血浆中治疗性多肽的定量分析
图1. 采用MRM模式对大鼠血浆提取物中的去氨加压素进行UPLC/MS/MS定量分析。上面的色谱图表示采用Xevo TQ-S的新型StepWave离子传输技术的峰值响应;下面的色谱图表示采用传统离子传输技术时的峰值响应。 多肽因其高耐受性、靶受体选择性和高效能的特性而逐渐被作为治疗药物使用。要对生物体液中的这些治疗性多肽进行准确定量,就必须具备选择性分离技术、高分辨力色谱系统及高灵敏度检测器。高分辨力的色谱系统可从血浆和血液中的内源性多肽中分离出目标分析物,其中部分可能是相同质量数的离子或形成相同质量数的碎片离子。由于这些治疗性多肽可模仿或取代内源性多肽的活性,检测过程中必须对这些内源性和外源性多肽进行区分。 尽管我们观测到的是多电荷化合物,且多肽高分子质量为1000~4000 amu,但对于这些多肽的检测,要求质谱仪的质量检测上限为2000 m/z才可成功对其进行分析。 本......阅读全文
血浆中治疗性多肽的定量分析
图1. 采用MRM模式对大鼠血浆提取物中的去氨加压素进行UPLC/MS/MS定量分析。上面的色谱图表示采用Xevo TQ-S的新型StepWave离子传输技术的峰值响应;下面的色谱图表示采用传统离子传输技术时的峰值响应。 多肽因其高耐受性、靶受体选择性和高效能的特性而逐渐被作
MRM3定量分析人血浆中的依克那肽
图1.MRM3定量分析的原理图示。母离子在Q1中选择,然后在Q2碰撞池中碎裂,产生的子离子被离子阱富集和分离,并被激发产生二级碎裂,所产生的二级碎裂子离子被扫描出离子阱并被检测器检测。 目前,串联质谱(MS/MS或MS2)技术能够降低干扰,大幅度地提高选择性,从而提供了极低的基线、极
Obitrap超高分辨质谱平台:多肽药物特立帕肽的定量分析
多肽药物是介于大分子蛋白/抗体类药物和小分子药物之间的一 类重要的药物分子,因其生物活性高、靶向专一性高、选择性 高、毒副作用低等优点而被广泛应用于疾病治疗领域[1]。Thermo Obitrap因其超高的分辨率,质量轴稳定性,已经广泛应用 在了多肽药物结构表征中。Obitrap 作为高分辩还
人造血浆(人工血浆、代血浆、血浆代用品)
人造代血浆是一种含有6%的药用羟乙基淀粉HES的生理盐水注射液。人造血液的特点是:(1)性质稳定,溶解氧气的能力比人血大一倍,并能将二氧化碳等废物带走,排出体外。(2)人造血液没有血型之分,输入任何人的血液里都不会引起不良反应。 当然,人造血液还存在一些缺点。例如,人造血液中没有白血球,不具备抵抗外
利用-UPLC-和-Xevo-TQS-对血浆中的治疗性多肽进行高灵敏...
利用 UPLC 和 Xevo TQ-S 对血浆中的治疗性多肽进行高灵敏度定量分析Robert S. Plumb 、 Gareth Booth 和 Paul D. Rainville 美国米尔福德马萨诸塞州沃特世公司应用优势 Xevo TQ-S 是一款新型的串联四极杆质谱系统 , 可提供最高灵敏度的多
血浆中内源性多肽的高选择性富集与分离鉴定获进展
碳介孔材料(OMC)高选择性富集血浆多肽示意图 血浆中多肽的分离鉴定对于疾病标志物的筛选和早期诊断具有重要意义。然而,血浆复杂的成分组成和多肽、蛋白质极高的含量动态范围,对内源性多肽的高效富集和分离鉴定形成了巨大的困难。中科院大连化学物理研究所邹汉法、吴仁安研究员等人采用该所张涛研究员研究
什么是多肽和多肽定制?
多肽定制一般指人工多肽合成的一种服务,指根据客户的需要,如序列、纯度、分子量等的不同要求,进行加工合成的满足特定需要的多肽合成服务。通过质谱仪进行分子量的确认,确定粗品MS的正否与否,再将粗品通过高效液相色谱即HPLC纯化,得到精品肽。根据不同实验,可以选择不同的多肽纯度,原则上是纯度越高,价格
什么是多肽和多肽定制?
