做柱层析时怎样才能把洗脱液中的树脂残留物处理干净?

大孔吸附树脂在上使用前,一般需要进行处理,方法包括用色谱纯的甲醇或乙睛洗到没有吸收;或树脂用乙醇浸泡2天,丙酮浸泡2天,然后用常规的酸,碱洗。再用丙酮回流二小时就可以用了。......阅读全文

做液相时走梯度的目的是什么

因为很多比较复杂的样品,用一种流动相的比例是分不开的。所以需要设置梯度才能将样品分开。除此之外,有的样品设置梯度是减少一些成分的保留时间,提高分离效率。

生化实验讲义(理论部分)——层析技术(四)

5. 正相色谱与反相色谱  正相色谱是指固定相的极性高于流动相的极性,因此,在这种层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性大的分子移动的速度快,先从柱中流出来。  反相色谱是指固定相的极性低于流动相的极性,在这种层析过程中,极性大的分子比极性小的分子移动的速度快而先从柱中流出。  一般来说,分离纯化

在高效液相色谱中梯度洗脱装置的作用

梯度洗脱装置分两种:高压梯度:用两台高压输液泵将两种溶剂输入低压梯度:在常压下将两种溶剂(或多元溶剂)混合,然后用高压输液泵将流动相输入到色谱柱中。梯度洗脱可提高分离度、缩短分离时间、降低最小检测量和提高分离精度。但在使用中,梯度洗脱也有许多与等度洗脱不同的地方需要注意。梯度洗脱时应注意:1、注意各

液相色谱梯度洗脱中的谱带压缩效应

  色谱, 2021, 39(1): 10-14  DOI: 10.3724/SP.J.1123.2020.07042  微型述评  液相色谱梯度洗脱中的谱带压缩效应  郝卫强*, 刘丽娟, 沈巧银郝卫强《色谱》青年编委  个人简介  博士,研究员,1976年出生。  1994年就读于中国药科大学药

纯水处理中抛光树脂起什么作用?

抛光树脂是超纯水末端的滤料,确保出水水质稳定达标。 抛光树脂主要工作原理就是吸附水中钙镁离子,但是吸附也是有一定顺序的,按照排序来看,钙镁离子位置不算是前面,所以说既然能吸附钙镁离子就会吸附排在它前面离子,如果发现水流速发生变化,一些离子就会被冲出来,zui终导致质量变化。树脂分为两种。阳离子树脂主

纯水处理中抛光树脂起什么作用?

抛光树脂是超纯水末端的滤料,确保出水水质稳定达标。 抛光树脂主要工作原理就是吸附水中钙镁离子,但是吸附也是有一定顺序的,按照排序来看,钙镁离子位置不算是前面,所以说既然能吸附钙镁离子就会吸附排在它前面离子,如果发现水流速发生变化,一些离子就会被冲出来,zui终导致质量变化。树脂分为两种。阳离子树脂主

预处理中灭菌应怎样做

   水的常规灭菌处理为投药与紫外线灭活。例如目前广泛作为饮料水的纯净水就是经反渗透脱盐后,再经紫外线杀菌处理的。小容量用水(小于10t/h),可以使用二氧化氯或臭氧杀菌。工业上生产中则以氯气或次氯酸钠为多见,也可使用二氧化氯或臭氧。外购的氯气用钢瓶贮存,用加氯机投加,电解食盐(或海水)得到的是次氯

洗脱液的流速过快或过慢时,对分离效果有什么影响

洗脱液的流速过快时目的物的过早解吸,会引起区带扩散;过慢时,目的物的过晚解吸会使峰形过宽。梯度洗脱中为保证流速的稳定,必须使用恒流泵,否则难获重复结果。梯度洗脱常用一个弱极性的溶剂A和一个强极性的溶剂B。洗脱液体积应足够大,一般要几十倍于床体积,从而使分离的各峰不致于太拥挤。梯度的上限要足够高,使紧

液相色谱梯度洗脱时流动相的浓度比怎么去定

关于流动动相梯度选择的问题,个人习惯不同,方法 也不尽一样。据我愚见,一般应该选择乙腈:水=90:10进行首选。30-60分钟的首次运行时间,观察最晚出峰时间。以此为据进行流动相及梯度的选择。如果物质出峰时间者在10分钟以前出来,才有必要进行梯度变换。梯度变换原则是达到所有物质的基线分离,同时兼顾总

