为什么deSALT技术能够突破长RNAseq读序列比对瓶颈

由于高测序错误和复杂的基因结构,长读RNA测序读段的比对就显得非常重要。2019年12月16号,哈尔滨工业大学臧天仪、王亚东团队在Genome Biology上在线发表了题为deSALT: fast and accurate long transcriptomic read alignment with de Bruijn graph-based index的文章。研究提出了deSALT,这是一种量身定制的两遍比对方法,该方法构造基于图的比对骨架以推断外显子,并使用它们来生成剪接的参考序列以产生精确的比对。 deSALT解决了一些困难的技术问题,例如小外显子和测序错误,这些问题突破了长RNA-seq读取序列比对的瓶颈。基准测试表明,deSALT具有产生准确和均一的全长比对的更大能力。 RNA测序(RNA-seq)已成为表征转录序列的一种基本方法.它揭示了精确的基因结构,并量化了基因/转录表达在各种应用中的作用,如变异调用,......阅读全文

为什么deSALT技术能够突破长RNAseq读序列比对瓶颈

  由于高测序错误和复杂的基因结构,长读RNA测序读段的比对就显得非常重要。2019年12月16号,哈尔滨工业大学臧天仪、王亚东团队在Genome Biology上在线发表了题为deSALT: fast and accurate long transcriptomic read alignment

RNASeq和线粒体测序介绍

如今NGS已能够快速经济地阅读数亿个reads,所及之处远超越基因组学(如RNA测序使转录组学发生革命性变化)。尽管NGS取得了诸多进步,但依然存在一些重大的挑战。日前,牛津大学举办的“NGS七周年大会”聚焦了NGS面临的挑战,此次会议阐述了NGS领域最令人生畏的障碍,同时也阐述了跨越这些障碍的技术

多序列比对的目标是什么?

多序列比对的目标是使得参与比对的序列中有尽可能多的列具有相同的字符,即使得相同残基的位点位于同一列,这样以便于发现不同的序列之间的相似部分,从而推断它们在结构和功能上的相似关系,主要用于分子进化关系,预测蛋白质的二级结构和三级结构、估计蛋白质折叠类型的总数,基因组序列分析等。

多序列比对的实际应用2

模体和样式前面叙述的方法对于多序列比对极为有用,但是用户必须实现搜集好独立的输入序列,要么通过一系列的BLAST或其它的数据库搜索,要么在实验室里直接作出决定。但是,有太多的方法可以获取一个单独的序列,并且基于此序列中的任何模体或样式,返回所有的蛋白质家族,完成某个特异方法所定义的最佳比对。很多时候

多序列比对的实际应用1

Andreas D.BaxevanisGenome Technology BranchNational Human Genome Research InstitudeNational Institutes of HealthBethesda.Maryland 在寻找基因和致力于发现新蛋白的努力中,人

构建多序列比对模型的方法介绍

手工比对方法手工比对方法在文献中经常看到。因为难免加入一些主观因素,手工比对通常被认为有很大的随意性。其实,即使用计算机程序进行自动比对,所得结果中的片面性也不能予以忽视。在运行经过测试并具有比较高的可信度的计算机程序基础上,结合实验结果或文献资料,对多序列比对结果进行手工修饰,应该说是非常必要的。

如何获取漂亮的ClustalX序列比对图片

发表论文当然需要一些质量高的图片,那么如何将ClustalX序列比对的结果转化成比较漂亮的图片呢?小编在此搜集了一个还不错的教程,分享给大家。多序列比对在分子生物学中是一个基本方法,用来发现特征序列,进行蛋白分类,证明序列间的同源性,帮助预测新序列二级结构与三级结构,确定PCR 引物,以及在分子进化

如何获取漂亮的ClustalX序列比对图片

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如何获取漂亮的ClustalX序列比对图片

发表论文当然需要一些质量高的图片,那么如何将ClustalX序列比对的结果转化成比较漂亮的图片呢?小编在此搜集了一个还不错的教程,分享给大家。多序列比对在分子生物学中是一个基本方法,用来发现特征序列,进行蛋白分类,证明序列间的同源性,帮助预测新序列二级结构与三级结构,确定PCR 引物,以及在分子进化

如何解决RNAseq量化误差?