多肽定制一般指人工多肽合成的一种服务,指根据客户的需要,如序列、纯度、分子量等的不同要求,进行加工合成的满足特定需要的多肽合成服务。通过质谱仪进行分子量的确认,确定粗品MS的正否与否,再将粗品通过高效液相色谱即HPLC纯化,得到精品肽。根据不同实验,可以选择不同的多肽纯度,原则上是纯度越高,价格
什么是多肽和多肽定制?
多肽定制一般指人工多肽合成的一种服务,指根据客户的需要,如序列、纯度、分子量等的不同要求,进行加工合成的满足特定需要的多肽合成服务。通过质谱仪进行分子量的确认,确定粗品MS的正否与否,再将粗品通过高效液相色谱即HPLC纯化,得到精品肽。根据不同实验,可以选择不同的多肽纯度,原则上是纯度越高,价格越高
液质联用仪在临床研究中定量分析血浆中雌二醇和睾酮
目的:采用液相色谱与三重四极杆质谱联用技术,为用于临床研究血浆中雌二醇和睾酮的定量分析,开发灵敏的 LC-MS/MS 分析方法。简介:对用于临床研究血浆样品中雌二醇和睾酮的定量分析要求具有灵敏的分析方法。液相色谱与串联质谱联用(LC-MS/MS)技术因其是一种高灵敏度和宽选择性的分析技术,现已被广泛
多肽制备
固相多肽合成就是不断地在固相载体上加入α-氨基和侧链基团被保护的氨基酸。FMOC基团是用来保护α-氨基中的N的,去除保护基团后,再加入第二个氨基酸。产生的多肽通过一个连接臂将C端连接在树脂上,它可以被裂解下来。通常情况下,在多肽从树脂上裂解下来的同时去除侧链保护基团,一般采用哌啶去 FMOC保护基团
多肽固相合成方法:Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重复添加的过程,通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接,再以该氨基酸N端为合成起点,经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应,接长肽链,重复操作,达到理想的合成肽链长度,最后将肽链从树脂上裂解下来
多肽固相合成方法:Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重复添加的过程,通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接,再以该氨基酸N端为合成起点,经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应,接长肽链,重复操作,达到理想的合成肽链长度,最后将肽链从树脂上裂解下来
多肽固相合成方法:Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重复添加的过程,通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接,再以该氨基酸N端为合成起点,经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应,接长肽链,重复操作,达到理想的合成肽链长度,最后将肽链从树脂上裂解下来,分
冰冻血浆和新鲜冰冻血浆区别
新鲜冷冻血液与一般冷冻血液的差别取决于规定的标准不一样。新鲜冷冻血液在有限的时间与温度下产生,而一般冷冻血液在保存期内当然沉定而成。抗凝全血于6-8钟头以内在4℃标准下抽滤将血液分离出来,并快速在-30℃下列冷冻成块,即是新鲜冷冻血液,冷冻情况一直持续到应用以前,有效期限为1年,产品内带有所有的凝血
成分输血始于血浆和血浆制品
说到成分输血,许多人的第一反应是输注红细胞和血小板。你知道成分输血是怎么来的吗?告诉你吧,成分输血始于二战期间的血浆应用——为英国采集血浆计划;成分输血的第一推手也正是白蛋白提取工艺的发明者、血浆工业的奠基人——爱德华·科恩(Edward J. Cohn)教授。上世纪70年代兴起的成分输血(Co
固相多肽合成的应用——多肽合成仪
多肽固相合成技术的发明同时促进了多肽合成的自动化。世界上第一台真正意义上的多肽合成仪出现在1980年代初期,它是利用氮气鼓泡来对反应物进行搅拌,用计算机程序控制来实现有限度的自动合成。虽然在各项功能方面有着明显的缺陷,但是它毕竟把人从实验室里解放出来,极大地提高了工作效率。随着多肽科学的发展,科学家
多肽的特点
传统获得肽的方法有很多。传统法主要有:酸法、碱法、电法、人工嫁接法、基因表达法等。但在工艺技术方面,这些合成工艺方法的局限性,是导致其这些合成方法没有产品的原因。 而酶法在传统法的基础上有所突破和创新,适应了低碳经济和绿色环保的要求。酶法就是用生物酶催化蛋白质获得多肽,就是蛋白质降解,人工合成
多肽合成仪
多肽合成仪,是以固相合成为原理合成多肽粗品的仪器。整体由主体、传输设备、动力装置以及软件系统组成。以固相合成为反应原理,在密闭的防爆玻璃反应器中使氨基酸按照已知顺序不断添加、反应、合成,操作最终得到多肽载体。
多肽合成仪
美国洛克菲勒大学教授Bruce Merrifield 在1963年发明的多肽固相合成技术(SPPS)是多肽合成领域的一个重大突破,对化学,生化,医药,免疫和基因科学等学科和领域都起了巨大的推动作用。 他本人也因此项发明荣获1984化学诺贝尔奖。
多肽是什么
多肽是α-氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物,是蛋白质水解的中间产物。由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽,同理类推还有三肽、四肽、五肽等。通常由10~100个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽。它们的分子量低于10000Da(Dalton,道尔顿),能透过半透膜,不被三氯乙酸及硫酸铵所
抗原多肽设计
为了使产生的抗体获得最佳效果,仔细地设计抗原多肽是很有必要的,设计应满足一个基本条件:在免疫过程中,该抗原既不会产生过强的免疫反应,同时又能产生出对感兴趣的蛋白有结合能力的抗体。抗原设计是一个很复杂的课题,有诸多需要注意的细节。根据我们所积累的经验,有几点关键的基本设计原则可供大家参考:确定抗体的用
什么是多肽?
