荧光分光光度计法测定硫酸奎宁浓度的实验方法与步骤
荧光分析法具有灵敏度高、选择性强、试样量少的特点。本实验的主要目的是通过学习荧光法测定硫酸奎宁,掌握VARIAN荧光分光光度计 的使用方法以及利用荧光法进行定量分析。一、实验目的1.熟悉VARIAN荧光分光光度计的原理和使用2.掌握激发光谱和发射光谱的概念及测定方法3.掌握用标准曲线法进行荧光定量分析VARIAN荧光分光光度仪荧光分光光度计基本流程如图:光谱扫描的实现:仪器有两套光栅分光系统,根据激发和发射光栅动的形式可形成两种光谱:激发光谱:激发光栅转动发射光谱:发射光栅转动荧光物质的激发光谱固定发射光波长.以不同波长的入射光激发荧光物质,化合物发射的荧光强度F与入射光波长的关系曲线λ2.发射光谱 (或荧光光谱 )固定激发光波长. 化合物发射的荧光中各种波长组分的荧光强度.二、实验原理1.硫酸奎宁的分子 结构特征硫酸奎宁属生物碱类抗心率失常药,其分子具有喹啉环结构,可产生较强的荧光,可......阅读全文
分析纯硫酸的浓度
纯硫酸浓度是98.3硫%。酸在达到98.3%的时候就会形成三氧化硫 形成发烟硫酸所以硫酸的最大浓度最多为98.3%纯硫酸的物理性质 1、纯硫酸是一种无色无味油状液体。常用的浓硫酸中H2SO4的质量分数为98.3%,其密度为1.84g·cm-3,其物质的量浓度为18.4mol·L-1。2、硫酸是一种高
维生素B2-(核黄素)-荧光测定法实验_荧光测定法2
实验方法原理核黄素在pH 4~9 的条件下,用450 nm波长的光激发,可发出波长为520 nm的荧光。在核黄素的含量为0.1~10 μg范围内,荧光的强度,与核黄素浓度成正比,硫代硫酸钠可消除核黄素的荧光性。实验材料核黄素试剂、试剂盒荧光红钠 硫代硫酸钠 盐酸仪器、耗材荧光分光光度计 容量瓶实验步
详述荧光分光光度计测试步骤
详述荧光分光光度计测试步骤应如何正确使用荧光分光光度计来进行测试呢?以下将由上海旦鼎技术人员为您详述:荧光分光光度计详细测试步骤(一)样品准备1.液体样品根据用户提供的技术指标,检查浓度范围是否合适,如果需要稀释,则要考虑所需溶剂类型和稀释倍数。2.固体样品均匀粉末、片状或具有光滑平面的块状样品,均
改良硫酸钡比浊法测定硫酸铬的方法原理
在酸性介质中硫酸根与氯化钡反应,生成硫酸钡悬浊液,根据浊度大小,用分光光度法测定。用明胶作为分散剂和稳定剂,所生成硫酸钡浊液的浊度比较稳定。本方法的检出限为0.4mg/L,测定上限为70mg/L。
Lowry-检测法测定蛋白质浓度实验
实验方法原理Lowry 法又称为 Folin-酚试剂法。首先在碱性溶液中形成铜-蛋白复合物,然后这一复合物还原磷钼酸-磷钨酸试剂 (Folin-酚上级),产生钼蓝和钨蓝复合物的深蓝色,这种深蓝色 的复合物在745~750 nm 处有最大的吸收峰,颜色的深浅(吸收值)与蛋白质浓度成正比,可根据 750
Lowry-检测法测定蛋白质浓度实验
实验方法原理 Lowry 法又称为 Folin-酚试剂法。首先在碱性溶液中形成铜-蛋白复合物,然后这一复合物还原磷钼酸-磷钨酸试剂 (Folin-酚上级),产生钼蓝和钨蓝复合物的深蓝色,这种深蓝色 的复合物在745~750 nm 处有最大的吸收峰,颜色的深浅(吸收值)与蛋白质浓度成正比,可根
Lowry-检测法测定蛋白质浓度实验
Lowry检测法 实验方法原理 Lowry 法又称为 Folin-酚试剂法。首先在碱性溶液中形成铜-蛋白复合物,然后这一复合物还原磷钼酸-磷钨酸试剂 (F
碱片重量法测定硫酸盐化速率的操作步骤
步骤①沿塑料垫圈内缘,月利小刀刻下直径为5.0cm的样品膜。置于150ml烧杯中,斜靠在玻璃棒上,盖上表面皿,小心地从烧杯嘴处滴加10.4mol/L盐酸溶液约20ml。待二氧化碳完全逸出后,将碱片捣碎,加热至近沸2~3min。②用少量水冲洗表面皿,用中速定量滤纸将样品溶液滤入150ml烧杯中。过滤时
二盐酸奎宁的检查方法
酸度取本品0.30g,加水10ml溶解后,依法测定(通则0631),pH值应为2.0~3.0。硫酸盐取本品1.0g,依法检查(通则0802),与标准硫酸钾溶液5.0ml制成的对照液比较,不得更浓(0.05%)。其他金鸡纳碱照薄层色谱法(通则0502)试验。供试品溶液取本品,加甲醇溶解并稀释制成每1m