  NA-Seq已经成为测量基因表达的标准,以及用于人类疾病研究的一种重要技术。基因表达量化分析涉及,测序序列与一个已知基因组或转录组参考序列的比对。这种量化的准确度取决于,序列中要有足够多的独特信息,才能使生物信息学工具能够准确地将测序序列分配到正确的基因位置上。  九月四日,英国爱丁堡大学的Ch

双序列比对的背景及临床意义

是序列分析的基础·然而,对于构成基因家族的成组的序列来说,我们要建立多个序列之间的关系,这样才能揭示整个基因家族的特征·多序列比对在阐明一组相关序列的重要生物学模式方面起着相当重要的作用。多序列比对有时用来区分一组序列之间的差异,但其主要用于描述一组序列之间的相似性关系,以便对一个基因家族的特征有一

序列比对之Clustalx与Clustalw使用指南

这几天实验需要做多序列比对,很久不做了,一时之间不知道如何使用clustal这个工具了。在网上搜集了一些资料,做个整理,总结了Clustalx和Clustalw的使用,省得以后久不使用又生疏了,又要去整理了,在此分享给大家,希望有所帮助。1.先提供下载地址:Clustalx、Clustalw的各种最

多重序列比对及系统发生树的构建

【实验目的】1、熟悉构建分子系统发生树的基本过程,获得使用不同建树方法、建树材料和建树参数对建树结果影响的正确认识;2、掌握使用Clustalx进行序列多重比对的操作方法;3、掌握使用Phylip软件构建系统发生树的操作方法。【实验原理】在现代分子进化研究中,根据现有生物基因或物种多样性来重建生物的

多重序列比对及系统发生树的构建实验

            实验方法原理 在现代分子进化研究中,根据现有生物基因或物种多样性来重建生物的进化史是一个非常重要的问题。一个可靠的系统发生的推断,将揭示出有关生物进化过程的顺序,有助于我们了解生物进化的历史和进化机制。 实验步骤

多重序列比对及系统发生树的构建实验

实验方法原理在现代分子进化研究中,根据现有生物基因或物种多样性来重建生物的进化史是一个非常重要的问题。一个可靠的系统发生的推断,将揭示出有关生物进化过程的顺序,有助于我们了解生物进化的历史和进化机制。实验步骤一、用CLUSTALX软件对已知DNA序列做多序列比对。操作步骤:1.  以FASTA格式准

多序列比对法的一般步骤

多序列比对一般通过3个步骤完成:(1)两两进行双重比对。(2)生成一系统树图(dendrogram),将序列按相似性大致地分组。(3)使用系统树图作为引导,产生出最终的多序列比对结果。

体外转录测序揭示RNAseq的终极误差

  高通量RNA测序(RNA-seq)是了解转录调控的一种强大技术。利用RNA-seq,我们不仅可以更好地进行传统的基因差异表达分析,而且还可以全面地研究可变剪接、RNA编辑、等位基因特异性表达和确定新的转录本(编码RNA和非编码RNA)。  与更成熟的、以RNA表达分析为基础的微阵列相反,RNA-

体外转录测序揭示RNAseq的终极误差

  高通量RNA测序(RNA-seq)是了解转录调控的一种强大技术。利用RNA-seq,我们不仅可以更好地进行传统的基因差异表达分析,而且还可以全面地研究可变剪接、RNA编辑、等位基因特异性表达和确定新的转录本(编码RNA和非编码RNA)。  与更成熟的、以RNA表达分析为基础的微阵列相反,RNA-

基因序列排序与整理、数据库比对与意义

由于定序系统的定序方法都是将体细胞内的基因序列打断成很多段落后,再利用DNA扩增的方式原理,在扩增的同时借由侦测萤光的方式(将不同碱基原料接上萤光讯号,只要这有接讯号的碱基被合成了,即会发出不同强度的萤光讯号)即能得到大量的片段式基因序列。经数字化后的基因序列需经整理将每段落的头尾相接成一个完整的基

多重序列比对及系统发生树的构建实验(一)

实验方法原理在现代分子进化研究中,根据现有生物基因或物种多样性来重建生物的进化史是一个非常重要的问题。一个可靠的系统发生的推断,将揭示出有关生物进化过程的顺序,有助于我们了解生物进化的历史和进化机制。实验步骤一、用CLUSTALX软件对已知DNA序列做多序列比对。操作步骤:1.  以FASTA格式准

