基础培养基的制备
培养基是根据微生物 生长繁殖时对营养物质的需要而配制的营养制品,含有营养物质及适宜的酸碱度,经灭菌后使用。 常用的培养基按用途分为:基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基及厌氧培养基。按物理性状分为固体、半固体和液体三种。 实验目的: 了解常用的液体、固体、半固体培养基的成分、制备方法和用途。 实验材料: 牛肉、蛋白胨、氯化钠、琼脂 、0.1mol/lNaOH溶液、酚红指示剂、蒸馏水等。 实验方法: 一、肉汤培养基 1、 将鲜牛肉除去筋膜和脂肪,切成小块后用绞肉机绞碎,以每500g碎牛肉加1000ml蒸馏水的比例混合后,置4℃冰箱过夜。 2、 次日取出浸泡物倒入容器内煮沸半小时,使肉渣凝固,也可煮沸一小时不经冰箱过夜。 3、 用纱布和脱脂棉过滤,除去肉渣,即成肉浸汁。加入1%蛋白胨及0.5%氯化钠,加热溶解并用蒸馏水补足蒸发失去的水分。 4、 待冷至50℃左右时,调该溶液的pH至7.4~7......阅读全文
siRNA制备方法
体外制备1.化学合成许多国外公司都可以根据用户要求提供高质量的化学合成siRNA。主要的缺点包括价格高,定制周期长,特别是有特殊需求的。由于价格比其他方法高,为一个基因合成3―4对siRNAs 的成本就更高了,比较常见的做法是用其他方法筛选出最有效的序列再进行化学合成。最适用于:已经找到最有效的si
土壤样品制备
一、样品制备 (一)场地和器具 1、制样场地 (1)风干室 应设置专用土壤风干室,配备风干架;风干室应通风良好,整洁,无易挥发性化学物质,避免阳光直射土壤样品, 注意防酸或碱等污染,可在窗户加设防尘网。每层样品风干盘上方空间应不少于 30cm,风干盘之间间隔应不少于 10cm。风干室应配
桥粒的制备
实验材料 牛口鼻部或舌头试剂、试剂盒 柠檬酸缓冲液仪器、耗材 匀浆器实验步骤 1. 在当地屠宰场获取新鲜的牛口鼻部或舌头,立刻埋于碎冰中。对于口鼻部:用剃刀刮掉口鼻部最外面的一层(角质层的角膜),收集下面的一层(棘层)。对于舌头:从结缔组织的上面分解出表皮。2. 用剪刀将解剖来的表皮剪成 0.5 c
NADH制备方法
NADH制备方法主要包括提取法、发酵法、强化法、生物合成法和有机物合成法 。
质粒的制备
质粒的制备可以用于(1)携带外源基因进入细菌中扩增或表达的主要载体,它在基因操作中具有重要作用;(2)质粒的分离与提取是最常用、最基本的实验技术。实验方法原理在pH 12.0 ~ 12.6碱性环境中,细菌的线性大分子量染色体DNA变性分开,而共价闭环的质粒DNA虽然变性但仍处于拓扑缠绕状态。将pH调
溶菌酶的制备
溶菌酶是采用 生物工程技术进行克隆、提取而制取,它是一种天然酶,安全绿色的添加剂,无抗药性。 该酶广泛存在于人体多种组织中,鸟类和家禽的蛋清、哺乳动物的泪、 唾液、血浆、尿、乳汁等体液以及微生物中也含此酶,其中以蛋清含量最为丰富。从鸡蛋清中提取分离的溶菌酶是由18种129个 氨基酸残基构成的单
制备苯乙醛
香料?您知道苯乙醛与香料是有密切关系的吗?苯乙醛CAS号为122-78-1,它的主要作用就是用来做花香型香精的调合香料。当然,于我公司产品中是用于科研的。制备苯乙醛:可有多种制法,比如说:苯乙酸催化还原、β-苯乙醇催化氧化以及采用苯乙烯、环氧苯乙烷、桂酸及其酯类为原料的方法都能制得2-苯基乙醛。工业
TEM样品制备
由于透射电子显微镜收集透射过样品的电子束的信息,因而样品必须要足够薄,使电子束透过。 试样分类:复型样品,超显微颗粒样品,材料薄膜样品等。 制样设备:真空镀膜仪,超声清洗仪,切片机,磨片机,电解双喷仪,离子薄化仪,超薄切片机等。
细菌中制备基因组DNA实验——小量制备
真核生物的一切有核细胞(包括培养细胞)都能用来制备基因组 DNA。真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内,因此,制备DNA的原则是既要将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离,又要保持DNA分子的完整。实验方法原理提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液
SDS碱裂解法制备质粒DNA——中量制备
实验方法原理用碱和 SDS 处理可以从中度规模(20~50 ml)的细菌培养物中分离质粒 DNA,所获得的 DNA 产物可用于电泳分析或限制性内切核酸酶消化,经柱层析进一步纯化之后,还可用于转染哺乳动物细胞。试剂、试剂盒碱裂解液抗生素乙酵酚氯仿STETE仪器、耗材LB、YT 或 Terrific 培
SDS碱裂解法制备质粒DNA——小量制备
用碱和 SDS 处理可以从细菌培养物中分离质粒 DNA,所获得的质粒则可以用电泳或限制性核酸内切酶消化的方法鉴定;经聚乙二醇处理进一步纯化后,其可以用做 DNA 测序反应的模板。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理用碱和 SDS 处理可以从小量 ( 1~2 ml)细菌培养物中
如何用制备色谱柱制备低含量的杂质?
