化学键合相色谱仪C18色谱柱填料对色谱行为的影响
化学键合相色谱仪C18色谱柱填料的粒径、孔径、孔体积、键合反应、含碳量和端基封尾等对色谱行为有重要影响。一、粒径:粒径是指柱填料的颗粒直径大小。实际上色谱柱上所标的粒径是颗粒粒径的平均值。一般来说,平均粒径越小,颗粒分布度越小,柱效越高。反之越低。目前C18柱填料粒径在4~10um之间。二、孔径:孔径是指柱填料颗粒间的孔间隙。一般所说的孔径是填料的平均孔径。无定形填料的平均孔径分布较宽,柱床结构不均匀,流动相速度不均匀,谱带展宽。球形填料的平均孔径分布比较窄,柱床结构均匀,柱效高,重现性好。平均孔径的大小对大分子化合物的分离影响较大。在用反相色谱分离如蛋白和多肽样品时,应选用大孔径(如30nm)的反相柱填料。三、孔体积:在分离较大分子化合物时,应选用较大孔体积的反相柱填料。四、键合反应:C18柱是以硅烷化键合型(Si-O-Si-C)存在的,这类键合反应目前应用zui为普遍。可以键合极性较大的有机基团,采用极性较小的溶剂作流动相。......阅读全文
化学键合相色谱仪C18色谱柱填料对色谱行为的影响
化学键合相色谱仪C18色谱柱填料的粒径、孔径、孔体积、键合反应、含碳量和端基封尾等对色谱行为有重要影响。一、粒径: 粒径是指柱填料的颗粒直径大小。实际上色谱柱上所标的粒径是颗粒粒径的平均值。 一般来说,平均粒径越小,颗粒分布度越小,柱效越高。反之越低。
化学键合相色谱仪C18色谱柱填料对色谱行为的影响
化学键合相色谱仪C18色谱柱填料的粒径、孔径、孔体积、键合反应、含碳量和端基封尾等对色谱行为有重要影响。一、粒径:粒径是指柱填料的颗粒直径大小。实际上色谱柱上所标的粒径是颗粒粒径的平均值。一般来说,平均粒径越小,颗粒分布度越小,柱效越高。反之越低。目前C18柱填料粒径在4~10um之间。二、孔径:孔
化学键合相色谱仪C18色谱柱规格对色谱行为的影响
化学键合相色谱仪C18色谱柱规格包括柱内径和柱长度两方面。一、C18柱的柱内径和柱长度: 1、分析型C18柱:(1)柱内径:2~6mm(2)柱长度:50~300mm 2、制备型C18柱:(1)柱内径:20~80mm(2)柱长度:150~500mm二、柱内径的影响:一般来说,柱内径不影响分离度和分
化学键合相色谱仪C18色谱柱规格对色谱行为的影响
化学键合相色谱仪C18色谱柱规格包括柱内径和柱长度两方面。一、C18柱的柱内径和柱长度: 1、分析型C18柱:(1)柱内径:2~6mm(2)柱长度:50~300mm 2、制备型C18柱:(1)柱内径:20~80mm(2)柱长度:150~500mm二、柱内径的影响: 一般来说,柱内径
柱填料和柱规格对C18色谱柱有哪些影响?
高效液相色谱(HPLC)法选择性高、灵敏度高、分析速度快,而且大部分可以溶解的药物能用该法分析,所以该技术已经成为药物分析的首要选择。以碳十八硅烷化学键合硅胶固定相(C18或ODS)的反相色谱出色地完成了液相色谱分析任务,而且与其他色谱相比,C18反相色谱有明显的优势,它可直接进样分析水溶性样品,因
液相色谱仪色谱柱柱填料
液相色谱柱装填的固定相,其基体材料多为粒度5~10µm或3~5µm的全多孔球形或无定形硅胶。以后又发展了无机氧化物基体(如三氧化二铝、二氧化钛、二氧化皓、三氧化钨)、高分子聚合物基体(如苯乙烯-二乙烯基苯共聚微球,丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯的聚合物微球)和脲醛树脂微球,它们多为3~10µm的全多孔微球
化学键合相色谱仪C18色谱柱的维修
化学键合相色谱仪C18色谱柱的维修包括柱污染再生、柱污染的修复和柱塌陷的修复等。一、柱污染再生:色谱柱污染后,可以用合适的溶剂冲洗,使柱效再生。C18柱常规的再生方法:1、分别用甲醇、甲醇和水各60mL依次通过色谱柱,再用100%甲醇60mL平衡色谱柱后封存,柱效将恢复正常。必要时,根据柱污染性质(
液相色谱仪色谱柱填料选择
色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。而对于液相色谱而言,色谱填料的选择有时候恰恰决定了样品分析效果的好快。今天小编就围绕常见的色谱填料种类,讲解一下,应该如何针对仪器使用环境对色谱填料进行合适的选择。 硅胶填料
色谱柱填料贯流色谱填料
