基于温度梯度模型的HPLC分析
在近年来所开发的一系列液相色谱方法中，温度梯度淋洗方法有着独特的应用，尤其是在要求以纯水为流动相的色谱分析中。本文介绍了如何将已存在保留时间的模型发展成为温度梯度淋洗的HPLC方法。 在高效液相色谱（HPLC）的方法开发中，原则上都是采用反复试验法来建立的，实验室用户根据自己的经验来改变一些参数以解决其色谱分离的问题，但是这一过程耗费大量时间和财力。HPLC梯度淋洗的原理已于1980年为Synder所提出，为此方法的开发利用了商业化的软件程序例如Drylab 程序系统。借助这种软件，可以将溶质的保留行为对各种色谱参数的依赖关系建立模型，通常是对梯度作用时间tG、温度T，或者溶剂强度B的百分含量以及流动相的pH值同时进行优化。由能源和环境研究所与应用色谱Mornal研究所共同合作的项目，旨在将Synder提出的模型作进一步的发展。近年来，温度参数在液相色谱中正显得越来越重要，尤其是一系列要求用纯水作为流动相的分析......阅读全文
分析HPLC如何放大到制备型HPLC？
在分析液相中色谱柱的典型进样量是微克级，甚至更低。样品量和固定相之比有的甚至小于1:10000。进样体积一般来说都大大小于色谱柱体积（小于1:100）。 在这种条件下，会达到很好的分离效果，峰形尖锐并且很对称。分析系统线形放大到制备型HPLC意味着使用直径更大的制备柱、更高的流速和根据色谱柱的长度增
水质对－HPLC－分析的影响
简介： 优化的高效液相色谱法分析需要高纯度溶剂和试剂。同时，在流动相准备阶段，色谱柱中盐和有机溶剂的选择十分谨慎，所以水质是非常重要的。在洗脱液中，中痕量有机物的存在可能会导致长期不好的结果。随着时间推移，柱效可能会阻塞，导致分辨率降低，峰拖尾。大量实验表明，水中的有机物可能极大地影响液相色谱
HPLC造成峰分叉的原因分析
保护柱或分析柱污染；取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞，拆下来清洗。如果问题仍然存在，可能是柱子被强保留物质污染，运用适当的再生措施。如果问题仍然存在，入口可能被阻塞，更换筛板或更换色谱柱。样品溶剂不溶于流动相；改变样品溶剂，如果可能采取流动相作为样品溶剂。
用HPLC分析与纯化的区别
用于分析的就是普通的高效液相色谱仪，主要的配置就是根据不同需要选择的泵（包括三元的、二元的、四元的等），柱温箱，检测器，进样器（自动的，手动的），可选的包括脱气机和控温装置。用于纯化的叫做制备液相，原理和普通的液相相似，不过他的泵叫做制备泵，他比普通液相多了几个模块，制备池、馏分收集器。高通量收集软
HPLC保留时间漂移现象原因分析
1、温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定2、流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等3、柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡
减少HPLC分析中的纯水干扰
图1. 图4.带空心过滤器的 Barnstead-Nanopure-UV 试剂级纯水机与某一类似纯水机所得基线的比较（经用8升水预冲洗）。无论是质谱分析、气相色谱还是高效液相色谱，几乎没有一种分析方法可以不用纯水能够进行的。本文讨论了以下几个问题：水的纯度如何影响HPLC，水中有机物的污
基于温度梯度的HPLC分析——温度梯度淋洗的HPLC方法
在近年来所开发的一系列液相色谱方法中，温度梯度淋洗方法有着独特的应用，尤其是在要求以纯水为流动相的色谱分析中。本文介绍了如何将已存在保留时间的模型发展成为温度梯度淋洗的HPLC方法。 在高效液相色谱（HPLC）的方法开发中，原则上都是采用反复试验法来建立的，实验室用户根据自己的经验来改变一
HPLC快速确定分析条件的几点经验
经验1：由强到弱：一般先用100%的乙腈(或甲醇)/0%的水(或缓冲溶液)进行试验， 这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。经验2：三倍规则 ：每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量，保留因子约增加3倍，此为三倍规则。在此过程中，注意观察各个峰的分离情况。经
HPLC造成峰拖尾的原因分析
