转运反应成分的制备实验——胞质液的制备
实验材料血试剂、试剂盒酸-柠檬酸盐-葡萄糖溶液裂解缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、网状细胞和红细胞胞质液的制备1. 自动物身上采血，每 7 ml 血加 1 ml 酸-柠檬酸盐-葡萄糖溶液（ACD；75 mmol/L 柠檬酸三钠，38 mmol/L 柠檬酸，136 mmol/L 葡萄糖，pH 5.0)。2. 室温 500 g 离心 10 分钟收集网状细胞和红细胞。吸出血浆和白细胞层。3. 用 1~2 倍体积的 2% 明胶（Sigma) /PBS溶液（预热至 37℃）悬浮细胞，37℃ 水浴静置至少 30 分钟。4. 吸出上层含血小板和白细胞部分，用 PBS 在 1600 g 离心清洗细胞，尽可能多的吸出上清。5. 加入 2 倍体积的裂解缓冲液裂解细胞，冰浴 20 分钟。裂解缓冲液：0.75 mmol/L 乙酸镁0.15 mmol/L EGTA3 mmol/L DTT蛋白酶抑制剂6. 裂解液用超速离心机，4℃，100000 g 离心......阅读全文
转运反应成分的制备实验——胞质液的制备
实验材料血试剂、试剂盒酸-柠檬酸盐-葡萄糖溶液裂解缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、网状细胞和红细胞胞质液的制备1. 自动物身上采血，每 7 ml 血加 1 ml 酸-柠檬酸盐-葡萄糖溶液（ACD；75 mmol/L 柠檬酸三钠，38 mmol/L 柠檬酸，136 mmol/L 葡萄糖，pH 5.0
转运反应成分的制备实验——转运反应
试剂、试剂盒磷酸肌酸肌酸磷酸激酶ATPGTP仪器、耗材微量离心管实验步骤1. 将反应混合物加入一在冰上放置的微量离心管中。能量重建系统成分如下：5 mmol/L 磷酸肌酸20 单位/ml 肌酸磷酸激酶0.5 mmol/L ATP0.5 mmol/L GTP2. 滴一滴孵育混合物到一片位于带盖子的湿盒
转运反应成分的制备实验
试剂、试剂盒 APC 悬浮液HEPESNaClSMCC仪器、耗材 微量离心管Sephadex G50 脱盐柱实验步骤 1. 在一微量离心管中，4℃，10000 g 离心 APC 悬浮液 5~10 分钟，吸走上清。2. 用 0.1 mol/L HEPES（pH 7.4），0.1 mol/L NaCl
转运反应成分的制备实验
制备藻胆色素蛋白标志物胞质液的制备细胞通透化转运反应试剂、试剂盒APC 悬浮液 HEPES
转运反应成分的制备实验
制备藻胆色素蛋白标志物 胞质液的制备 细胞通透化 转运反应 试剂、试剂盒 APC 悬浮液
转运反应成分的制备实验——细胞通透化
实验材料细胞试剂、试剂盒毛地黄皂苷转运缓冲液实验步骤1. 制备用于同透化的细胞(1) 对于在盖玻片上生长的细胞① 将在标准条件下培养的细胞或从组织采集的原代细胞铺在置于 6 孔培养板中的 18x18 mmol/L 的盖玻片上，生长过夜。② 实验前 2~4 小时，换新培养液，重新放回培养箱中。③ 吸出
转运反应成分的制备实验——制备藻胆色素蛋白标志物
试剂、试剂盒APC 悬浮液HEPESNaClSMCC仪器、耗材微量离心管Sephadex G50 脱盐柱实验步骤1. 在一微量离心管中，4℃，10000 g 离心 APC 悬浮液 5~10 分钟，吸走上清。2. 用 0.1 mol/L HEPES（pH 7.4），0.1 mol/L NaCl 重悬浮
制备体外剪接反应用HeLa细胞核和胞质S100提取物实验
胞核提取物可以用于前体 mRNA 的剪接，S100 提取物中虽然包括许多剪接因子，但它不具有剪接活性，因为它只含有剪接所必需的部分 SR 蛋白，不过该提取物中补充一种或多种 SR 蛋白后就可以进行有效的剪接。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验方法原理胞核提取物可以用于前体 mRNA
制备体外剪接反应用HeLa细胞核和胞质S100提取物实验
实验方法原理 胞核提取物可以用于前体 mRNA 的剪接，S100 提取物中虽然包括许多剪接因子，但它不具有剪接活性，因为它只含有剪接所必需的部分 SR 蛋白，不过该提取物中补充一种或多种 SR 蛋白后就可以进行有效的剪接。实验材料 HeLa 细胞试剂、试剂盒 DTT苯甲基磺酰氟PBS缓冲液仪器、耗材
制备体外剪接反应用HeLa细胞核和胞质S100提取物实验
实验方法原理 胞核提取物可以用于前体 mRNA 的剪接，S100 提取物中虽然包括许多剪接因子，但它不具有剪接活性，因为它只含有剪接所必需的部分 SR 蛋白，不过该提取物中补充一种或多种 SR 蛋白后就可以进行有效的剪接。
MVA－病毒储液制备实验
基本方案 免疫染色法滴度测定 实验方法原理 实验材料 成片 CEF 或 BHK-
MVA－病毒储液制备实验
实验材料成片 CEF 或 BHK-21 细胞改造的痘苗病毒试剂、试剂盒MEM-10 和 MEM-2.5 完全培养基仪器、耗材150 cm2 组织培养瓶CO2培养箱Sorvall 离心机250 ml 无菌离心瓶实验步骤1. 用 1.5 ml 胰酶/EDTA 加 8.5 ml 的维持培养基消化 7 瓶