离子交换层析法分离氨基酸

实验概要本实验介绍了离子交换柱层析法的基本操作技术,采用离子交换树脂分离了氨基酸。实验原理离子交换层析法主要是根据物质的解离性质的差异而选用不同的离子交换剂进行分离的方法。各种氨基酸分子的结构不同,在同一pH时与离子交换树脂的亲和力有差异,因此可依据亲和力从小到大的顺序被洗脱液洗脱下来,达到分离的效

离子交换柱层析法(层析实验简介)概略

一、    原理:有些高分子物质含有一些可以分离的基因,例如-SO3H,-COOH等,因此可以和溶液中的离子产生交换反应。如:R-SO3H+M+ ———— R-S3M+H+或R-NH3OH+CL-  —————  R-NH3CL+OH-这类高分子物质通称离子交换剂,其中使用最普遍的是离子交换树脂。由

液固吸附色谱仪洗脱剂的洗脱能力

液固吸附色谱仪洗脱剂的洗脱能力:一、氧化铝和硅胶吸附剂:洗脱剂的洗脱能力为石油醚<已烷<苯<甲苯<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇<水。二、聚酰胺吸附剂:洗脱剂的洗脱能力为二甲基甲酰胺<稀NaOH水溶液或稀氨水<丙酮<95%乙醇<30%乙醇<水。三、活性炭吸附剂: 洗脱剂的洗脱能力为水<10%乙醇<30%

水处理树脂的分类

复合床:用两个交换器,将阴、阳离子交换树脂按设计要求装入各自的交换器中,原水先阳离子交换剂,水中的阳离子如Ca2+、Mg2+、K+、Na+等被交换剂所吸附,而交换剂上可以交换的H+被置换到水中,并且和水中的阴离子生成相应的无机酸;出水再经过阴离子交换剂,水中的阴离子如SO42-、CL-、HCO3-等

PPO粗酶液的纯化

一、原理1.葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析利用大分子不能进入凝胶颗粒内部最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后流出柱外,凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。(G-200能分离800-80000D分子量的蛋白质)2.利用离子交换法,选取DEAE-阴离子纤维素DE5

制备色谱技术与操作(二)

1 制备用的流动相最好等级高一点,否则流动相中的杂质会影响LC-MS分析。2使用馏分收集器时,延迟体积一定要计算精确,检测器的响应时间设到最小,否则都会影响收集的纯度和回收率。制备柱的流速一般与直径的平方成正比,如果4.6mm分析柱流速为1mL/min,9.4mm制备柱用1*(9.4/4.6)2,

离子分离为什么用不同浓度的洗脱液洗脱

阴离子交换柱的填料是正电填料,在低盐条件下可以通过电荷相互作用吸附样品中的阴离子和负电荷物质(如DNA).这些带负电的物质由于其带电量不同,分子大小不同,因而与正电填料之间的结合力也就不同.用梯度的氯离子(一般用氯化钠梯度,例如从100mM氯化钠线性梯度升高到1M氯化钠)洗脱挂柱样品时,氯离子会和结

溶菌酶的制备及其性质测定的原理和操作方法

实验概要本实验介绍了溶菌酶(lysozyme)的制备及其性质测定的原理和操作方法。实验原理溶菌酶(lysozyme)是由弗莱明在1922年发现的,它是一种有效的抗菌剂,全称为   1,4-β-N-溶菌酶,又称作粘肽N-乙酰基胞壁酰水解酶或胞壁质酶。活性中心为天冬氨酸52和谷氨酸35,是一种糖苷水解酶

DEAE纤维素柱层析纯化酶蛋白实验——离子交换层析法

本实验目的是以柱层析的方法进一步纯化蔗糖酶蛋白,利用DEAE 纤维素树脂作为离子交换剂进行柱层析分级分离。实验方法原理利用DEAE纤维素树脂作为离子交换剂进行柱层析分级分离。实验材料酶蛋白试剂、试剂盒DEAE纤维素NaOHHCLTris-HCl缓冲液NaCl仪器、耗材层析柱收集器磁力搅拌器搅拌子烧杯

PPO粗酶液的纯化

一、原理1.葡聚糖凝胶Sephadex G-200凝胶柱层析 利用大分子不能进入凝胶颗粒内部 最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后流出柱外,凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。(G-200能分离800-80000D分子量的蛋白质)2.利用离子交换法,选取DEAE-阴离子纤维素

