基于温度梯度模型的HPLC分析
在近年来所开发的一系列液相色谱方法中，温度梯度淋洗方法有着独特的应用，尤其是在要求以纯水为流动相的色谱分析中。本文介绍了如何将已存在保留时间的模型发展成为温度梯度淋洗的HPLC方法。 在高效液相色谱（HPLC）的方法开发中，原则上都是采用反复试验法来建立的，实验室用户根据自己的经验来改变一些参数以解决其色谱分离的问题，但是这一过程耗费大量时间和财力。HPLC梯度淋洗的原理已于1980年为Synder所提出，为此方法的开发利用了商业化的软件程序例如Drylab 程序系统。借助这种软件，可以将溶质的保留行为对各种色谱参数的依赖关系建立模型，通常是对梯度作用时间tG、温度T，或者溶剂强度B的百分含量以及流动相的pH值同时进行优化。由能源和环境研究所与应用色谱Mornal研究所共同合作的项目，旨在将Synder提出的模型作进一步的发展。近年来，温度参数在液相色谱中正显得越来越重要，尤其是一系列要求用纯水作为流动相的分析......阅读全文
HPLC简介
目录1 高效液相色谱法的定义2 对仪器的一般要求和色谱条件2.1 色谱柱2.2 检测器2.3 流动相3 系统适用性试验3.1 色谱柱的理论板数（n）3.2 分离度（R）3.3 重复性3.4 拖尾因子（T）4 测定法4.1 内标法4.2 外标法4.3 加校正因子的主成分自身对照法4.4 不加校正因子的
HPLC应用
一、样品测定1．流动相比例调整：由于我国药品标准中没有规定柱的长度及填料的粒度，因此每次新开检新品种时几乎都须调整流动相（按经验，主峰一般应调至保留时间为6~15分钟为宜）。所以建议第一次检验时请少配流动相，以免浪费。弱电解质的流动相其重现性更不容易达到，请注意充分平衡柱。2．样品配制：①溶剂；②容
影响液相色谱仪（HPLC）分析结果的因素
.颗粒颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并且熔化它，这会导致回压增大。颗粒还会表现为另一种固相，可能改变样品的组分。2.有机物超纯水中的有机物可能影响色谱峰的分离度和积分、可能导致鬼峰、还可能改变固定相的选测性以及影响色谱基线。3.离子离子浓度的改变会影响分离结果，部分能吸收UV的离子会对
HPLC柱在多功能毒品分析中的应用
在欧美许多国家，毒品肆虐，并日益侵蚀青少年群体。值得忧虑的是，世界上有许多人至今对毒品的危害还缺乏足够的认识。 现代分析技术应用于毒品检验，为毒品案件的查缉和制贩毒人员的定罪、量刑提供了重要的刑事科学依据。毒品检验方法有免疫分析法、气相色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、联用分析技术等等。其中
实验分析方法HPLC分离常用固定相基质介绍
1.硅胶微粒硅胶及键合硅胶是开发最早、研究深入、应用广泛的HPLC固定相。未改性硅胶表面学性质随制备和处理条件不同而変化。如图2所示，水合硅胶的表面一般存在三种类型的硅羟基，热处理温度高于800℃时，硅胶表面的硅羟基（—SiOH）表层大部分不再存在，在HPLC中已无使用价值。用于进行键合反应制备改性
实验分析方法HPLC分离固定相基质的形态
目前HPLC分析中常用的几种形态的固定相如图1所示，主要包括全多孔微球、薄売型微球、灌流色谱固定相和整体材料，其中由于全多孔微球固定相具有能够很好地兼顾柱效、样品容量、使用寿命等众多理想的性质，应用最为普遍。图1 HPLC的微粒类型（a）全多孔微球；（b）薄壳型微球；（c）灌流色谱固定相；（d）整体
实验分析方法HPLC分离固定相基质的特征
由于HPLC分离过程涉及物理化学作用、流体动力カ学、热力学过程等，因而对固定相基质材料的物理化学性质有比较严格的要求。液相色谱固定相基质可分为无机氧化物、有机聚合物和无机有机杂化材料三种类型。杂化基质作为一类新型液相色谱固定相基质，近两年发展较快，但大多尚处于研究阶段。无机和有机两类基质的主要特征比
实验分析方法HPLC分离固定相基质的特征
由于HPLC分离过程涉及物理化学作用、流体动力カ学、热力学过程等，因而对固定相基质材料的物理化学性质有比较严格的要求。液相色谱固定相基质可分为无机氧化物、有机聚合物和无机有机杂化材料三种类型。杂化基质作为一类新型液相色谱固定相基质，近两年发展较快，但大多尚处于研究阶段。无机和有机两类基质的主要特征比
高效液相色谱法HPLC实验结果的分析