a.筛板阻塞；反冲色谱柱、更换进口筛板b.色谱柱塌陷；填充色谱柱c.有干扰物质的存在；使用更长的色谱柱、改变流动相或更换色谱柱e.流动相PH值不合适；调整PH值，对于碱性化合物，低PH值更有利于得到对称峰f.样品与填料表面的溶化点发生反应；加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂或更改色谱柱
HPLC柱柱压过高原因分析
柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因。1、拆去保护预柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查；2、把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查；3、将柱子的进出口反过来
HPLC保留时间的波动可能原因分析
温控不当；调节好柱温。流动相组分变化；防止流动相蒸发、反应等，做梯度时尤其要注意流动相混合的均匀。色谱柱没有平衡；在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱。
基于温度梯度模型的HPLC分析
在近年来所开发的一系列液相色谱方法中，温度梯度淋洗方法有着独特的应用，尤其是在要求以纯水为流动相的色谱分析中。本文介绍了如何将已存在保留时间的模型发展成为温度梯度淋洗的HPLC方法。 在高效液相色谱（HPLC）的方法开发中，原则上都是采用反复试验法来建立的，实验室用户根据自己的经验来改变一
如何避免HPLC分析中纯水的干扰？
为了消除HPLC分析中的干扰，应该遵守以下一些规则：高纯水应该在用水地点制取而不要放置；所用的纯水机应该具备塑料组成、作为吸附和离子交换的纯化装置应该为半导体级的质量、应该具备UV-氧化装置和专门设计的过滤器；水路系统、样品前处理和脱气装置都应在使用前冲洗干净。新装的过滤器应该预先用8~10L水进行
用于HPLCSEC分析的超纯水
高效液相色谱(HPLC)是一种进行物质分离、鉴定和定量的分析方法。与其它通常采用梯度模式的各种生物聚合物HPLC(离子交换、疏水相互作用和反相色谱)不同，SEC(尺寸排阻色谱法)通常采用等度方法。 尺寸排阻色谱法 尺寸排阻色谱法(SEC)包括凝胶渗透色谱法(GPC)和凝胶过滤色谱法(在含水条
G8－HPLC－Analyzer－for－HPLC
High performance liquid chromatography (HPLC) is the gold standard methodology for the HbA1c test. By manipulating the flow rate of the liquid (i.
HPLC分析方法开发中流动相的调整
秘诀1：由强到弱： 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验， 这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。秘诀2 三倍规则 ：每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量，保留因子约增加3倍，此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中，注意
HPLC氘灯——基线不稳问题原因分析探讨
氘灯的技术性能指标通常包括氘灯能量、噪音、漂移这三个重要的指标，其中，对于最终的用户来说，可能碰到的最多的问题就集中在氘灯能量上，但在氘灯销售过程中，还经常碰到购买氘灯的客户反映氘灯基线不稳，后来通过反复的确认和对比，发现其实绝大多数的情况下，最终都不是氘灯的问题，因此，在下面的内容中，我们针对经常
环境分析中HPLC检测法的应用
由于化学工业的发展和天然化合物的开发,使得环境污染越来越严重。据相关新闻报道,被确认为环境污染物的已超过350种,人们能在水中、空气中、污泥里、鱼、禽体内发现这些污染物。通过食物链,它们将进一步污染肉类、蛋类、粮食、蔬菜等。环境污染的检测早已成为分析化学中重要的研究课题之一。 液相色谱(HPLC
HPLC泵压明显的偏高原因分析
流速设定过高；流动相或进样中有机械杂质，造成保护柱、柱前筛板或在线过滤器阻塞；流动相粘度过大；柱温过低；缓冲盐结晶；压力传感器故障。2、 基线不稳，上下波动或漂移的原因是什么，如何解决？a.流动相有溶解气体；用超声波脱气15-30分钟或用充氦气脱气。b.单向阀堵塞；取下单向阀，用超声波在纯水中超20