MVA－病毒储液制备实验
实验方法原理 实验材料 成片 CEF 或 BHK-21 细胞改造的痘苗病毒试剂、试剂盒 MEM-10 和 MEM-2.5 完全培养基仪器、耗材 150 cm2 组织培养瓶CO2培养箱Sorvall 离心机250 ml 无菌离心瓶实验步骤 1. 用 1.5 ml 胰酶/EDTA 加 8.5 ml
杆状病毒储液制备实验——从单层培养中制备
实验材料单层培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒（野生型的或重组）试剂、试剂盒含10％胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1
杆状病毒储液制备实验——从悬浮培养中制备
实验材料悬浮培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒（野生型的或重组）试剂、试剂盒含10％胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1
杆状病毒储液制备实验
实验方法原理 实验材料 悬浮培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒（野生型的或重组）试剂、试剂盒 含10％胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材 150 mm 培养瓶 27℃ 培养箱 倒置显微镜 带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机 带螺口盖的冻存管 液氮罐 500 ml 旋转细
杆状病毒储液制备实验
基本方案 从悬浮培养中制备 基本方案 从单层培养中制备 噬斑试验测定滴度 实验方法原理 实验材料
桥粒的制备实验
从牛舌或牛口鼻部分离桥粒分级分离桥粒实验材料牛口鼻部或舌头 试剂、试剂盒柠檬酸缓冲液
散剂的制备实验
示例法 实验材料 碳酸氢钠 氧化镁 试剂、试剂盒
桥粒的制备实验
从牛舌或牛口鼻部分离桥粒 分级分离桥粒 实验材料 牛口鼻部或舌头
细胞裂解液的制备
一、试剂准备1、新鲜配制冷的 RIPA 裂解缓冲液: 150 mM NaCL 1% NP-40 (去垢剂) 0.1% SDS (去垢剂) 2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入) 2ug/ml Leupeptin (
细菌细胞的制备实验实验——细胞抽提物的制备
实验材料细胞试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材弗氏破碎器实验步骤1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为 2 μ
什么是制备与半制备液相
制备与半制备主要是指待制备样品的量来区别，1克以上是制备级别，100毫克到1克之间是半制备级别
盐的制备反应举例
盐可以通过化学反应而制备，包括有：盐基与酸，例如NH3+HCl→NH4Cl金属与酸，例如Mg+H2SO4→MgSO4+H2金属与非金属，例如Ca+Cl2→CaCl2碱与酸性氧化物，例如2NaOH+Cl2O→ 2NaClO+H2O酸与碱性氧化物，例如2HNO3+Na2O→ 2NaNO3+H2O盐也可以
杆状病毒毒种贮液的制备实验
杆状病毒是一类具有囊膜包裹的双链环状DNA病毒，其基因组大小为80~180 kb，在自然界中以节肢动物作为专一性宿主进行感染和传播。实验材料杆状病毒试剂、试剂盒胎牛血清重组病毒仪器、耗材培养箱培养瓶转子实验步骤从单层培养中制备： 1a. 以毎瓶1.8×107 Sf9细胞的密度，将细胞接种于两个15
汤剂、中药合剂及口服液的制备实验
煎煮法 实验材料 桂枝 杏仁 甘草 试
细菌细胞的制备实验实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材 弗氏破碎器实验步骤 1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为
细菌细胞的制备实验实验
细胞抽提物的制备 核糖体及多核糖体的分离 70S核糖体的纯化 多核糖体的纯化 将核糖体解离为大亚基和小亚基 实验材料
细菌细胞的制备实验实验
细胞抽提物的制备核糖体及多核糖体的分离70S核糖体的纯化多核糖体的纯化将核糖体解离为大亚基和小亚基实验材料细胞 试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液
质粒DNA的小量制备实验——煮沸小量制备法
实验方法原理当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时，蛋白质与DNA发生变性，当加入中和液后，质粒DNA分子能够迅速复性，呈溶解状态，离心时留在上清中；蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状，离心时可沉淀下来。推荐采用本方案从1-24个菌落培养液中制备少量的质粒DNA，尽管该方案十分快捷，但制备的DNA的