高效液相色谱和气相色谱法（包括测定方法和计算方法）的定性和定量分析是相同的。定性分析采用纯物质控制的色谱鉴别方法，非色谱鉴别方法结合化学分析或其他仪器分析方法采集组分；定量分析采用峰高或峰面积内标法、外标法或归一化法进行定量，并与计算机结合作为现代分析方法对。定性分析色谱方法的定性分析的目的是确定每
用于HPLC分析的超纯水——超纯水之角色
糖分析是HPLC的典型应用之一,它广泛的应用在许多测试中用以确定膜的性能，一方面可以通过糖分析来确定膜去除糖分子的能力，另一方面也可检测膜固定化酶的活性。在分析中，目前通常采用薄层色谱法（TLC）、气体色谱法（GC）以及液相色谱法（HPLC）进行糖分析。尤其是当混合物中包含几种必须要分离
HPLC基线不稳，上下波动或漂移的原因分析
a.流动相有溶解气体；用超声波脱气15-30分钟或用充氦气脱气b.单向阀堵塞；取下单向阀，用超声波在纯水中超20分钟左右，去处堵塞物c.泵密封损坏，造成压力波动；更换泵密封d.系统存在漏液点；确定漏液位置并维修f.柱后产生气泡；流通池出液口加负压调整器g.检测器没有设定在最大吸收波长处；将波长调整至
HPLC柱在多功能毒品分析中的应用
在欧美许多国家，毒品肆虐，并日益侵蚀青少年群体。值得忧虑的是，世界上有许多人至今对毒品的危害还缺乏足够的认识。现代分析技术应用于毒品检验，为毒品案件的查缉和制贩毒人员的定罪、量刑提供了重要的刑事科学依据。毒品检验方法有免疫分析法、气相色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、联用分析技术等等。其中高效液
HPLC分析时，如果管柱有气泡会对分析结果有什么影响
1、出现鬼峰。大量的气泡进入，会造成基线高频率毛刺。2、降低色谱柱柱效，影响色谱柱寿命。3、影响基线平衡。4、事实上少量的气泡对系统影响非常非常的小。
HPLC系统概述
HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等，现代HPLC仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还备有自动馏分收集装置。最早的
维他命HPLC剖析
维他命做为关键的食品类或是饲料原料，在国家标准或是各种各样制造行业、产品标准常有涉及含水量的检验。文中共享一下对于某些维他命剖析的检验的实例： 一、食品类中维他命、的测量 第一：食品类中维他命A和维他命E的测量 反相液相色谱法 国家标准连用的是C30柱，水/乙醇的流动性相管理体
HPLC用水来源
HPLC用水可以通过以下几个方面来得到：1 专门的纯水机或超纯水机；2 去离子水重蒸；3 二次或三次重蒸水；4 采用类似家用的纯水机；5 市场上瓶装的纯净水或蒸馏水；6 其它途径不管采用何种途径，配制流动相应用新鲜水，水质越高放置时间越短。理想的HPLC用水应为18.2Ω的超纯水，并通过0.22um
HPLC的应用
一、样品测定 1．流动相比例调整：由于我国药品标准中没有规定柱的长度及填料的粒度，因此每次新开检新品种时几乎都须调整流动相（按经验，主峰一般应调至保留时间为6~15分钟为宜）。所以建议第一次检验时请少配流动相，以免浪费。弱电解质的流动相其重现性更不容易达到，请注意充分平衡柱。 2．样
安捷伦HPLC维护
一、如何处理 HPLC 中的盐带来的问题？ 很多问题是由于流动相含有盐成分造成的。建议在清洗时将水加热后再冲洗，这样既可以将盐溶解的更好，也可以溶解一些脂溶性物质，会减少很多问题的发生,包括管路堵塞,盐析出，基线噪音…… 二、安捷伦1100及1200液相泵的日常维护 泵是
HPLC压力持续偏低原因分析及解决方法
1、流速设定过低。解决方法：将流速适当调高。2、系统漏液。解决方法：检查色谱柱接口、泵等位置，确定漏液位置并维修。3、色谱柱选择不当。解决方法：更换合适的色谱柱。
做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在
1． 泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理；2． 比例阀失效，更换比例阀即可；3． 泵密封垫损坏，更换密封垫即可；4． 溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法；5． 系统检漏，找出漏点，密封即可；6． 梯度洗脱，这时压力波动是正常的。