HPLC/ICPMS分析果汁中的砷
应用高效液相色谱分离不同价态的砷，再通过电感耦合等离子体质谱仪检测，是目前对苹果汁中的砷进行形态分析的最简单方法。本文以多种苹果汁样品为例，对HPLC/ICP-MS方法分离和测定各形态砷的能力进行了验证。 最近，媒体的报道使得公众开始关注苹果汁中砷（As）的问题。由于砷能够以多种形态存在（
关于食品化学分析中HPLC方法
自HPLC仪问世以来，其硬件技术、分析方法及应用研究发展迅速。本文仅就在食品化学分析中，HPLC分析技术与应用进展概述如下。 HPLC分析方法进展 ● 液-固色谱法（LSC） LSC是根据组分基团对吸附剂表面亲和力的大小，决定了其保留程度。在LSC色谱中应用广泛的极性固定相是硅胶。
减少HPLC分析中乙腈用量方法（二）
减小色谱柱的尺寸规格 通常在HPLC分析中，经常使用直径4.6mm的柱子。而在保持分离度不变的条件下，通过减小色谱柱的尺寸可减少流动相的消耗量。从图4中可以看出，流动相的消耗量将随着色谱柱内径的减小而相应减少，具体如下所示： 4.6 mm I.D.→3.0 mm I.D.→2.0 mm
超临界萃取人参皂苷及HPLC分析
采用超临界CO2萃取法提取人参中的人参皂苷,通过单因素试验探讨萃取方式、萃取温度、萃取时间、夹带剂用量以及萃取次数对人参皂苷提取率的影响,采用正交试验对超临界CO2萃取人参皂苷的工艺条件进行优化,并采用高效液相色谱法对萃取物中的人参皂苷单体Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2、Rd进行测定。结果表明:
HPLC分析一物质，如何消除梯度峰
如果是紫外检测器，是无法完全消除的，信号的产生不仅仅是吸收，还有反射等，梯度洗脱时流动相的变化肯定会引起响应的变化。如果用ELSD就没有。所谓的梯度峰，是在进行空白梯度是能够重现的色谱曲线变化，如果不能重复，则有两种可能：1. 有杂质洗脱出来2. 色谱系统不一致（在进行梯度洗脱时，完全一致的条件，第
HPLC氘灯：基线不稳问题原因分析探讨
氘灯的技术性能指标通常包括氘灯能量、噪音、漂移这三个重要的指标，其中，对于最终的用户来说，可能碰到的最多的问题就集中在氘灯能量上，但在氘灯销售过程中，还经常碰到购买氘灯的客户反映氘灯基线不稳，后来通过反复的确认和对比，发现其实绝大多数的情况下，最终都不是氘灯的问题，因此，在下面的内容中，我们针
在HPLC分析中死时间Tm的测量
在HPLC分析中，死时间Tm的测量是一个比较困难的问题，这也直接影响了高精度kovats保留指数在HPLC中的应用。死时间表示了一个在高效液相色谱固定相上未被滞留组分的保留时间，由于高效液相色谱立法的多样性，很难找到像气相色谱那样选择空气或甲烷为测量死时间的通用探针，其实平时分析时用这个死时间的意义
减少HPLC分析中乙腈用量方法（一）
图1. 乙腈和甲醇作为流动相时的峰的保留时间的差异。 面对全球范围的乙腈供应紧缺，如何减少乙腈在HPLC分析中的消耗量成为一个热门的话题，我们可以通过采取以下三种措施来减少乙腈在HPLC分析中的消耗量：将乙腈更换为其他溶剂；减小色谱柱的尺寸规格；通过减小填料的粒径来提高通量。这里暂
HPLC应用
一、样品测定1．流动相比例调整：由于我国药品标准中没有规定柱的长度及填料的粒度，因此每次新开检新品种时几乎都须调整流动相（按经验，主峰一般应调至保留时间为6~15分钟为宜）。所以建议第一次检验时请少配流动相，以免浪费。弱电解质的流动相其重现性更不容易达到，请注意充分平衡柱。2．样品配制：①溶剂；②容
HPLC组成
HPLC由溶剂输送系统（脱气机、高压泵等）、进样系统（定量泵、六通阀、定量环、进样针等）、分离系统（色谱柱等）、检测系统（检测器等）、记录及数据处理系统。高压输液泵：将流动相在高压下连续不断地送入液路系统，具有有足够的压力，输出流量恒定、可调，输出压力平稳，泵室体积小，泵体抗腐蚀、耐酸等特点。压力平
HPLC用水
HPLC用水可以通过以下几个方面来得到： 1、专门的纯水机或超纯水机； 2、去离子水重蒸； 3、二次或三次重蒸水； 4、采用类似家用的纯水机； 5、市场上瓶装的纯净水或蒸馏水； 6、其它途径 不管采用何种途径，配制流动相应用新鲜水，水质越高放置时间越短。 理想的HPLC用水应为1