细胞RNA含量检测
细胞RNA含量检测 实验步骤 展开......阅读全文
组织/细胞RNA快速提取
操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)提示: 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量无水乙醇! 操作前在裂解液RLT中加入β-巯基乙醇至终浓度1%,如1 ml RLT 中加入10μl β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的RLT 4℃可放置一个月。1. 组织培养细胞a. 收
细胞化学词汇RNA包装
中文名称:RNA包装英文名称:RNA packaging定 义:特指病毒RNA通过其顺式作用元件被病毒核衣壳蛋白识别和包裹的过程。广义指核糖核蛋白颗粒的形成。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇RNA定位
中文名称:RNA定位英文名称:RNA localization定 义:RNA特异定位在细胞不同区域的过程。尤其是信使核糖核酸(mRNA)的定位对生长和发育是重要的。细胞质中RNA定位起始于细胞核,在核中被特异RNA结合蛋白识别,生成核糖核蛋白复合体,然后输出到细胞质。应用学科:生物化学与分子生物学
细胞化学词汇互补RNA
中文名称:互补RNA英文名称:complementary RNA定 义:能与另一条核酸(DNA或RNA)链互补的RNA分子。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
培养细胞中RNA检测
实验概要掌握培养细胞中RNA的检测方法。实验步骤1.制胶(1%): 琼脂糖 2.5g 10×Mops缓冲液 25.0ml H2O 192.0ml2.在微波炉中加热煮沸使胶完全溶于水并灭菌。3.取出胶冷却到60℃,于通风柜中加45ml甲醛,混匀。4.加20μl溴化乙锭,混匀。5.令胶液再
真核细胞总RNA的制备(Total-RNA-Isolation)1
从细胞中分离RNA的纯度于完整性对于许多分子生物学实验至关重要。如Northern印迹与杂交分析、寡聚(dT)纤维素选择分离 mRNA,cDNA合成及体外翻译等实验的成败,在很大程度上决定于RNA的质量。RNA分离的最关键因素是尽量减少RNA酶的污染。快速一步法提取总RNA组织及有核细胞在匀浆过程中
真核细胞总RNA的制备(Total-RNA-Isolation)2
Total RNA Isolation Guanidine-based isolation Objective: To obtain total RNA from zebrafish embryos. Required Materials Denaturing Solution
纯化RNA实验——从培养的细胞中纯化总RNA
实验材料细胞试剂、试剂盒RNA 提取缓冲液变性液水饱和酚仪器、耗材培养皿Falcon 2063 管实验步骤1. 取 1 个细胞已长满的 100 ml 培养皿,吸出培养液,加 2 ml RNA 提取缓冲液,用橡胶刮棒刮下细胞。RNA 提取缓冲液:变性液,20 mlβ-巯基乙醇,0.144 ml2 mo
组织和细胞RNA的制备
一、 组织和细胞总RNA提取:异硫氰酸胍法(一)试剂准备1.CSB缓冲液:42mM柠檬酸钠;0.83% N-lauryl sarcosine(十二烷基,N甲基甘氨酸钠);0.2 mM β-巯基乙醇。2.变性液:异硫氰酸胍(终浓度 4 M)25g、CSB缓冲液 33ml,混合直至完全溶解,可在65℃助
细胞化学词汇RNA衣壳化
中文名称:RNA衣壳化英文名称:RNA encapsidation定 义:RNA被蛋白质衣壳包裹生成RNA病毒的过程。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇时序小RNA
中文名称:时序小RNA英文名称:small temporal RNA;stRNA定 义:一类长度约为22核苷酸的非编码RNA,是微RNA大家族的成员。与生物发育时间顺序调控有关,如早期报道的线虫lin-4和let-7时序小RNA。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞质RNA提取实验
由于RNA的种类来源很多,因而提取制备方法各异,一般有苯酚法,去污剂法和盐酸胍法,其中苯酚法实验室最常用。组织匀浆后用苯酚处理离心,RNA即溶于上层被酚饱和的水相中,向水相加冷乙醇后, RNA即以白色絮状沉淀析出。此法较好除去DNA和蛋白质,且获得生物活性的RNA。实验材料RNA试剂、试剂盒PBS细
细胞化学词汇转移信使RNA
中文名称:转移-信使RNA英文名称:ransfer-messenger RNA;tmRNA定 义:一类兼有接受(携带)氨基酸和编码氨基酸的双功能RNA分子。其主要功能是在特定情况下可提前终止蛋白质的生物合成,以免产生不良产物。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
总细胞RNA的提取方法
实验概要总细胞RNA的提取在建库过程中,由于cDNA合成这一步将使用通用引物oligo dT,因此在总RNA提取这一步中,提取纯化mRNA不是非常必要的。提取高纯度的总细胞RNA足可以被用作cDNA合成的模板,目前提取RNA的方法很多,也有不少商业化的试剂盒。实验步骤1. TRIZOL法 1)