HPLC压力波动较大原因分析及解决方法
1、管道中有气体，流动相脱气不充分。解决方法：流动相继续脱气或改变脱气方法（如在线脱气等）。2、单向阀、泵密封损坏。解决方法：更换单向阀和泵。3、流动相粘度变化引起压力波动。解决方法：改用溶剂梯度洗脱。
HPLC分析样品时出现倒峰是怎么回事
最主要是和你的样品有关，再者就是和你的流动相有关。比如说样品溶剂用的不是乙腈，有时出再这样的问题，再者是你的流动相和你的样品本身问题，有一些盐类也经常这样我们遇到这样的问题多是更换一下溶剂，不行再调整流动相，还不行就把波长调高就可以了，这在做HPLC时也很正常。
HPLC－柱验收测试时柱压过高原因分析
柱压过高是 HPLC 柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因。 拆去保护柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查； 把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查。 将柱子的进出口反过来接在
HPLC柱验收测试时柱压过高原因分析
柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因： ①拆去保护预柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查; ②把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查; ③将柱子的
超纯水对高效液相（HPLC）分析结果的影响
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）是一种有效可靠的技术，目前已成为许多实验室研究的重要工具。HPLC最常见的一个问题就是溶剂中的污染物对分析结果的影响。颗粒物可以损坏柱塞杆和密封圈以及进样阀。颗粒物也能堵塞色谱柱并且熔化它，这
HPLC分析时峰面积差别很大的原因及解决
液相色谱分析中进样基线很好，保留时间能锁定，压力也稳定，但是峰面积差别很大，大概有2倍的差别，这种情况出现的原因可能是多方面的，建议采用以下方法解决： 1 调换一根新色谱柱，如果情况一样，则排除柱子的原因。 2 将在线过滤器拆下，用超声波清洗，如果结果一样，说明与在线过滤器无关。 3 考虑是不
与HPLC相比，用TOC分析进行清洁验证的优势
科技的发展和生产成本的提高促使全球制药工业开始衡量提高效率和产量的其他途径。在这个竞争激烈的行业中，至关重要的事务是降低过高的成本，消除那些不必要且冗长的验证工作，同时最大限度地确保药品的质量。在过去七年里，将总有机碳分析这种非特异方法用于清洁验证的做法受到了越来越多的关注，因为事实证明，高效液相色
用HPLC进行分析时保留时间发生漂移如何解决？
用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在?如何解决? 关于漂移问题： ①温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定; ②流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等; ③柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡;
蛋白质和多肽反相HPLC分析和纯化指南（七）
在氧化环境条件下，尽管蛋白质的几个氨基酸都可能受影响，但最有可能被氧化的氨基酸是甲硫氨酸；甲硫氨酸可被氧化成甲硫氨酸亚砜（图34）。对甲硫氨酸残基的氧化取决于其在蛋白质中的位置。埋藏在蛋白质内部的甲硫氨酸不可能被氧化。接近表面且与溶剂接触的甲硫氨酸侧链最有可能被氧化。氧化条件包括热、过渡金属的存在以
蛋白质和多肽反相HPLC分析和纯化指南（十一）
HPLC-MS 联用的两个重要因素是电喷射接口的最佳流速及三氟乙酸对肽电离的影响 基本电喷雾接口的信号在5~10μL/min的流速区间上迅速下降（图28）。这与采用标准分析型HPLC柱的流速不相容。目前，商用电喷雾提供一种高剪切流氮气辅助的电喷雾（气流辅助电喷雾），它将电喷雾的最佳流速区间提升到了2