细胞培养基础问答
细胞培养实验中用量最多的就是细胞培养基,虽然细胞培养试验基本技术大同小异,但是每种细胞的培养条件却相差甚远。若偏离某种细胞所需的培养条件,则会导致细胞表达不同的表型因此,在实验前,需要熟悉自己所使用的细胞系,并在实验中严格遵守所有产品的操作说明。 在实验过程中,作为实验小白,我们应该如何应对相关问题呢?来,大家看黑板啦~ 首先,我们要如何挑选适合自己细胞生长的培养基呢?选择培养基没有确切的标准,有几点建议可供参考:建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞适合的培养基。可以查阅 ATCC 或在购买细胞株时咨询供应商。根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640。其他实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。也可用多种培养基培养细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验室结果选择最佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。如何正确地保存培......阅读全文
肿瘤细胞培养
肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置,首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。一、组织培养肿瘤细胞生物学特性肿瘤细胞与体内正
细胞培养用水
在组织或细胞培养过程的许多步骤中都使用水。它是缓冲液和介质的主要成分,用于溶解添加剂和药物,以及冲洗生物反应器,塑料制品和玻璃制品。因此,水质可能在细胞培养实验结果中起重要作用。细菌,酵母或霉菌对细胞培养物的污染一直是一个令人担忧的问题,科学家竭尽全力避免它们。这些污染通常是肉眼或通过光学显微镜可见
细胞培养技巧
细胞复苏 细胞复苏和冻存讲究“慢冻快溶”,复苏时一定要将冻存在液氮或-80℃中凝固的细胞冻存液快速融化至37℃,使胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复苏准备●打开水浴锅加热至37℃。● 超净台上放好离心管(一般15ml的),细胞培养瓶,移液
巨噬细胞培养
巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。巨噬细胞也建有无限细胞系,大多来自小鼠,如P331、S774A.1、RAW309Cr.l等,均获
细胞培养的概念及细胞培养的技术特点
细胞培养(cell culture)是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术来说,细胞培养都是一个必不可少的
特殊细胞培养实验_微载体细胞培养法
实验方法原理微载体细胞培养开始于60年代末期,最早使用离子交换凝胶作为载体,轻微搅动即可悬液在培养基中,因而可增加细胞附着的面积,达到大量培养细胞的目的。后来,根据细胞附着生长的特点,对微载体进行了改良,使其带有电荷或其它介质,更利于细胞附着和生长。这一方法亦可用于常规量的培养,也可用于大规模的培养
细胞培养之如何将细胞培养的更漂亮?
细胞培养之如何将细胞培养的更漂亮? 1、收到细胞,先要镜检:观察细胞形态是否正常,对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好,观察细胞密度,有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化,很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样,主要是贴壁牢
细胞培养细胞培养的操作步骤及注意事项
一、细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移入15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10ml DMEM培养基清洗,弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5
细胞培养之如何将细胞培养的更漂亮?
细胞培养之如何将细胞培养的更漂亮? 1、收到细胞,先要镜检:观察细胞形态是否正常,对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好,观察细胞密度,有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化,很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样,主要是贴壁牢固问题。比如2
细胞培养基本概念和细胞培养的环境
一、细胞培养基本概念细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使期生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。 细胞培养 的培养物为单个细胞或细胞群。在医学遗传学研究中应用最广泛的是外周血淋巴细胞、皮肤或纤维细胞和各种能在体外长期生长的细胞系。外周血淋
细胞培养实验中细胞培养液的相关介绍
现代生物技术均通过细胞作为载体来进行,无论是基因治疗、干细胞、克隆技术都在细胞内进行的。细胞的生长需要一定的营养环境,用于维持细胞生长的营养基质称为培养基,即指所有用于各种目的的体外培养、保存细胞用的物质,就其本意上讲为人工模拟体内生长的营养环境,使细胞在此环境中有生长和繁殖的能力。它是提供细胞
结缔组织类细胞培养实验——巨噬细胞培养实验
实验方法原理巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。但属不繁殖型细胞群,难以长期生存,好的条件下仅能生活2~3 周,因之多用作初代培养。巨噬细胞也能建成无限细胞系;大多来自小鼠,如P388D-1、J774A.1、RAW