制备色谱柱为Zorbax SB-C18 9.4*250mm及gilson馏分收集器,色谱仪为Agilent 1100或LC-6A。想用其制备面积归一化法含量为0.05%左右的杂质,初步提纯后用高分辨的LC-MS进行定性分析。如何设定色谱条件,如流量,进样量,样品的浓度,切割点的设置,是否要浓缩,
SDS碱裂解法制备质粒DNA——大量制备
实验方法原理用碱和 SDS 处理可以从大规模(500 ml)的细菌培养物中分离质粒 DNA,所获得的质粒则可通过柱层析或 CsCl-溴化乙锭梯度离心进一步纯化。试剂、试剂盒碱裂解液抗生素乙酵酚氯仿STETE仪器、耗材LB、YT 或 Terrific 培养液实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液(1) 碱
质粒DNA的小量制备实验——煮沸小量制备法
实验方法原理当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状,离心时可沉淀下来。推荐采用本方案从1-24个菌落培养液中制备少量的质粒DNA,尽管该方案十分快捷,但制备的DNA的
惟一氮源试验的检查过程及相关疾病
检查过程 实验方法 (1)培养基组合:将需要测定的铵态氨(硫酸铵)或硝态氮(硝酸钾)加入到基础培养基中,浓度为0.05%-0.1%。如测定菌不能以葡萄糖为碳源,可用其他适合的碳源代替,如柠檬酸盐、乙酸盐或甘露醇等,浓度为0.2%-0.5%。另做一份不加氮源的空白对照(以等体积的无菌水代替)。
培养基
培养基是由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品。适宜的培养基不仅可用于细菌的分离纯化培养、传代、菌种保存,还可用于研究细菌的生理、生化特性,是病原菌分离鉴定的重要环节和必不可少的手段。 一、培养基的组成成分 (一)营养物质 细菌需要的基础营养物质应含有氮源、碳源、无机
四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)
基础培养基 多胨或脙胨 5g 胆盐 1g 碳酸钙 10g 硫代硫酸钠 30g 蒸馏水 1000mL碘溶液 碘 6g 碘化钾 5g 蒸馏水 20mL 制法 将基础培养基的各成分加入蒸馏水中,加热溶解,分装每瓶100mL。分
微生物培养基的原理、制作和现象:四硫磺酸钠煌绿增...
