氯霉素乙酰基转移酶(CAT)测定实验

实验方法原理 氯霉素乙酰转移酶报告基因(chloramphenicol acetyltransferase, CAT)能将乙酰基从乙酰辅酶A转移到氯霉素上。本试剂盒采用荧光测定的方法,检测CAT活性,它的灵敏度接近同位素测定方法,而操作极为简便、快捷,成本也大为降低。使用通用裂解缓冲液,能与其他类型的报告基因检测和蛋白含量检测兼容。 实验材料 细胞样本 试剂、试剂盒 Tris-缓冲液 Tris 三硝基甲苯(Triton) CAT 稀释缓冲液 CAT 酶标准物 ......阅读全文

氯霉素乙酰基转移酶(CAT)测定

试剂、试剂盒 Tris-缓冲液 Tris 三硝基甲苯(Triton) CAT 稀释缓冲液CAT 酶标准物闪烁液 聚丙烯闪烁杯仪器、耗材 微量离心管微量离心机实验步骤 一、材料灭菌物品1. D-PBSA2. 多孔培养板:6 孔,35 mm非消毒物品1. Tris-缓冲液:Tris-HCl,0.1mol

氯霉素乙酰基转移酶(CAT)测定实验

            实验方法原理 氯霉素乙酰转移酶报告基因(chloramphenicol acetyltransferase, CAT)能将乙酰基从乙酰辅酶A转移到氯霉素上。本试剂盒采用荧光测定的方法,检测CAT活性,它的灵敏度接近同位素测定方法,而操作极

氯霉素乙酰基转移酶(CAT)测定实验

通过测定转染细胞的报告基因表达,如β-gal或CAT,可以确定导人的DNA是否已被整合到宿主细胞主要用于(1)测定基因表达(2)基因整合评价(3)细胞的调控。来源于《动物细胞培养:基础技术指南(第五版)》实验方法原理氯霉素乙酰转移酶报告基因(chloramphenicol acetyltransfe

氯霉素乙酰基转移酶(CAT)测定实验

            实验方法原理 氯霉素乙酰转移酶报告基因(chloramphenicol acetyltransferase, CAT)能将乙酰基从乙酰辅酶A转移到氯霉素上。本试剂盒采用荧光测定的方法,检测CAT活性,它的灵敏度接近同位素测定方法,而操作极

红细胞内CAT的作用

  红细胞内CAT是溶解状态,具有重要的生理功能。红细胞内的CAT和谷胱甘肽过氧化物酶具有共同保护血红蛋白和其它巯基酶、膜蛋白和解毒作用。CAT是血红蛋白和其它含巯基蛋白质的保护剂。

关于氯霉素乙酰转移酶的简介

  氯霉素乙酰转移酶(Chloramphenicol Acetyltransferase ,CAT)是一种原核酶类,可以将氯霉素乙酰化而使其  失活,是细菌产生氯霉素抗性的主要原因。  在大肠杆菌中易表达,而且非常稳定,因此,氯霉素乙酰转移酶可被改造成检测氯霉素的理想工具酶。不同种类的抗性细菌可以产

氯霉素乙酰转移酶的结构

内容信息最早对CAT结构的研究主要使用的是CATⅠ和CATⅢ的杂聚体,CAⅠ和CA’F1nⅡ亚基的分子量分别是25688和24965道尔顿,而CATⅢ的沉降平衡数据显示其分子量为70500道尔顿,这证明CATⅢ是一个三聚体(αβ2和α2β)的结构。在CATⅢ三聚体中,每一亚基六条链的β片层结构延伸通

氯霉素乙酰转移酶的结构特点

内容信息最早对CAT结构的研究主要使用的是CATⅠ和CATⅢ的杂聚体,CAⅠ和CA’F1nⅡ亚基的分子量分别是25688和24965道尔顿,而CATⅢ的沉降平衡数据显示其分子量为70500道尔顿,这证明CATⅢ是一个三聚体(αβ2和α2β)的结构。在CATⅢ三聚体中,每一亚基六条链的β片层结构延伸通