细胞培养中支原体污染对细胞培养的危害
1. 支原体污染的普遍性支原体污染是细胞培养领域遇到的性问题,据文献报道,综合美国食品药品监督管理局(FDA)、美国模式菌种收集中心(ATCC)等机构收到的相关数据,世界各国细胞系支原体污染的平均比例为30-60%。该数据未统计中国大陆的数据,但可以确定,大陆地区的支原体污染比例与此相当,或更严
常规细胞培养方法
原理 1 将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。 仪器、材料及试剂 仪器:培养箱(调整至37℃),培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱
上皮细胞培养
1、取材:外科植皮或手术残余皮肤小块,早产流产儿皮肤更好,取角化层薄者,切成0.5-1平方厘米小块。2、置0.02%EDTA中,室温,5分钟。3、换入0.25%胰蛋白酶中,4℃过夜。4、分离:取出皮块,用血管钳或镊子将表皮与真皮层分开。5、取出表皮,剪成更小的块后,置0.25%胰酶中,37℃,30—
细胞培养常规操作
常规操作(主要内容如下)· Aseptic Technique· Culture Vessels· Cell Counting· Primary Culture· Maintenance of Cell Line ·
特殊细胞培养实验
一、二倍体细胞培养法 加支持物培养法 单细胞分离培养法 多孔塑料培养板单细胞克隆法 球体细胞培养实验 微载体细胞培养法 悬浮培养法
肿瘤细胞培养实验
肿瘤细胞培养实验可用于:(1)研究肿瘤的发生机理;(2)研究生物学行为;(3)研究抗肿瘤药物。实验方法原理肿瘤组织及细胞在模拟体内生长环境的条件下、与一般组织细胞一样、也能够生长发育乃至繁殖、为研究癌变机理、抗癌药检测、肿瘤分子生物学提供大量的实验材料。实验材料肿瘤组织试剂、试剂盒培养液Hanks胰
动物、植物细胞培养
动物细胞培养与植物细胞培养和微生物细胞细胞培养相比,动物细胞培养是当中最麻烦的。它需要一些特殊的条件:⑴血清:动物细动物细胞离体培养需要要到血清,通常使用小牛血清。血清相当于动物细胞离体培养的天然营养液,为动物细胞培养提供像矿物质微量元素、脂肪和激素的生长必需因子。⑵支持物:很多动物细胞有贴壁生长的
羊水细胞培养简介
羊水细胞培养是在超声引导下经腹羊膜腔穿刺抽取羊水后,取出羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞进行培养,抽取其中细胞分析胎儿染色体核型的检查。 正常值 正常男性的染色体核型为44条常染色体加2条性染色体X和Y,检查报告中常用46,XY来表示。正常女性的常染色体与男性相同,性染色体为2条XX,常用46,
细胞培养大攻略
一、细胞培养基础和步骤细胞培养基大全细胞原代培养步骤细胞传代培养步骤二、细胞培养常见问答1、加到培养基中的血清 必须灭活吗?答:不是必须的,看做什么实验了。2、四季青胎牛血清灭活是56 ℃30分钟吗?答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子 。但是如
细胞培养技术4
贴壁因子使用方法:①选择适宜的贴壁因子。②将贴壁因子贮存液用三蒸水或PBS液或D-Hanks液稀释成0.1毫克/毫升的工作液。③滤过除菌的工作液按50微升/平方厘米涂布培养器皿的细胞生长面。④室温静置5分钟(胶原基质延长24小时)。⑤除去多余溶液。⑥涂布面用灭菌三蒸水洗涤后,再经细胞培养基浸泡过渡,
传代细胞培养实验
实验方法原理 当初代培养成功,细胞生长增殖形成单层细胞后,进而扩展汇合,占满一切空间,此时需要进行分离培养。这一操作称传代或再培养。如拖延传代,细胞会因增殖过度,培养基营养枯竭和代谢产物积累而发生中毒。80%汇合或刚汇合细胞是理想传代阶段。实验材料 细胞试剂、试剂盒 Hanks胰蛋白酶EDTA培养液
细胞培养的步骤
细胞培养的步骤:1、细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。将融化的细胞移入离心管中,加入37℃预热的DMEM完全培养基中(其中胎牛血清约为10%),轻轻吹匀,离心,500g离心2min,弃上清液。加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。加入DMEM完全培养基,轻轻吹打混
肿瘤细胞培养实验
肿瘤细胞培养实验 提高肿瘤细胞培养存活率和生长率的实验 实验方法原理 肿瘤组织及细胞在模拟体内生长环境的条件下、与一般组织细胞一样、也能够生长发育乃
细胞培养的概念
细胞培养是细胞在受控条件下(通常在其自然环境之外)生长的过程。感兴趣的细胞已被后从活组织中分离出来,他们随后可以严格控制的条件下维持。这些条件因每种细胞类型而异,但通常由合适的容器组成,该容器带有底物或培养基,可提供必需的营养素(氨基酸、碳水化合物、维生素、矿物质)、生长因子、激素和气体,并调节理化
羊水细胞培养实验
实验方法原理 羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞,可在体外培养用以检验胎儿核型。 试剂、试剂盒 碘酒 酒精 营养液
细胞培养技术2
◇湿热消毒的注意事项①不可用安全阀摘子排气。②消毒的过程中若出现漏气现象,可调节消毒器盖内的胶垫的位置。③灭菌完毕,不要急于取出消毒品,可利用消毒器的余热去除物品部分湿气,待半小时左右再移入干燥箱烘干。2.干热消毒 这种消毒方法主要用于玻璃器皿消毒,一般温度在160℃维持90—120分钟就可以杀死
动物细胞培养
动物细胞培养 基本练习 2.2 无菌技术I:吸取与移液 练习2 细胞培养介绍 2.2 无菌技术I:吸取与移液 练习3无菌技术II:准备培养基 练习4:单层细胞的换液 练习5:玻璃器皿的清洗和灭菌 练习
ATCC细胞培养方法
基本原理 通过在支持物(如盖玻片)上培养贴壁细胞,可以应用抗体检测细胞表面抗原的表达或进行酶细胞化学以及免疫细胞化学检测。该方法的优点是细胞贴壁牢固,能够维持细胞生长时的状态。 试剂和设备 细胞悬浮液; 6孔平底组织培养板,或φ60 mm培养皿; 18mm x 18mm 或20mm x 20mm浸于