多重序列比对及系统发生树的构建实验(二)

2.  文件outfile改为infile。点击DNADIST程序。选项M是输入刚才设置的republicate的数目,输入D选择data sets,输入200。设置好条件后,输入Y确认参数。程序开始运行,并在EXE文件夹中产生outfile,部分内容如下:将outfile文件名改为infile,为

详细介绍一下基因表达分析方法的原理

几种常见基因表达分析方法的原理:定量 PCR(qPCR):原理:基于聚合酶链式反应(PCR)的原理,通过监测 PCR 反应过程中荧光信号的积累来定量测定特定基因的起始拷贝数。在反应体系中加入荧光染料或荧光标记的探针,这些物质能与 PCR 产物结合并发出荧光。随着 PCR 循环的进行,产物不断积累,荧

RNAseq综述(五)

第1阶段-测序读长的比对(alignment)与组装(assembly)测序完成后,分析的起点就是数据文件,这个数据文件包含了测序计数的碱基,这些数据文件通常是以FASTQ文件的格式存在。处理这些FASTQ文件最常见的第一步操作就是将测序读长回贴到已知的转录组上(或已经注释的基因组上),将每个测序读

Nature:RNAseq疾病诊断潜力不容忽视

  全外显子组测序(WES)和全基因组测序(WGS)对于罕见的孟德尔遗传病的检测能力最高只能达到50%,基于这两种手段,我们对于遗传多样性带来具体生物学功能差异和临床疾病病因的解释能力是十分有限的。Cummings课题组曾使用RNA测序(RNAseq)对肌肉疾病进行了准确的检测,证实了RNAseq在

DNA芯片技术和RNA测序有啥不同?

 日本推理小说家东野圭吾的作品《白金数据》中描述了这样一个未来世界:日本政府秘密建立名为“白金数据”的数据库。该库搜集了全国人民的DNA数据,通过对犯罪分子留在现场的毛发、体液等证物进行比对,警方可以高效、快速、准确锁定真凶。借助“白金数据”的帮助,一个检举率100%、冤案率0%的理想法制社会构建完

转录组测序原理

而转录组测序即是利用高通量测序技术,将细胞或组织中的全部或部分mRNA, miRNA, lnc RNA 进行测序分析的技术。通过RNA-seq,也就是转录组测序,可以帮助我们了解各种比较条件下所有基因的表达差异包括:正常组织与肿瘤组织;药物治疗前后的表达差异;发育过程中,不同发育阶段,不同组织的表达

RNAseq综述(一)

摘要在过去的十年中,RNA测序(RNA-seq)已经成为在全转录组范围内分析差异基因表达和mRNAs差异剪接的重要工具。然而,随着下一代测序技术的发展,RNA-seq技术也在不断发展。现在,RNA-seq用于研究RNA生物学的许多方面,其中包括单细胞基因表达、翻译(翻译组,translatome)和

Nature-Methods新方法能矫正RNAseq测序的技术偏差

  基因表达分析正越来越多地用于癌症的诊断和检测,是生物学研究的主要工具,一种新型的计算方法可以提高基因表达分析的准确性。  来自卡耐基梅隆大学和纽约州立大学石溪分校的研究人员称,他们的方法(被称作Salmon)能够矫正转录组测序技术(RNA-seq)中的技术偏差。而且这种技术预估基因表达水平的速度

液相序列捕获系统与高通量测序

Nature Biotechnology 2009年2月封面文章:基于安捷伦寡核苷酸序列合成技术的液相序列捕获系统 – 高通量平行靶向测序的最佳解决方案来自美国麻省理工学院和哈佛大学Broad研究院的研究人员,利用安捷伦(Agilent Technologies)卓越的寡核苷酸序列合成技术,合成

测序技术及DNA序列测定结果分析

实验概要 在分子生物学研究中,DNA的序列分析是进一步研究和改造目的基因的基础。目前用于测序的技术主要有Sanger等(1977)发明的双脱氧链末端终止法和Maxam和   Gilbert(1977)发明的化学降解法。这二种方法在原理上差异很大,但都是根据核苷酸在某一固定的点开始,随机在某一个特定的