氯霉素乙酰转移酶的基本功能

细菌的氯霉素抗性和CAT有着直接的关系。当含有CAT的细菌暴露于氯霉素时,可以使氯霉素乙酰化而失活。

氯霉素乙酰转移酶的主要功能

细菌的氯霉素抗性和CAT有着直接的关系。当含有CAT的细菌暴露于氯霉素时,可以使氯霉素乙酰化而失活。

组织细胞内CAT的作用

定位于细胞器的CAT与产生H2O2的需氧脱氢酶类(氨基酸氧化酶等)同时存在,能有效调节体内H2O2水平,及时地消除H2O2的有害影响。过氧化氢酶是在生物演化过程中正常细胞内清除氧自由基,生物防御系统的关键酶之一,其生物学功能是催化细胞内过氧化氢分解,防止过氧化,帮助减缓细胞衰老。保护细胞免受氧自由基

小鼠(CAT)ELISA试剂盒操作说明

ELISA试剂盒检测样本齐全:(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Monkey, Pig……)用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒科研专用

氯霉素

性状本品为白色至微带黄绿色的针状、长片状结晶或结晶性粉末本品在甲醇、乙醇、丙酮或丙二醇中易溶,在水中微溶。熔点本品的熔点(通则0612)为149~153℃比旋度取本品,精密称定,加无水乙醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含50mg的溶液,依法测定(通则0621),比旋度为+18.5°至+21.5鉴别(

氯霉素

性状本品为白色至微带黄绿色的针状、长片状结晶或结晶性粉末本品在甲醇、乙醇、丙酮或丙二醇中易溶,在水中微溶。熔点本品的熔点(通则0612)为149~153℃比旋度取本品,精密称定,加无水乙醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含50mg的溶液,依法测定(通则0621),比旋度为+18.5°至+21.5鉴别(

氯霉素乙酰转移酶的活性位点的介绍

  1、氯霉素结合位点  氯霉素结合与定位在亚基交界面的一个深深的袋子结构中。尽管形成袋子结构的大多数氨基酸位于形成交界面的其中的一个亚基中,在催化中起关键作用的195位的组氨酸却位于另外的一个亚基。氯霉素的苯环与29位亮氨酸,31位半胱氨酸,160亮氨酸,172位异亮氨酸的侧链结合,其二氯基团和1

冷凝集素测定(CAT)临床意义

正常参考范围:阴性临床意义:凝集价>1:64具有诊断意义,如在病程中,冷凝集素效价逐渐上升,则对诊断价值更大。支原体肺炎、肝硬化、多发性骨髓瘤 、疟疾、恶性淋巴瘤等冷凝集素有不同程度的升高。冷凝集素效价升高可在传染过程中出现,特别是传染性单核细胞增多症和支原体所致 非典型性肺炎;慢性的冷凝集

氯霉素乙酰转移酶的基本信息

氯霉素乙酰转移酶(Chloramphenicol Acetyltransferase ,CAT)是一种原核酶类,可以将氯霉素乙酰化而使其失活,是细菌产生氯霉素抗性的主要原因。

氯霉素乙酰转移酶的基本信息

氯霉素乙酰转移酶(Chloramphenicol Acetyltransferase ,CAT)是一种原核酶类,可以将氯霉素乙酰化而使其失活,是细菌产生氯霉素抗性的主要原因。

氯霉素乙酰转移酶的定点突变介绍

  为了研究反应中底物识别,催化和特殊侧链交互作用对蛋白结构各方面的影响,包括对其稳定性和反应活性的影响,CATⅢ己经有超过60种的定点突变类型。特殊的点突变类型有助于研究每一个酪氨酸残基在配体结合时荧光发生改变的过程中所起的作用,有助于进一步的阐明CATⅢ和氯霉素交互作用的NMR结果。对cat基因

薄层层析法测定氯霉素酰基转移酶含量实验

试剂、试剂盒 CAT 反应混合物 1乙基乙酸裂解缓冲液不含钙盐和镁盐的磷酸盐缓冲液薄层层析(TLC) 溶剂Tris-Cl放射性墨水仪器、耗材 干冰 乙醇浴不溶于乙醇的墨水的记号笔旋转真空蒸发器橡胶棒 薄层层析板薄层层析槽预设为 65°C 的水浴实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液、缓冲液和试剂的组分请见

