科学家首次实现活细胞RNA标记与无背景成像
图为《自然—生物技术》11月期封面图片。它显示了利用荧光RNA可对单细胞中mRNA的翻译过程进行定量研究。癌细胞中mRNA水平与其编码蛋白质水平之间存在较低相关性,提示癌细胞的翻译调控显著失调,这为癌症的诊疗提供一种全新的思路。 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室的杨弋、朱麟勇等教授历经7年合作研究,在荧光RNA及活细胞RNA成像领域获突破性进展。他们原创的系列高性能荧光RNA,在国际上首次实现了不同种类RNA在动物细胞内的荧光标记与无背景成像。11月5日,该成果以封面论文形式发表于《自然—生物技术》。 荧光蛋白标记技术是蛋白质研究的巨大助力,其研究在2008年曾获得诺贝尔奖。类似的,RNA研究也迫切需要这样的颠覆性研究工具。但迄今为止,在自然界尚未发现天然存在的荧光RNA;而科学家们几经努力人工合成的少数几种荧光RNA又性能过低,难以实用。针对这一亟需解决的技术挑战,杨弋、朱麟勇等组成了化学生物学与合成生物学联合交叉......阅读全文
新型RNA标记技术颠覆以往干细胞研究
干细胞研究大多是在实验室的培养皿中开展的。然而,斯坦福大学的研究人员近日在《Cell Reports》上发表文章称,体内的干细胞和培养皿中的干细胞在基因表达谱上大相径庭。 研究人员认为,若人们对分离后的干细胞开展研究,并得出干细胞功能的结论,那么这些结论需要重新考虑,因为细胞在分离过程中发生了
Nanolive-3D-CX-巨噬细胞无标记实时3D成像助力免疫学研究
巨噬细胞几乎存在于所有组织中,属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。它们有助于健康机体的各种过程,如发育、伤口愈合、感染和组织内平衡。可以根据环境的变化迅速改变它们的表型。巨噬细胞以其作为抗菌吞噬细胞的经典功能而闻名,但也通过抗原的表达来支持免疫功能。它们的研究应用
酶标仪利用”无创”技术检测活细胞荧光蛋白
在过去的五年中,荧光蛋白在监测体内生物学研究中,起到越来越重要的作用。源于维多利亚多管发光水母中的绿色荧光蛋白(GFP)是zui早被我们应 用的荧光蛋白,但是随着时间的推移,现在我们可以使用的荧光蛋白种类也越加丰富,包括加强型的变异GFP蛋白、从其他种类水母中发现的荧光蛋白和珊瑚礁蛋 白。它们都可以
纳米片递送量子点技术用于活细胞标记微管骨架
量子点做为无机合成的纳米荧光探针,具有高荧光亮度和荧光稳定性,适合长时间观察和活体示踪。将量子点靶向递送入细胞浆,有助于细胞内蛋白瞬时相互作用研究,以及动态细胞学反应机制的长时程观察。目前量子点递送入细胞的方法主要分为两类:①协助递送策略:利用穿膜肽、多聚物载体、转染试剂等实现量子点的递送,但是需要
miRNA研究之RNA标记
RNA标记RNA标记是将标记物(如放射性同位素、荧光素或酶)共价地连接到RNA,通过检测标记物,进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛,在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求:1. 操作简单,灵敏度高2. 不影响碱基配对的特异性3. 不影响R
常用RNA标记方法介绍
RNA标记方法:按反应机制分如下四类:直接标记法,加尾标记法,基于逆转录反应的标记方法,基于RNA克隆扩增的标记方法。常用于RNA标记的方法按标记物性质分为:放射性同位素标记:32P、35S、3H非放射性标记:半抗原荧光素化学发光物质地高辛地高辛标记RNA常用的方法是将DIG与UTP共价结合形成DI
活细胞成像2012最新进展及产品
目前生物成像领域已经可以采用各种显微技术和共聚焦等技术了,这提高了图像的精确度,但是要观察到深层组织活动并不容易,因此在一些活体成像,组织深部观察等方面还需要更多的技术进步。2012年活体显微技术,荧光显微技术,以及活细胞成像方面都涌现出了不少重要的技术成果。 活体动物成像技术主
陈玲玲团队开发活细胞DNA成像新工具——CRISPRdelight
活细胞追踪DNA、RNA等核酸的空间分布和动态变化对于了解基因表达调控机制具有十分重要的意义。CRISPR-Cas系统是一种来源于细菌和古细菌体内的获得性免疫系统,由于其特异性靶向DNA/RNA的能力,已被广泛开发成多种细胞内DNA/RNA的遗传操作和检测标记的工具。 陈玲玲研究组前期构建了基
量子点活细胞成像应用的实验方案建议
量子点(Quantum dot, QD)是一种新型荧光纳米材料,又称半导体纳米晶,呈近似球形,三维尺寸在2-10nm,具有明显的量子效应,其物理、光学、电学特性优于传统有机荧光染料,是新一代荧光标记探针的优质选择。 Chan等将量子点与传统有机荧光染料进行了光学特性的比较,发现量子点的
如何使用高内涵进行长时间活细胞成像
活细胞成像技术是最近几年兴起的一项技术,能够在细胞接近生理的状态下观察细胞形态改变和蛋白的表达,该技术能够避免传统采用固定细胞或组织的研究方法中,固定细胞过程中造成的细胞形态的改变和结构改变,能够更加真实的反映出细胞的特性,因而广受推崇。MD ImageXpress Micor高内涵系统具有多种特性
活细胞成像系统在实际应用上有哪些功能?