细胞化学词汇转移信使RNA
中文名称:信使RNA外文名称:Messenger RNA 定 义:信使RNA,中文译名“信使核糖核酸”,是由DNA的一条链作为模板转录而来的、携带遗传信息能指导蛋白质合成的一类单链核糖核酸。以细胞中基因为模板,依据碱基互补配对原则转录生成mRNA后,mRNA就含有与DNA分子中某些功能片
细胞质RNA提取实验
实验材料 RNA试剂、试剂盒 PBS细胞裂解液SDS蛋白酶K酚氯仿异戊醇无水乙醇仪器、耗材 离心机培养箱实验步骤 1. 对于单层培奍细胞(1)每10 cm 培养皿培养的细胞,用冰冷PBS洗涤3次。(2)每次1 ml 然后用小体积PBS刮下细胞,转移至冰浴的离心管中。(3)300 g 离心5 min
细胞化学词汇单链RNA
中文名称:单链RNA英文名称:single-stranded RNA;ssRNA定 义:只含有一条链的RNA分子。生物体中绝大部分RNA是单链RNA,形成二级结构时,是既有单链、又有双链结构域的RNA分子;只有某些RNA病毒是由两条链互补而成的双链RNA。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科)
细胞质RNA提取实验
基本方案 实验材料 RNA 试剂、试剂盒
细胞化学词汇双义RNA
中文名称:双义RNA定 义:部分基因的表达需要先进行转录合成出亚基因组RNA,作为mRNA翻译出蛋白质
细胞化学词汇反式作用RNA
中文名称:反式作用RNA英文名称:trans-acting RNA定 义:通过分子间反应机制起作用的RNA。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇核小RNA
中文名称:核小RNA外文名称:small nuclearRNA定 义:核小RNA是真核生物转录后加工过程中RNA剪接体(spliceosome)的主要成分,参与mRNA前体的加工过程。
单细胞RNA测序发现新的免疫细胞
最近在《Nature Immunology》发表的一项新研究,详细检测了一组新发现的免疫细胞(被称为ILC)。通过对单个扁桃体细胞的基因表达进行分析,瑞典卡罗林斯卡学院的科学家们,发现了三个以前未知的ILC子群,并揭示了关于“这些细胞在人体中如何发挥功能”的更多信息。 先天淋巴细胞(ILC)是
细胞化学词汇核仁小分子RNA
中文名称:核仁小分子RNA外文名称:small nucleolar RNA定 义:核仁小RNA(small nucleolar RNA),是近来生物学研究的热点,由内含子编码,分布于真核生物细胞核仁的小分子非编码RNA,具有保守的结构元件。已证明有多种功能,主要参与rRNA的加工;反义s
解读单细胞RNAseq技术
多年来,跟踪一个单细胞的转录组,超出了我们的能力。但是现在,时代已经变了,新的单细胞RNA-seq方法,可以分析大量的细胞及它们的命运 多年来,跟踪一个单细胞的转录组,超出了我们的能力。但是现在,时代已经变了,新的单细胞RNA-seq方法,可以分析大量的细胞及它们的命运。 我们都参加过大型生日派
细胞化学词汇RNA稳定性
中文名称:RNA稳定性英文名称:RNA stability定 义:在改变细胞环境情况下,或当分离、纯化、保存,以及进行物理和化学操作时,RNA分子保留其原结构状态和抗拒降解的程度。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
调节细胞衰老的RNA分子发现
美国得克萨斯大学西南医学中心科学家发现了一种新的衰老调节因子SNORA13。当这种非编码RNA被抑制时,细胞衰老过程显著减缓,表明它可能是治疗与衰老相关疾病的潜在靶点。研究团队指出,这一发现有望为神经退行性疾病、心血管疾病和癌症等与衰老密切相关的疾病提供新的干预手段,也有望为治疗核糖体病开辟新途径。
培养细胞中RNA检测-Northern-Blot
培养细胞中RNA检测-Northern Blot1.制胶:(1%)琼脂糖 2.5g10×Mops缓冲液 25.0mlH2O 192.0ml2.在微波炉中加热煮沸使胶完全溶于水并灭菌。3.取出胶冷却到60℃,于通风柜中加45ml甲醛,混匀。
微RNA与癌细胞转移有关
一种正常作用之一可能是帮助细胞从胚胎的一部分向另一部分运动的微RNA,被发现在侵略性人类乳腺癌中高度表达,调控乳腺癌细胞的迁移、入侵和转移。微RNA(自然出现的单链RNA分子,参与基因调控)以前曾被发现能引起癌症,但这是首次关于它与癌细胞转移有关的报告。微RNA的功能目标似乎是HoxD10基因,它是
细胞化学基础核糖体RNA
核糖体RNA(rRNA)与核糖体蛋白构成一种称为核糖体的核蛋白颗粒。一个大肠杆菌中约有15000个核糖体。 1.核糖体组成和结构原核生物和真核生物的核糖体都由一个大亚基和一个小亚基构成,两个亚基都由rRNA和核糖体蛋白构成。核糖体、核糖体亚基及rRNA的大小一般用沉降系数表示。 2.核糖体RNA特点
细胞化学词汇RNA复制酶(RdRp)
即“RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)”RNA聚合酶的一种,存在于大部分RNA病毒中。和细胞中用来转录的RNA聚合酶(DdRp)不同,RNA复制酶的模板是RNA分子。某些RNA复制酶还有解旋酶活性,正链RNA或双链RNA病毒复制时都会产生双链RNA,RNA复制酶可以解开这些双链,保证RNA的复制顺