生物大分子的分离纯化技术概述
生物大分子是指蛋白质（包括酶）、多聚糖和核酸类化合物，分子量从几千到几百万，广泛存在于各种生物体内，与各种生命活动息息相关。生物大分子具有十分重要的生理功能和应用价值，研究生物大分子的结构、功能和应用已成为生命科学的一个关键问题。不论是从动植物和微生物体内提取的生物大分子产品，还是用生物工程制备的生物大分子产品，都是组成十分复杂的混合物，在使用前都要分离和纯化。1、生物大分子分离纯化的特殊性：（1）要求产品保持其生物活性。（2）多孔填料必须使用大孔径基质。（3）生物大分子的色谱特性不同于有机小分子。2、生物大分子分离纯化技术：（1）双水相萃取。（2）离心机分离。（3）膜分离。（4）盐析法。（5）电泳法。（6）色谱法。......阅读全文
生物大分子的离心分离实验（二）
例（3）用CsCl 梯度分离DNA 并测定其组成（% G+C）（i）CsCl 溶液密度D 与溶液中CsCl 的重量百分比浓度P 之间的关系： D=138.11/（137.48-P）（ii） 制备初密度为1.706 克/毫升的梯度液，应按以下要求配置·4.85 克CsCl （分析纯）·50μl ，1.
生物大分子的离心分离实验（三）
例（6）用Cs2SO4 及尿素作梯度材料分离生物大分子样品：初步离心后的蛋白-核酸混合液梯度液：3.00g Cs2SO4 2.5ml 8M 尿素（经过混合床去离子处理的）50μl 1.0M Tris-HCl（PH7.4）25μl 0.2M EDTA（PH7.4）1.25ml 样品的水溶液以上各项充分
生物大分子的离心分离实验（一）
一、引言在八十年代以前，生物大分子（特别是核酸、蛋白）用离心方法分离纯化占有很重要的地位。用分析超离心方法测定生物大分子的分子量、沉降系数、扩散系数、微分比容等在生物化学实验中也占有一席之地。八十年代以后，由于离心技术的快速发展（微处理器的引入，变频驱动的完善、转速的提高等等），先进的制备用超速离心
土壤的稀释分离、纯化微生物及无菌操作技术
一、目的和内容 目的：学习从土壤中别离微生物的办法,学习无菌操作技术. 内容： 1．用稀释法别离细菌、放线菌和霉菌. 2．用平板划线办法别离微生物. 3．学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作技术. 二、资料和用具 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus
土壤的稀释分离、纯化微生物及无菌操作技术
一、目的和内容目的：学习从土壤中分离微生物的方法,学习无菌操作技术.内容：1．用稀释法分离细菌、放线菌和霉菌.2．用平板划线方法分离微生物.3．学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作技术. 二、材料和用具金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和普通变形菌(Proteus vulgar
土壤的稀释分离、纯化微生物及无菌操作技术
一、目的和内容 目的：学习从土壤中分离微生物的方法,学习无菌操作技术. 内容： 1．用稀释法分离细菌、放线菌和霉菌. 2．用平板划线方法分离微生物. 3．学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作技术. 二、材料和用具 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和普
DNA提取纯化技术概述
质粒DNA的提取与纯化质粒是一类双链、闭环的DNA，大小范围从1 kb至200 kb以上不等。通常情况下，质粒可持续稳定地处于染色体外的游离状态，具有自主复制功能；但在一定条件下也会可逆地整合到宿主染色体上，随着染色体的复制而复制，并通过细胞分裂传递到后代。 质粒已成为核酸克隆和测序最常用的载体。质
接种、分离纯化和培养技术
一、接种 将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种.1、接种工具和方法 在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针.由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分.有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种.在固体培
接种、分离纯化和培养技术
一、接种 将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。１、接种工具和方法 在实验室或工厂实践中，用得最多的接种工具是接种环、接种针。由于接种要求或方法的不同，接种针的针尖部常做成不同的形状，有刀形、耙形等之分。有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种。在固体培养基表面
