心呵护。-好每天都去看看它们,满足它们所需要的物质需求,防止出现培养箱缺水、二氧化碳不足、温度不够等各种小意外,还要注意很多小细节,以免开展重复的实验导致不必要的人力物力浪费。 那培养细胞都要注意哪些小细节呢?就让我们一起来看看吧! 1.细胞生长的营养来源

细胞培养攻略:细节决定成败

  培养细胞就像养育BABY一样,要精心照料,用心呵护。最好每天都去看看它们,满足它们所需要的物质需求,防止出现培养箱缺水、二氧化碳不足、温度不够等各种小意外,还要注意很多小细节,以免开展重复的实验导致不必要的人力物力浪费。  那培养细胞都要注意哪些小细节呢?就让我们一起来看看吧!  1.细胞生长的

细胞培养生化分析仪选型攻略及福利

背景:在生物制药行业,细胞培养操作在确定整个生产过程中起着至关重要的作用。在过去几十年中,该行业在从补料分批培养中获得更高的产品效价方面取得了很大的进展。细胞生产的蛋白质类产品的产量都已达克级有的甚至可达10克级,比80年代中期提高了100多倍,用于治疗各种疾病的生物产品的种类也越来越多,这些成果的

人单核细胞白血病(THP1)细胞培养攻略

THP-1细胞系是1980年Tsuchiya等人建立的人单核细胞白血病细胞系。它来自一位急性单核细胞白血病患者的血液,有分化为多种巨噬细胞的能力,是各领域研究常用的细胞系之一。THP-1是人外周血的单核细胞系,最初来源于急性单核细胞性白血病患者。属于悬浮细胞,适合用于转染或感染实验。其表面抗原HLA

家庭生活五大攻略-轻松搞定垃圾分类

  垃圾是放错地方资源的理念,所有的垃圾只要合理的分类收集,分类处理,都将转化为资源。  对于家庭来说,合理的分类回收,不仅能减少垃圾排放,还能通过垃圾分类使之重新变成资源。今天就为大家介绍几个家庭垃圾分类的处理办法,让环保的可持续理念从家居生活的点滴开始。  攻略一:居室空间充足的

细胞攻略-|-PK15(猪肾细胞)细胞培养教程(尚恩生物)

▲细胞正常生长形态照片细胞名称:PK-15(猪肾细胞)细胞别称: PK(15); PK (15); PK 15; PK15; Porcine Kidney-15细胞货号: SNL-131生长特性: 贴壁培养条件: DMEM+10% FBS+1% P/S培养环境: 空气,95%;二氧化碳 (CO2),

8-年细胞培养大神的经验指南!

我养细胞有 8 年历史了,现在我的细胞已成为大家参观和崇拜、学习的对象。好的经验要分享,这就将我这几年来养细胞的经历和感想跟大家交流一下。启蒙老师的重要性一般进实验室都有师兄师姐带着做,他们就是你做细胞的启蒙老师。他们的操作手法、细节、理论讲解就成了你操作的准则,如营养液、细胞瓶的摆放位置;灭菌处理

企业“走出去”如何走得稳?专家列举7大攻略

  日前,全球化智库(CCG)发布《中国企业全球化报告》称,2016年中国企业对外直接投资达1830亿美元,位居全球第二大对外投资国。2017年随着国家对海外投资的国有企业审核进一步加强,民营企业的投资额将有望超过国企,成为“走出去”的主要力量。日前,政商学界人士在第四届中国企业全球化论坛上畅谈“走

3大主题会场-8位大咖说食品

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能力验证常见8大问题

能力验证是指利用实验室间比对来确定实验室检测/校准能力的活动。它是确保实验室维持较高的校准和检测水平而对其能力进行考核、监督和确认的一种验证活动。 参加能力验证计划,可以为实验室提供评价其出具数据可靠性和有效性的客观证据。 1 未按照作业指导书要求进行检测 能力验证计划的作业指导书是针对

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色谱柱维护保养8大知识(三)

色谱柱注意事项③ 一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。

色谱柱维护保养8大知识(七)

⑦ 保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。绝对禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。

色谱柱维护保养8大知识(八)

⑧ 色谱柱使用过程中,如果压力升高,一种可能是烧结滤片被堵塞,这时应更换滤片或将其取出进行清洗;另一种可能是大分子进入柱内,使柱头被污染;如果柱效降低或色谱峰变形,则可能柱头出现塌陷,死体积增大。在后两种情况发生时,小心拧开柱接头,用洁净小钢将柱头填料取出1~2mm高度(注意把被污染填料取净)再把柱

色谱柱维护保养8大知识(一)

色谱柱注意事项        色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。① 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因

色谱柱维护保养8大知识(二)

② 应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。

台式恒温摇床安装8大要点

台式恒温摇床安装8大要点1.仪器离墙离物必须保持约10CM的距离。2.仪器应放在坚硬牢固的平面上,并确保其水平状态。3.不要重力开启、闭合仪器箱门。4.切勿把恒温摇床放在炉子边上或阳光直射处。5. 碳硫分析仪连续制冷时须10天做一次加热驱潮处理。6.开启仪器箱门前应确认托盘已处于静止状态。7。仪器箱

色谱柱维护保养8大知识(六)

⑥ 经常用强溶剂冲洗色谱柱,清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50~75ml。下 面列举一些色谱柱的清洗溶剂及顺序,作为参考:硅胶柱以正已烷(或庚烷)、二氯甲烷和甲醇依次冲洗,然后再以相反顺

色谱柱维护保养8大知识(四)

④ 选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。

8大食品安全标准建立

  婴幼儿奶粉营养成分要求是什么?不同种类食品可以使用哪些食品添加剂?食品生产经营过程有哪些卫生要求?随着我国建立起食品安全标准体系,这些群众关心的问题,可以有据可查。  记者从国家卫生计生委昨日举办的食品安全宣传周活动上获悉,我国历时7年建立起现行的食品安全标准体系,完成了对5000项食品标准的清