报道基因活性的同位素分析实验——CAT活性的相抽提分析法

实验材料转染细胞试剂、试剂盒氯霉素Tris·ClTMPD二甲苯仪器、耗材离心机离心管培养箱实验步骤一、来源于哺乳动物细胞1.  按“CAT活性的层析分析法”中的步骤1~5的冻融法,制备哺乳动物细胞提取物。如果用胰蛋白酶消化或制细胞方法来收集细胞,则将原位裂解法的步骤1至4用以下的步骤2至4代替。 2

薄层层析法测定氯霉素酰基转移酶含量实验

材料缓冲液和溶液贮存液、缓冲液和试剂的组分请见附录 1。贮存液稀释到适当浓度。CAT 反应混合物 11mol/LTris-Cl(pH7.8)50ul[14C] 氯霉素 (60mCi/mmol, 用水稀释到 0.1mCi/ml)10ul乙酰辅酶 A(新鲜

薄层层析法测定氯霉素酰基转移酶含量实验

本方案中,我们列出了三种不同的分析方法,可以用来测定报道基因载体 pCAT3 转染哺乳动物细胞后表达的 CAT 酶活性(请见图 17-3)。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料用携带感兴趣 DNA 的 pCAT 载体转染的哺乳动物培养细

氯霉素滴眼液

性状本品为无色至微黄绿色的澄明液体鉴别(1)取本品4ml,照氯霉素项下的鉴别(1)试验显相同的反应。(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致检查pH值应为6.0~7.0(通则0631)有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液精密量取本

棕榈氯霉素

性状本品为白色或类白色粉末;几乎无臭本品在丙酮中易溶,在乙醇中略溶,在水中不溶。熔点本品经60℃干燥2小时,依法测定(通则0612),A晶型的熔点为89~95℃;B晶型的熔点为86~91℃比旋度取本品,精密称定,加无水乙醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含50mg的溶液,依法测定(通则0621),比旋

氯霉素胶囊

性状本品内容物为白色至微带黄绿色粉末或颗粒鉴别(1)取本品的内容物,照氯霉素项下的鉴别(1)项试验,显相同的反应。(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致检查干燥失重取本品的内容物,在105℃千燥至恒重,减失重量不得过1.0%(通则0831)。溶出

氯霉素片

性状本品为糖衣片或薄膜衣片,除去包衣后,显白色至微带黄绿色鉴别(1)取本品1片,除去包衣后,研细,加乙醇l0ml,振摇,使氯霉素溶解,滤过,滤液蒸干。残渣照氯霉素项下的鉴别(1)项试验,显相同的反应。(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。检查溶

氯霉素检测

  氯霉素检测试剂盒可定性、定量检测动物组织(含水产)、牛奶、蜂蜜、饲料、鸡蛋等样品中氯霉素的残留   一、概要    氯霉素 (Chloramphenicol,CAP)曾是应用广泛的抗菌素,但由于其存在严重的副作用,能引起人的再生障碍性贫血,粒细胞缺乏症等疾病,欧美等发达国家已相继禁止或严格禁

琥珀氯霉素

鉴别(1)取本品约50mg,加吡啶与氢氧化钠试液各5ml,混匀,置水浴中加热数分钟,吡啶层显深红色(2)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集(3)取本品约50mg,加乙醇制氢氧化钾试液2ml使溶解,注意防止乙醇挥散,置水浴中加热15分钟,溶液显氯化物鉴别(1)的反应(通则0301)。性状本品为

维护膜结构的完整性与CAT的作用

过氧化氢酶作为一种内源活性氧清除剂,能够在逆境或衰老过程中清除植物体内过量的活性氧,维持氧代谢平衡,保护膜结构。  线粒体是ROS产生的主要源泉和被清除的重要位点,过氧化物酶体是中长链脂肪酸β-氧化中一个重要细胞器,也是产生ROS的一个重要器官。CAT主要分布在线粒体和过氧化物酶体中,保护线粒体膜和