核酸分离纯化实验技术指南
核酸分离纯化实验技术指南： 总RNA提取常见问题分析 RNA降解 1. 新鲜细胞：如果试剂没有问题，且外源性污染也可以排除，那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如 果将裂解液直接加入培养皿中裂解细胞，一定要使裂解液能覆盖住细胞。 2. 新鲜组织：某些富含
接种、分离纯化和培养技术
一、接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种.1、接种工具和方法在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针.由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分.有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种.在固体培养基表面要将菌液
微生物的分离和纯化实验
在土壤、水、空气或人及动、植物体中，不同种类的微生物绝大多数都是混杂生活在一起，（1）用于细胞分离（2）细胞纯化（3）细胞增殖培养。实验方法原理为了获得某种微生物的纯培养，一般是根据该微生物对营养、酸碱度、氧等条件要求不同，而供给它适宜的培养条件，或加入某种抑制剂造成只利于此菌生长，而抑制其他菌生长
微生物的分离和纯化实验
实验方法原理 为了获得某种微生物的纯培养，一般是根据该微生物对营养、酸碱度、氧等条件要求不同，而供给它适宜的培养条件，或加入某种抑制剂造成只利于此菌生长，而抑制其他菌生长的环境，从而淘汰其他一些不需要的微生物，再用稀释涂布平板法或稀释混合平板法或平板划线分离法等分离、纯化该微生物，直至得到纯菌株。土
生物碱类分离纯化技巧总结
生物碱是天然中药材中分量很重的一类活性成分，多具有显著而特殊的生理活性，在消炎、镇痛、降血压、抗癌等发面表现出越来越重要的药用价值。传统生物碱的分离方法主要有：浸渍、煎煮、溶剂回流、渗漉等，以及新开发的超临界流体萃取技术，微波辅助提取技术，超声辅助提取技术，双水相萃取技术等。上海樊克生物有限公司对生
使用高速离心机分离生物大分子
生物大分子包括核酸、蛋白质和多糖等。它们是一切生物机体形态结构和功能发挥zui重要的物质基础，其分子量巨大、分子结构复杂，分子中包含有生命活动的基本信息。近年来分子生物学研究的理论和实践飞速发展。特别是功能基因组学和蛋白质组学的研究在揭示生命现象本质中发挥着空前的积极作用。
使用高速离心机分离生物大分子
生物大分子包括核酸、蛋白质和多糖等。它们是一切生物机体形态结构和功能发挥zui重要的物质基础，其分子量巨大、分子结构复杂，分子中包含有生命活动的基本信息。近年来分子生物学研究的理论和实践飞速发展。特别是功能基因组学和蛋白质组学的研究在揭示生命现象本质中发挥着的积极作用。
落地式大容量垂直转子离心机分离生物大分子概述
对于相对分子量很大的生物大分子，使用落地式大容量垂直转子离心机分离非常有效。在垂直转子中，加在梯度上的样品由于重定向作用，面积变得很大，样品初始区带很窄，比用水平转子加样量大10～20倍。生物大分子的沉降距离是离心管直径，不是离心管长度，并且离心管插在转子边缘，最小半径处的离心力比水平转子和角转子
落地式大容量垂直转子离心机分离生物大分子概述
对于相对分子量很大的生物大分子，使用落地式大容量垂直转子离心机分离非常有效。在垂直转子中，加在梯度上的样品由于重定向作用，面积变得很大，样品初始区带很窄，比用水平转子加样量大10～20倍。生物大分子的沉降距离是离心管直径，不是离心管长度，并且离心管插在转子边缘，zui小半径处的离心力比
接种、分离纯化和培养技术（二）
二、分离纯化 含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物（Mixed culture）。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞，那么这个菌落称为纯培养（Pure culture）。在进行菌种鉴定时，所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化，方法有许多种。１、倾注平板法
接种、分离纯化和培养技术（一）
一、接种 将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。１、接种工具和方法 在实验室或工厂实践中，用得最多的接种工具是接种环、接种针。由于接种要求或方法的不同，接种针的针尖部常做成不同的形状，有刀形、耙形等之分。有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种。在固体培养基表面