荧光光谱仪器的校正
灵敏度校正 荧光光度计的灵敏度可以用被检测出的最低信号来表示,通常以硫酸奎宁的检出限或者以纯水的的拉曼峰的信噪比(S/N)表示。 荧光光度计的灵敏度与光源强度,单色器(包括透镜,反射镜)的性能,放大系统的特征,和光电倍增管的灵敏度有关; 与所选用的波长,狭缝宽度有关。 与被测空白溶剂的拉曼散射,激
叶绿素a的荧光法测定方法介绍
该方法适合于藻类比较少的贫营养湖泊或外海洋中的叶绿素a的测定。当丙酮提取液经紫外线照射时,叶绿素a有固有的红色荧光特征,而且其浓度与荧光强度存在一定的规律性,因此可定量测定叶绿素a的含量。由于所用的光源强度高,故荧光法比分光光度法的灵敏度高两个数量级左右。但是分析过程中易受其他色素或色素衍生物的干扰
维生素B2和维生素C的含量测定
一、实验目的 了解和掌握荧光分光光度计的使用方法二、实验原理 测Vc 的实验原理:抗坏血酸在氧化剂存在下,被氧化成脱氢抗坏血酸,氧化型的抗坏血酸与邻苯二胺作用生成荧光化合物(脱氢抗坏血酸对-氮杂萘),此荧光化合物的激发波长是350nm,荧光波长在430nm,其荧光强度与抗坏血酸含量成正比,样品的荧
实时荧光定量PCR具体实验步骤
1 样品RNA的抽提①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的仿,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚仿相,中间层以及无色水相上
冰冻切片免疫荧光实验步骤
1.组织用4%多聚甲醛固定6-8小时,转至20%蔗糖溶液至组织沉底。2.冰冻切片8-10μm,推荐瑞沃德冷冻切片机,温度稳定,切片质量高。室温放置30分钟以上防脱片,-20℃保存。从冰箱拿出的冰冻切片在室温放置30分钟以上再进行免疫荧光。3.1xPBS洗3次,每次3-5分钟。4.用2%BSA室温或3
实时荧光定量PCR具体实验步骤
1 样品RNA的抽提①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的氯仿,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚氯仿相,中间层以及无色水相
冰冻切片免疫荧光实验步骤
1.组织用4%多聚甲醛固定6-8小时,转至20%蔗糖溶液至组织沉底。2.冰冻切片8-10μm,推荐瑞沃德冷冻切片机,温度稳定,切片质量高。室温放置30分钟以上防脱片,-20℃保存。从冰箱拿出的冰冻切片在室温放置30分钟以上再进行免疫荧光。3.1xPBS洗3次,每次3-5分钟。4.用2%BSA室温或3
荧光显微镜的技术和拉曼光谱技术原理
环境水中石油类污染物的含量是反映水质的指标之一,本文采用三波长定量测试水中油含量,样品测试方便,数据准确。环境中水中的石油类来自工业废水和生活污水的污染。油类物质在水面形成油膜,影响了空气和水的气体交换;分散于水中以及吸附于颗粒上或以乳化状态存在于水中的油,被微生物分解时,将消耗水中溶氧,容易使
水质中石油类含量测定上荧光分光光度法的应用
环境水中石油类污染物的含量是反映水质的指标之一,本文采用三波长定量测试水中油含量,样品测试方便,数据准确。环境中水中的石油类来自工业废水和生活污水的污染。油类物质在水面形成油膜,影响了空气和水的气体交换;分散于水中以及吸附于颗粒上或以乳化状态存在于水中的油,被微生物分解时,将消耗水中溶氧,容易使
库仑法测定COD的方法的操作步骤
操作步骤(1)标定值的测定①准确吸取12 ml重蒸馏水置于锥形瓶中,加1.00 ml 0.050 mol/L的重铬酸钾溶液,慢慢加入17.0 ml硫酸-硫酸银溶液,混匀。放入2~3粒玻璃珠,加热回流。②回流15 min后停止加热,用隔热板将锥形瓶与电炉隔开、稍冷,由冷凝管上端加入33 ml重蒸馏水。
荧光分光光度计产品特点及主要技术指标
TZ87-108荧光分光光度计产品特点及主要技术指标 荧光分光光度计可广泛用于化工化学、环保、药检、医疗卫生、食品营养等场合作常量、微量的可见荧光测试。 荧光分光光度计产品特点具有荧光测试光门自动启动功能 具有测试数据,自动打印功能。 检测灵敏度高,测量范围宽。 可连接微机工作站,扩展分析测试功