多肽:由多个a-氨基酸分子缩合消去水分子而形成含有多个肽键,天然产物中得到一种有机物。
多肽小常识
保存: 大多肽在-20℃很稳定,特别是冷冻干燥并保存在干燥器中,在将它们暴露于空气之前, 冷冻干燥多肽可以放于室温。这将是湿度影响减少,当无法冷冻干燥时,最好的方法是以小的工作样量存放。 对于含Cys, Met orTrP的多肽,脱氧缓冲剂对其溶解必不可少,因为这种多肽可易空气氧化, 在封瓶前
多肽的简介
肽(peptide)是α-氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物,它也是蛋白质水解的中间产物。 一般肽中含有的氨基酸的数目为二到九,根据肽中氨基酸的数量的不同,肽有多种不同的称呼:由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽,同理类推还有三肽、四肽、五肽等,一直到九肽。通常由10~100个氨基酸
多肽合成历史
多肽合成概述: 1963年,R.B.Merrifield[1]创立了将氨基酸的C末端固定在不溶性树脂上,然后在此树脂上依次缩合氨基酸,延长肽链、合成蛋白质的固相合成法,在固相法中,每步反应后只需简单地洗涤树脂,便可达到纯化目的.克服了经典液相合成法中的每一步产物都需纯化的困难,为自动化合成肽奠定了基
多肽质谱仪类型
多肽质谱仪类型有多种。1、按分析目的可分:实验室多肽质谱仪和工业多肽质谱仪。2、按质量分析器的工作状态可分:静态多肽质谱仪和动态多肽质谱仪。3、按分析规模可分:小型多肽质谱仪和大型多肽质谱仪。4、按联用方式可分:多肽液相色谱质谱联用仪、多肽毛细管电泳质谱联用仪和多肽串联质谱仪等。5、按质量分析器的工
多肽合成步骤
1、树脂的选择及氨基酸的固定 用于多肽合成的高分子的载体主要有3类:交联聚苯乙烯;聚酰胺;聚乙烯乙二醇脂类树脂。氨基酸的固定主要是通过保护的氨基酸的羧基同树脂的反应基团之间形成共价键来实现。 2、氨基、羧基、侧链的保护及脱除 要成功合成具有特定的氨基酸顺序的多肽,需要对暂不参与形成酰胺
多肽小常识
多肽的基本常识保存: 大多肽在-20℃很稳定,特别是冷冻干燥并保存在干燥器中,在将它们暴露于空气之前, 冷冻干燥多肽可以放于室温。这将是湿度影响减少,当无法冷冻干燥时,最好的方法是以小的工作样量存放。 对于含Cys, Met orTrP的多肽,脱氧缓冲剂对其溶解必不可少,因为这种多肽可易空气氧
他们用液质联用仪在药物应用中做了什么?
液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术已经广泛应用于小分子药物开发,近年来,分析检测技术的发展也已对生物分析产生重大影响。 LC-MS/MS已被公认是众多领域(如蛋白质组学、兴奋剂检测、法医学和临床化学等)的定量生物分析首选,它也最终将取代并超越其他的生物药分析技术。 在肽段定量分析中,