蛋白质分离纯化常用技术
1、沉淀，2、电泳：蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的，在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同，有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析：利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。4、层析：利用蛋白质在固定相与流动相之间不同的分配比例，达到分离目的的技术。a.离子交换层析，利用蛋白
蛋白质分离纯化技术详解
沉淀法沉淀法也称溶解度法。其纯化生命大分子物质的基本原理是根据各种物质的结构差异性来改变溶液的某些性质，进而导致有效成分的溶解度发生变化。1、盐析法盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中，溶解度会随盐浓度的增高而上升，但当盐浓度增高到一定数值时，使水活度降低，进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和，水化膜逐
土壤微生物的分离与纯化
实验概要本实验介绍了土壤微生物分离与纯化的实验原理和方法。了解血球计数板的构造、计数原理和计数方法，掌握显微镜下直接计数的技能。实验原理测定微生物细胞数量的方法很多，通常采用的有显微直接计数法和平板计数法。显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液，如有杂菌或杂质，常不易分辨。菌体较大的酵母菌或
微生物分离纯化实验——平板划线分离法
实验方法原理该方法操作简便，普通用于微生物的分离与纯化。其基本原理包括两方面：1. 选择适合于待分离微生物的生长条件，如营养、酸碱度、湿度和氧等要求或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制其他微生物生长的环境，从面淘汰一些不需要的微生物。2. 微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个
土壤中微生物分离纯化培养
一、实验目的掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物 的基本操作技术；了解不同的微生物菌落在斜面上、半固体培养基和液体培养基中的生长特征；进一步熟练和掌握微生物无菌操作技术；掌握微生物培养方法。 二、实验原理：从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用的
土壤中微生物分离纯化培养
一、实验原理从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用的分离、纯化方法：单细胞挑取法，稀释涂布平板法，稀释混合平板法，平板划线法。稀释涂布平板法步骤：倒平板－制备土壤污水稀释液－涂布－培养－挑菌落。平板划线法步骤：倒平板－标记培养基名称－划线。二、试剂与器材
膜分离技术系统应用澄清纯化技术
超/微滤膜系统 澄清纯化分离所采用的膜主要是超/微滤膜，由于其所能截留的物质直径大小分布范围广，被广泛应用于固液分离、大小分子物质的分离、脱除色素、产品提纯、油水分离等工艺过程中。 超/微滤膜分离可取代传统工艺中的自然沉降、板框过滤、真空转鼓、离心机分离、溶媒萃取、树脂提纯、活性炭脱色等工艺
层析纯化病毒、病毒样颗粒等生物大分子的瓶颈问题
层析纯化病毒、病毒样颗粒等生物大分子的瓶颈问题随着病毒、病毒样颗粒在疫苗、肿瘤治疗、免疫治疗中的地位越来越重要，这类复杂生物大分子的分离纯化需求也逐渐增加。然而传统填料由于孔径较小，蛋白质只能以扩散方式通过填料，传质速率慢，处理量低，造成分离时间长、容易失活等问题[1]。当蛋白质体积较大时，填料表面
膜分离技术的应用概述
膜技术是一项新型的高新分离技术．自上世纪五十年代以来，微滤膜、离子交换膜、反渗透膜、超滤膜、气体膜分离等相继得到广泛应用．成为世界各国研究的热点．已被国际公认为本世纪最有发展前途的重大高新生产技术之一，有操作方便、设备紧凑、工作环境安全、节约能源和化学试剂等优点，目前已被广泛应用于食品、医药、
分子印迹分离技术概述
分子印迹分离技术是指获得在空间结构和结合位点上与某一分子（印迹分子）完全匹配的聚合物的过程。1、分子印迹分离技术的原理：当印迹分子与聚合物单体接触时会形成多重结合位点，通过聚合过程这种作用被记忆下来，当除去印迹分子后，聚合物中形成了与印迹分子空间结构完全匹配的具有多重结合位点的空穴，这样的空穴将对印