贯流色谱填料贯流色谱是20世纪80年代末至90年代初发展起来的一种色谱分离新方法。在这种填料上,既有通常的微孔或大孔,例如50~150nm的微孔,又有贯穿整个颗粒的,孔径约600~800nm超大孔存在。这种贯穿的大孔,可以允许流动相直接进入填料颗粒的内部并贯穿而过。这样,就相当于极大地降低了填料颗粒
影响液相色谱仪C18柱性能的因素
影响液相色谱仪C18柱性能的因素有硅胶纯度、柱尺寸、颗粒形状、粒径、表面积、孔径、键合类型、碳覆盖率和封端等。一、硅胶纯度:硅胶纯度指填料硅胶的纯度和残留金属离子的浓度。A类硅胶由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属的含量高(硅羟基pKa低),导致碱性化合物发生拖尾。B类硅胶(高纯)由于金属含量低
化学键合相色谱仪C18色谱柱的操作使用与保养
在化学键合相色谱仪分离分析工作中,C18色谱柱的操作使用与保养是否得当,直接影响色谱柱的寿命。一、装卸和更换柱子时,动作要轻,接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动,以免柱床产生空隙。二、用来做常规分析,样品种类有限,但分析次数多时,应为每一类常规分析配置一根专用柱,以延长柱子的寿命。三、使用柱温控
液相色谱仪色谱柱固定相填料的特点
液相色谱仪色谱柱固定相填料有硅胶、多孔聚合物和无机填料等。一、硅胶特点:大多数HPLC色谱柱使用硅胶微粒作载体。1、机械强度高,使柱反压较低。2、表面通过化学改性(修饰),可形成具有不同官能团的键合相。3、更换溶剂时填料大小不会变化。4、在高pH值时会溶解。5、表面呈酸性。6、纯度不高的酸性硅胶(A
色谱柱再生——污染填料后对色谱柱的处理过程
1、故障现象用户反映YWG C18 10μ(4.6mmX150mm)色谱柱使用20天左右后,柱压升高约1Mpa左右,分离效果变差,用蒸馏水清洗色谱柱没有明显改善。色谱柱分离度不好,柱效不高,可能是用户分析发酵液,简单的过滤后进样分析,其中的蛋白质等可能没有去除完全,致使过多的蛋白质沉淀在色谱柱中,加
色谱柱再生——污染填料后对色谱柱的处理过程
1、故障现象 用户反映YWG C18 10μ(4.6mmX150mm)色谱柱使用20天左右后,柱压升高约1Mpa左右,分离效果变差,用蒸馏水清洗色谱柱没有明显改善。 色谱柱分离度不好,柱效不高,可能是用户分析发酵液,简单的过滤后进样分析,其中的蛋白质等可能没有去除完全,致使过多的蛋白质沉淀在色谱柱中
色谱柱填料整体柱
整体柱整体柱又称整体固定相、棒柱、连续床等,是在柱管内原位聚合或固定化了的连续整体多孔结构,可根据需要对整体材料的表面作相应的衍生化,是一种新型的用于分离分析或作为反应器的多孔介质。通过控制聚合条件来得到具有理想孔径分布的整体柱。整体柱中的空间由聚合物颗粒中的孔和颗粒间的缝隙组成,分离在样品流经孔结
色谱柱填料石墨化碳填料
石墨化碳填料硅胶的化学稳定性较差,仅能在pH=2~8的环境下工作。但是,在很多场合下,需要使用极端的pH条件。为此,人们曾大力发展高分子微球、氧化铝、氧化锆等化学稳定性更好的基质材料。但是,很难有一种材料能全面地满足液相色谱基质的要求。例如,高分子微球在有机溶剂中会发生一些溶胀,因此难以应用于以含有
化学键合相色谱仪C18色谱柱选用的基本原则
化学键合相色谱仪C18色谱柱选用的基本原则:一、选用经过烷基化处理封口的填料,可防止碱性化合物的拖尾现象。二、选用含碳量高的C18色谱柱,增加保留值。三、选用小颗粒度的填料。四、选用较短的C18色谱柱,如7.5cm和15cm等。五、对分子量大的组分选用大孔径填料的C18色谱柱。
高效液相色谱仪色谱柱固定相填料的特点
一、硅胶特点: 大多数HPLC色谱柱使用硅胶微粒作载体。 1、机械强度高,使柱反压较低。 2、表面通过化学改性(修饰),可形成具有不同官能团的键合相。 3、更换溶剂时填料大小不会变化。 4、在高pH值时会溶解。 5、表面呈酸性。 6、纯度不高的酸性硅胶(A型硅胶)可分离中性
常用的色谱柱填料
常见的分配柱填料:碳十八柱 (ODS/C18)、碳八柱(MOS/C8)、碳六柱(Hexyl/C6)、碳四柱(Butyl/C4)、碳一柱(Methyl/C1)、阴离子交换柱(SAX)、阳离子交换柱(SCX)、苯基柱(Phenyl)、氨基柱(Amino/NH2)、氰基柱(Cyano/CN/Nitri
高效液相色谱仪色谱柱的填料及正相色谱柱的使用方法