PPO粗酶液的纯化

实验概要本实验利用葡聚糖凝胶柱层析对PPO粗酶液进行了纯化。实验原理1. 葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析利用大分子不能进入凝胶颗粒内部最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后流出柱外,凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。(G-200能分离800-80000D分子量

TLC柱层析中硅胶的使用

 硅胶的使用初做柱层析很容易把柱子装得长了或短了,有时还会有大量的硅胶剩余,浪费硅胶,这主要是对硅胶等固定相的使用的量没有掌握。柱层析用的硅胶一般是 100-200 目,100 毫升硅胶的质量在47 克左右,如果装一个直径是 2.8 厘米的柱子,可以装 18 厘高。为了避免浪费硅胶和溶剂,最初学习装

离子交换层析洗脱时的要求介绍

  ①洗脱液体积应足够大,一般要几十倍于床体积,从而使分离的各峰不至于太拥挤。  ②梯度的上限要足够高,使紧密吸附的物质能被洗脱下来。  ③梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。  洗脱馏份的分析按一定体积(

液质联用在食品中危害残留物分析的解决方案

Thermo的应用片子,介绍了TSQ Quantum,LXQ和Accela超高压液相色谱,在食品安全检测中的应用。 2006年9月巡讲的片子。液质联用在食品中危害残留物分析的解决方案

何毓琦:怎样才能到国外做博士后

【编者按】哈佛大学终身教授、美国工程院院士、中国科学院及中国工程院外籍院士何毓琦博士长期从事系统控制科学及工程应用研究,在最优控制、微分对策、团队论、离散事件动态系统和智能系统等方面做出了重大贡献。是动态系统现代控制理论的创导者之一。何毓琦博士长期致力于祖国大陆的科研发展,不但培养了多名中国学生,更

离子交换树脂在水处理中起什么作用

  自从进入2017年以来,环保行业已经用翻倍数据显示出了其利润,其中水处理这一项净利润比以前同比增长幅度很大,从而使得业绩幅度超出预期!对于水处理来说,他将会用到大量的离子树脂,这些树脂是进行水处理的工艺必要材料!同时,这些树脂还具有再生能力,只要是按照正常程序清理即可!    对于水处理包括了

反相色谱中洗脱顺序

反相色谱中洗脱强度顺序为:水

操做液相色谱时影响保留时间的变化的因素

影响液相色谱保留时间的因素:1、流动相的比例与极性。对于不同的柱子,分离度和保留时间往往都会有点差别,所以在操作的时候:a、可以适当调整流动相的比列,如甲醇—水(90:10),如分离效果与保留时间延长,可以调整88:12或者92:8或者95:5等。b、有时候还需要更换流动相的组成,甲醇就可以换成乙腈

水处理树脂详细介绍

水处理树脂分为阳离子树脂和阴离子树脂,阳离子树脂又细分为钠型和氢型,钠型树脂将水中的钙镁离子交换成钠离子,使水变软。氢型树脂是将水中的钙镁离子交换成氢离子使水软化.阴离子树脂中含被可置换的氢氧根离子,能置换出水中的酸根离子,同时使用阴离子树脂和氢型阳离子树脂可以将水变为纯净水。性质:水处理树脂由苯乙

水处理树脂作业原理

水处理树脂分为阳离子树脂和阴离子树脂,阳离子树脂又细分为钠型和氢型,钠型树脂将水中的钙镁离子交流成钠离子,使水变软.氢型树脂是将水中的钙镁离子交流成氢离子使水软化. 阴离子树脂中含被可置换的氢氧根离子,能置换出水中的酸根离子. 一起运用阴离子树脂和氢型阳离子树脂能够将水变为纯净水. 阴、阳混合离子交

蒸馏法测定氨氮时-,蒸馏装置怎样做预处理

如果用纳氏试剂法或滴定法测定氨氮则用50mL硼酸吸收,如果用水杨酸法-次氯酸盐法则用50mL0.01mol/L硫酸吸收。没有听说过用蒸馏水做预处理的方法。建议用絮凝法做预处理测氨氮,预处理的时间也就是絮凝的时间20mins(需要小试试验确定氢氧化钠和硫酸锌的加入量和比例),如果用蒸馏法,蒸馏时间就需