四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)基础培养基 多胨或脙胨 5g 胆盐 1g 碳酸钙 10g 硫代硫酸钠 30g 蒸馏水 1000mL碘溶液 碘 6g 碘化钾 5g 蒸馏水 20mL 制法 将基础培养基的各成分加入蒸馏水中,加
惟一氮源试验的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群: 没有 检查前禁忌:注意正常的生活饮食习惯,注意个人卫生。 检查时要求:积极配合医生 检查过程 实验方法 (1)培养基组合:将需要测定的铵态氨(硫酸铵)或硝态氮(硝酸钾)加入到基础培养基中,浓度为0.05%-0.1%。如测定菌不能以葡萄糖为碳源,可用其他适合的碳
收到细胞应该如何处理呢
细胞活化︰ 1.收到细胞株包裹时,请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形,若有请立即通知。细胞株请尽速开始培养,或立即冷冻保存(置于–70 °C,隔夜后,移到liq N2)。 2.冷冻细胞解冻程序: 2.1.依据细胞株数据单zhi定之基础培养基种类、血清种类和其它zhi定之成份和比例,制备培养基。绝大多数
收到细胞的处理方式
细胞活化︰ 1. 收到细胞株包裹时,请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形,若有请立即通知。细胞株请尽速开始培养, 或立即冷冻保存(置于–70 °C,隔夜后,移到liq N2)。 2. 冷冻细胞解冻程序: 2.1. 依据细胞株数据单之基础培养基种类、血清种类和其它之成份和比例,制备培养基。
免疫胶体金技术的颗粒制备及蛋白制备
颗粒制备 根据不同的还原剂可以制备大小不同的胶体金颗粒。常用来制备胶体金颗粒的方法如下。 1.枸橼酸三钠还原法 (1)10nm胶体金粒的制备:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸橼酸三钠水溶液3ml,加热煮沸30min,冷却至4℃,溶液呈红色。 (2)15nm胶体金颗粒的
SDS碱裂解法制备质粒DNA:大量制备实验
用碱和SDS处理可以从大规模(500ml)的细菌培养物中分离质粒DNA,所获得的质粒则可通过柱层析或CsCl-溴化乙锭梯度离心进一步纯化实验方法原理用碱和SDS处理可以从大规模(500ml)的细菌培养物中分离质粒DNA,所获得的质粒则可通过柱层析或CsCl-溴化乙锭梯度离心进一步纯化实验步骤材料:缓
SDS碱裂解法制备质粒DNA:大量制备实验
实验方法原理 用碱和SDS处理可以从大规模(500ml)的细菌培养物中分离质粒DNA,所获得的质粒则可通过柱层析或CsCl-溴化乙锭梯度离心进一步纯化实验步骤 材料:缓冲液和溶液:碱裂解液 I:50 mmol/L 葡萄糖25 mmol/L Tris-HCl(pH8.0)10 mmol/L EDTA(
质粒DNA的小量制备实验——碱裂解小量制备法
实验采用国产的质粒小量抽提试剂盒。它是一种新型的离子交换柱,在特定的条件下,使质粒能在离心过柱的瞬间,结合到质粒纯化柱上,在一定条件下又能将质粒充分洗脱,从而实现质粒的快速纯化。实验材料DNA试剂、试剂盒葡萄糖TrisEDTATENaOHSDS乙酸甲乙醇仪器、耗材离心机漩涡混合器分光光度计实验步骤1
SDS碱裂解法制备质粒DNA:大量制备实验
实验方法原理 用碱和SDS处理可以从大规模(500ml)的细菌培养物中分离质粒DNA,所获得的质粒则可通过柱层析或CsCl-溴化乙锭梯度离心进一步纯化 实验步骤
转运反应成分的制备实验——胞质液的制备
实验材料血试剂、试剂盒酸-柠檬酸盐-葡萄糖溶液裂解缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、网状细胞和红细胞胞质液的制备1. 自动物身上采血,每 7 ml 血加 1 ml 酸-柠檬酸盐-葡萄糖溶液(ACD;75 mmol/L 柠檬酸三钠,38 mmol/L 柠檬酸,136 mmol/L 葡萄糖,pH 5.0
培养基的用途分类
现如今培养基种类繁多,它可以按成分、物理状态、用途等方面来区分,按照用途可以分为基础培养基、鉴别培养基、营养培养基、选择培养基四大类一、基础培养基含有一般细菌生长繁殖需要的基本的营养物质。*常用的基础培养基是上面提及的天然培养基中的牛肉膏蛋白胨培养基。这种培养基可作为一些特殊培养基的基础成分。二、鉴
微生物培养基的原理、制作和现象:SS琼脂
基础培养基 牛肉膏 5g 脙胨 5g 三号胆盐 3.5g 琼脂 17g 蒸馏水 1000mL 再将两液混合,121℃高压灭菌15min,保存备用。完全培养基 基础培养基
SS琼脂
基础培养基 牛肉膏 5g 脙胨 5g 三号胆盐 3.5g 琼脂 17g 蒸馏水 1000mL 再将两液混合,121℃高压灭菌15min,保存备用。完全培养基 基础培养基