活细胞成像系统是用于活细胞长时间、高清晰度、高灵敏度成像的设备。当用活细胞染料标记细胞内特定生物大分子,或者使用荧光蛋白标记体内特定蛋白时,使用该荧光染料或者荧光分子特定的激发光线激发,通过探测其特用的发射光线即可探测到该生物大分子。活细胞成像系统一方面控制细胞生存的外部环境,提供合适的温度、适度
活细胞实时动态成像仪-让科研更轻松
目前,大部分的细胞检测方法采用的仍然是传统的终点法——仅仅给出最终结果,而且往往需要标记细胞和破坏细胞。这种方法无法得到细胞在生长时的真正状态,也无法对细胞的生长过程做出动态的监测和分析。美国 Essen 公司开发了第二代长时间实时动态活细胞成像分析仪——IncuCyte ZOOM
活细胞实时动态成像仪-让科研更轻松
目前,大部分的细胞检测方法采用的仍然是传统的终点法——仅仅给出最终结果,而且往往需要标记细胞和破坏细胞。这种方法无法得到细胞在生长时的真正状态,也无法对细胞的生长过程做出动态的监测和分析。美国 Essen 公司开发了第二代长时间实时动态活细胞成像分析仪——IncuCyte ZOOM,用一种
新技术助力发现“垃圾”DNA的大作用
近日,上海市细胞代谢光遗传学技术前沿科学研究基地、华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室教授杨弋团队在RNA光遗传学控制技术研究中取得突破,相关研究已在《自然—生物技术》上以长篇论文形式在线发表。生物遗传中心法则是指遗传信息从DNA传递给RNA,再从RNA传递给蛋白质,即完成遗传信息转录和翻译的过
使用自动细胞成像系统进行细胞毒性评价和细胞活死测定
简介细胞活 / 死测定被广泛应用于各种研究领域,包括各种化合物的细胞毒性作用、实验处理或基因表达变化的研究。自动细胞成像和分析系统提供了一种评价细胞活性和细胞死亡的最佳方法。在本篇应用文献中,我们介绍了使用 ImageXpress®Pico 自动细胞成像系统以及 CellReporter
活体成像中荧光色素标记细胞的方法
实验概要本实验以研究干细胞活体移植后的存活率为例,简介了一两种内源性荧光色素标记的实验方法。实验原理活体光学成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物发光(bioluminescence)技术与荧光(fluorescence)技术。生物发光是用荧光素酶(Lucifer
活细胞成像是直接把培养的细胞放到工作站吗
一、活细胞成像系统原理目前主流的活细胞成像系统从原理上可以分为两大类:基于宽场反卷积技术基于共聚焦技术两种技术作为目前最流行的活细胞成像技术,均可以实现在维持细胞存活的情况下,快速获取单一焦平面的信号,在具体性能上则各有擅长。宽场反卷积技术对光线进行反卷积运算是光学成像领域的成熟技术,最早由美国国家
活细胞成像是直接把培养的细胞放到工作站吗
一、活细胞成像系统原理目前主流的活细胞成像系统从原理上可以分为两大类:基于宽场反卷积技术基于共聚焦技术两种技术作为目前最流行的活细胞成像技术,均可以实现在维持细胞存活的情况下,快速获取单一焦平面的信号,在具体性能上则各有擅长。宽场反卷积技术对光线进行反卷积运算是光学成像领域的成熟技术,最早由美国国家
酶标仪利用”无创”技术检测活细胞荧光蛋白(一)
简介在过去的五年中,荧光蛋白在监测体内生物学研究中,起到越来越重要的作用。源于维多利亚多管发光水母中的绿色荧光蛋白(GFP)是最早被我们应用的荧光蛋白,但是随着时间的推移,现在我们可以使用的荧光蛋白种类也越加丰富,包括加强型的变异GFP蛋白、从其他种类水母中发现的荧光蛋白和珊瑚礁蛋白。它们都可以在众
酶标仪利用”无创”技术检测活细胞荧光蛋白(二)
下一步就是要结合信号/背景优化结果确定最佳激发和发射波长。因为初步检测结果的斯托克顿位移偏小(22nm),显然是要通过降低激发波长和增大发射波长来扩大两者之间的差异,其次还需要找到合适的发射光阻隔滤片优化最佳灵敏度。最终,我们使用5 5 0nm的激发波长来激发, 同时使用570nm的发射光阻