离子色谱法测定硫酸雾-的方法原理
原理用玻璃纤维滤筒进行等速采样,用水浸取,除去阳离子后,用离子色谱法测定硫酸根离子。原理同硫酸盐化速率中碱片离子色谱法。干扰及消除样品中有钙、锶、镁、锆、钍、铜、铁等金属阳离子共存时对测定有干扰,通过阳离子树脂柱交换处理后可除去干扰。测定范围:0.3~500mg/m3。
微生物实验纸片法测定测定抗生素效价方法的实验步骤
实验前准备:4个培养皿,2支移液管,1支涂布棒,并将培养皿包好灭菌,取一定的蒸馏水灭菌制成无菌水.1、配制营养琼脂培养基:称取营养琼脂9.6g,加入300ml蒸馏水,加热煮沸后将培养基导入锥形瓶,然后包扎灭菌(121°C,20min).2、倒平板:在无菌环境操作下,将上述培养基倒入4个平板,并编号1
请教Bradford法测定蛋白浓度原理及方法
解:是利用蛋白质-染料结合的原理,定量地测定微量蛋白质浓度的快速灵敏的方法。试剂和仪器一、试剂试剂盒自备:G250染色液、BSA标准蛋白。BSA标准蛋白浓度已稀释至500μg/ml,-20℃保存。二、测试样品待测样品蛋白浓度稀释在50-500μg/ml范围内为宜。三、仪器96孔酶标、酶标仪。操作方法
荧光原位杂交(FISH)之三:实验方法及步骤
1)探针变性将探针在75oC恒温水浴中温育5min,立即置0oC,5~10min,使双链DNA探针变性。2)标本变性①将制备好的染色体玻片标本于50oC培养箱中烤片2~3h。(经Giemsa染色的标本需预先在固定液中退色后再烤片)。 ②取出玻片标本,将其浸在70~75oC的体积分数70%
铬酸钡分光光度法测定硫酸雾方法的操作采样及计算步骤
采样按颗粒物采样方法,用玻璃纤维滤筒,等速采样5~30min。步骤1、样品溶液的制备将采样后的滤筒撕碎放入250ml锥形瓶中,加100ml水浸没,瓶口上放一玻璃漏斗,于电炉或电热板上加热近沸,约30min后取下,冷却后将浸出液用中速定量滤纸滤入250ml容量瓶中,用20~30ml水洗涤锥形瓶及滤筒残
硫酸奎宁测量子产率用什么仪器测
1、首先,对你的目标化合物进行紫外吸收光谱的测试。找出最大吸收波长。2、选择紫外最大吸收波长为激发波长,对你的目标化合物进行荧光光谱的测试,得到激发波长。3、以最大吸收波长和荧光波长找已知的荧光量子产率的参比物,比如 硫酸奎宁。参比已知的荧光量子产率的参比物表格可以百度。4、分别测试同种溶剂中的目标
硫酸肼的实验室制备硫酸肼方法
硫酸肼又名硫酸联氨,是联氨与硫酸生成的盐类,纯品为无色鳞状晶体或斜方晶体。分子量130.12。分子式N2H4·H2SO4。熔点254℃,继续加热则分解。相对密度1.37。微溶于冷水,易溶于热水(20℃时2.87、25℃时3.41、30℃时3.89、40℃时4.16、50℃时7.0、60℃时9.07、
H+-浓度为0.1mol/L的稀硫酸滴定液配制步骤
1)取干燥洁净的1L容量瓶 2)使用5ml刻度移液管移取2.7ml浓硫酸至1L容量瓶中 3)加入蒸馏水定容至容量瓶刻度线 4)摇匀精确标定其H+的浓度值 5)将标定好的滴定液转移至滴定液瓶中即可 备注:转移浓硫酸过程中一定要佩戴防腐橡胶手套
二盐酸奎宁的含量测定方法
取本品约0.15g,精密称定,加醋酐5ml与醋酸汞试液3ml溶解后,加结晶紫指示液1滴,用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显蓝绿色,并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于19.87mg的C2oH24N2O2·2HCl
二盐酸奎宁的鉴别方法
(1)取本品约20mg,加水20ml溶解后,分取溶液10ml,滴加稀硫酸,即显蓝色荧光。(2)取上述溶液5ml,加溴试液3滴与氨试液1ml,即显翠绿色(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集11图)一致。(4)本品的水溶液显氯化物鉴别(1)的反应(通则0301)。