高效液相色谱仪色谱柱的填料: 在填料和流动相之间进行液相色谱柱分离。液相色谱柱的分类取决于填料的类型。 正相柱:硅胶主要用作柱填料。按形状可分为无定形和球形两种,其粒径在3-10um之间另一种正相填料是硅胶表面键合-CN,-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶 反相柱:硅胶表面结合十八
浅析液相色谱仪色谱柱填料的种类与选择原则
在现代高效液相色谱仪分析中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但是色谱填料的选择范围很宽,要做合适的选择,首先必须对此有一定的认识和了解。液相色谱仪填料可以是陶瓷性质的无机物基质,也可以是有机聚合物基质。无机物基质刚性大,在溶剂中不容易膨胀。有机物基质主要是硅胶和氧化铝。液相色谱仪填料中有
C18液相色谱柱色谱柱液相色谱柱
分析型到制备型一套完整的填料体系,目前可提供的填料键合相有C18、C4、C8、SI、NH2、CN、Phenyl、Diol以及手性填料TBB和 DMB。孔径有60A、100A和300A三种,满足不同条件的分析。填料粒径可以提供3.5um、5um、7um、10um、13um和16um六种。可谓品
色谱柱——其他无机填料
其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化。由于其特殊的性质,一般仅限于特殊的用途。如墨化碳也用于正逐渐成为反相色谱填料。这种填料的分离不同与硅胶基质烷基键合相,石墨化碳的表面即是保留的基础,不再需其它的表面改性,该柱填料一般比烷基键合硅胶或多孔聚合物填料的保留能力更强,石墨化碳可用于分离某些几何导构
色谱柱填料颗粒简介
随着药物的不断创新,药物结构越发复杂,开发良好的药物分离方法成为人们面临的巨大挑战。高效液相作为一种有效的检测手段,在药物分析领域得到广泛应用,而色谱柱的选择则成为人们关注的焦点。众所周知色谱柱的键合相和基质颗粒共同影响其选择性,目前使用较为广泛的颗粒类型主要分为两类,全多孔硅胶颗粒和表面多孔硅
色谱柱——硅胶基质填料
1、正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(ZH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性教强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强落的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动
色谱柱及填料介绍
高效液相色谱(HPLC)是一种现代分离、分析方法。20世纪60年代以来,HPLC作为一种分析技术在生命科学、环境科学、药物分析等领域的应用日益普遍。其中色谱填料可谓是色谱技术的核心,它不仅是色谱方法建立的基础,而且是一种重要的消耗品。色谱柱作为色谱填料的载体,当之无愧被称为色谱仪器的“心脏”。高性能
键合相液相色谱仪色谱柱填料的性能指标
键合相液相色谱仪色谱柱填料的性能指标有平均颗粒度及分布、颗粒形状、平均孔径及分布、化学键合相、端基封口、含碳量、硅胶的活性、硅胶的杂质含量、硅胶的pH稳定性和硅胶的热稳定性等。一、平均颗粒度及分布: 颗粒度越小,传质越好,涡流扩散越小,柱效越高,柱压越高。 颗粒分布越宽
键合相液相色谱仪色谱柱填料的性能指标详解
键合相液相色谱仪色谱柱填料的性能指标有平均颗粒度及分布、颗粒形状、平均孔径及分布、化学键合相、端基封口、含碳量、硅胶的活性、硅胶的杂质含量、硅胶的pH稳定性和硅胶的热稳定性等。一、平均颗粒度及分布:颗粒度越小,传质越好,涡流扩散越小,柱效越高,柱压越高。颗粒分布越宽,渗透性差,柱效低。二、颗粒形状:
柱温对液相色谱仪分离度的影响
柱温箱是用在液相色谱仪分析中控制色谱柱的温度保持恒定的一种温控仪器,它可以精确而稳定的控制色谱分析柱的稳定性,有利于提高色谱管柱的灵敏度,改善谱峰的分离度,加快分离速率,缩短分析时间,确保分析结果的准确性和再现性。 对于液相色谱来说,柱温升高可加快分离过程,但因样品保留时间不稳将增加检测工作的
玻璃衬套对色谱行为造成的影响
进样器内的玻璃衬套主要有下列作用:1.提供一个温度均匀的汽化室,防止局部过热。2.玻璃的惰性不如不锈钢好,减少了在汽化期间样品分解的可能性。3.易于拆换清洗 ,以保持清洁的汽化室表面,一些痕量非挥发性组分会逐渐积累残存于汽化室,高温下会慢慢分解,使基流增加,噪声增大,通过清洗玻璃衬套可以消除这种影响