酶标仪利用”无创”技术检测活细胞荧光蛋白(三)
在本次实验中,ZsGreen和DsRed细胞系在底读模式都有着相似的检测限,而且两者都比AcGFP细胞系的检测下限低3到4倍。本次实验一共重复了三次,但是DsRed实验结果并不是每次都能表现的足够好。在一次实验中,它的检测下限近似于AcGFP,但是在另一次实验中,它的检测下限又会很高。我们将这些区别
中科院团队开发无标记质谱筛选,赋能新酶活定向进化
近日,中国科学院深圳先进技术研究院司同课题组联合中国医学科学院杨兆勇课题组,在国际学术期刊 Chemical Science 在线发表了题为:Directed evolution of a cyclodipeptide synthase with new activities via label-f
Nature子刊:金纳米粒子活细胞成像新技术
来自中科院上海应用物理研究所物理生物学研究室,加州大学圣地亚哥分校的研究人员发表了题为“Real-time visualization of clustering and intracellular transport of gold nanoparticles by correlative i
RNA-放射性标记
实验材料 [α32P]UTP 或 CTP(800Ci ml 10mCi ml) UTP 或 CTP T4 多核苷酸激酶 (γ32P)ATP
RNA-放射性标记
实验材料 [α32P]UTP 或 CTP(800Ci ml10mCi ml) UTP 或 CTP T4 多核苷酸激酶(γ32P)ATP 牛小肠磷酸酶T4RNA 连接酶 [32P]pCpATP2Oumol L 无 tRNA 酶的牛血清白蛋白试剂、试剂盒 10XT4 多核苷酸激酶缓冲液 DEPC 处理的
实时无标记细胞分析技术(RTCA)常见问题解析
技术原理篇Q: 什么事实时无标记细胞功能分析技术?A: 艾森实时无标记细胞功能分析技术(RTCA)整合了微电子技术、细胞生物学和分子生物学。技术的核心是微电子生物感应芯片,这些芯片整合在细胞培养板的孔中,使得细胞功能分析仪无需任何标记就可以实时检测活细胞的活性。实时无标记细胞功能分析仪可以简单、可靠
成像光谱仪的发展背景简介
简介 成像光谱就是在特定光谱域以高 光谱分辨率同时获得连续的地物光谱图像,这使得遥感应用可以在光谱维上进行空间展开,定量分析地球表层 生物物理化学过程与参数。 发展背景 70年代末80年代初,在研究归纳各种 地物光谱特征的基础上,形成这样一个概念:如果能实现连续的窄波段成像,那么就有可能实
新型高分辨成像技术可观察活细胞中酶和细胞传导活性
分析测试百科网讯 一种新型的荧光生物传感器可以观察到在活细胞中高度特异性位置发生的酶和细胞信号传导活性。 这些活动的发生通常在100纳米大小,观察它们目前是困难或不可能的。例如,可见光的衍射极限会阻止光学显微镜在小于200至250nm的位置捕获动态事件。 超分辨率技术如SOFI(stocha
活体成像中荧光色素标记细胞的方法举例
活体光学成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物发光(bioluminescence)技术与荧光(fluorescence)技术。生物发光是用荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或DNA,今天,生物发光标记物可以标记到任何一种基因上,使对基因功能的全面细致研
活体成像中荧光色素标记细胞的方法举例
活体成像中荧光色素标记细胞的方法举例 活体光学成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物发光(bioluminescence)技术与荧光(fluorescence)技术。生物发光是用荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或DNA,今天,生物发光标记物可以标记到任何