利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的...

利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的片段原因分析可能有以下几个原因:胶块未完全溶解,可适当延长水浴时间,并增加上下颠倒次数辅助溶解;2. 胶块体积太大,应先将其切为小块,分多次回收;3. 电泳缓冲液pH太高,硅基质膜在高盐低pH结合DNA,如pH太高,应作适当调整;4. 漂洗液中未加入无水乙醇。......阅读全文

利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的...

利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的片段原因分析可能有以下几个原因:胶块未完全溶解,可适当延长水浴时间,并增加上下颠倒次数辅助溶解;2. 胶块体积太大,应先将其切为小块,分多次回收;3. 电泳缓冲液pH太高,硅基质膜在高盐低pH结合DNA,如pH太高,应作适当调整;4. 漂洗液中未加

DNA凝胶回收试剂盒使用方法

1.在琼脂糖凝胶-EB电泳后,在紫外灯上小心的把所需的DNA片段切下,尽量去除多余的凝胶并尽量少带电泳缓冲液,称重,装入1.5 ml离心管。2. 按照凝胶的重量近似的估计其体积,假设其密度为1g/ml,凝胶的体积可按如下方法计算:若凝胶薄片的重量为0.2 g,则其体积为0.2 ml。3. 在上述离心

DNA纯化实验——DNA凝胶回收试剂盒纯化法

DNA纯化可用于:(1)获得高纯度的DNA;(2)浓缩DNA;(3)测序、遗传信息分析等分子生物学应用。实验方法原理本试剂盒适合从各种琼脂糖凝胶中提取多至 8 μg DNA(70 bp-10 Kb),回收率为 60-85%。琼脂糖凝胶在温和的缓冲液(DE-A 溶液)中溶解,其中的保护剂能防止线状 D

DNA片段纯化与回收常见问题分析

Q:利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的片段?A:可能有以下几个原因:   1. 胶块未完全溶解,可适当延长水浴时间,并增加上下颠倒次数辅助溶解;   2. 胶块体积太大,应先将其切为小块,分多次回收;   3. 电泳缓冲液pH太高,硅基质膜在高盐低pH结合DNA,如pH太高,应作适

琼脂糖凝胶DNA纯化回收试剂盒Promega

Promega Wizard  SV Gel and PCR Clean-up System 品牌:Promega回收范围:100bp-10kb价格:(50次包装的试剂盒报价为562元,11元/次)Promega的产品在进口品牌中一向以价格可亲而著称。这个胶回收试剂盒也不例外。并且这个试剂盒的性能参

琼脂糖凝胶回收试剂盒

品牌:Qiagen回收范围:70bp-4kb价格:(50包装1,485,约29元/反应)特点:洗涤体积只要10μl,回收产物浓度高,方便后继实验使用方便快捷(wash-and-spin)高回收率回收产物纯度高,可用于同位素或荧光测序、芯片分析、连接转化、酶切、标记、PCR、显微注射、体外转录等后继实

DNA的酶切消化与凝胶回收

[实验原理]限制性内切酶是分子操作中重要的工具酶,是一类能够识别双链DNA分子某种特定的核苷酸序列并切割双链DNA分子的核酸内切酶。可分为3类,Ⅰ和Ⅲ类限制酶兼有甲基化等修饰作用及以来ATP的限制性切割活性,前者结合于识别位点随即切割DNA,后者则在识别位点切割。Ⅱ类限制酶是由两种酶分子组成的复合体

PCR反应如果没有回收到目的片段需要作什么对照实验?

A)涂布未转化的感受态细胞。如有菌落,表明氨苄失效,或污染上带有氨苄抗型的质粒,或产生氨苄抗型的菌落。B)转化完整质粒,计算菌落生长数,测定转化效率。例如,将1ug/ul质粒1:100稀释,1ul用于100ul感受态细胞转化。用SOC稀释到1000ul后,用100ul铺板。培养过夜,产生1000个菌

如果没有回收到目的片段,还需要作什么对照实验?

涂布未转化的感受态细胞: 如有菌落,表明氨苄失效,或污染上带有氨苄抗型的质粒,或产生氨苄抗型的菌落: 1 ) 转化完整质粒,计算菌落生长数,测定转化效率: 例如,将1μg/μL质粒1:100 稀释,1μL用于100μL感受态细胞转化。用SOC稀释到1000μL后,用100μL铺板。培养过夜,

对照实验结果好,却没有回收到目的片段的原因

A)连接用室温保温1小时,能满足大多数克隆,为提高效率,需4℃过夜。B)插入片段带有污染,使3`-T缺失,或抑制连接,抑制转化。为此,将插入片段和pGEM-T正对照混合,再连接。如降低了对照的菌落数,插入片段需纯化,或重新制备。如产生大量的蓝斑,插入片段污染有核酸酶,使pGEM-T或pGEM-T E

电泳检测只有一条目的带可否选用凝胶回收试剂盒?

可以。如果后续实验对片段纯度要求较高,建议即使只有一条带,也可以切胶纯化,其回收得到片段的纯度可能要比直接回收高一些。

脉冲场凝胶中浓缩DNA片段的回收

实验方法原理 低熔点琼脂糖切片中的 DNA 首先通过电泳浓缩进入高百分比琼脂糖凝胶中,然后用琼脂糖酶处理而分离。最终 DNA 制备通过微透析纯化。这种方法在把分离的 DNA 注入小鼠受精卵(Schedl et al. 1993) 或转染鼠胚胎干细胞(Choi et al. 1993) 时是非

脉冲场凝胶中浓缩DNA片段的回收

            实验方法原理 低熔点琼脂糖切片中的 DNA 首先通过电泳浓缩进入高百分比琼脂糖凝胶中,然后用琼脂糖酶处理而分离。最终 DNA 制备通过微透析纯化。这种方法在把分离的 DNA 注入小鼠受精卵(Schedl et al. 1993) 或转染鼠

脉冲场凝胶中浓缩DNA片段的回收

低熔点琼脂糖切片中的 DNA 首先通过电泳浓缩进入高百分比琼脂糖凝胶中,然后用琼脂糖酶处理而分离。最终 DNA 制备通过微透析纯化。这种方法在把分离的 DNA 注入小鼠受精卵(Schedl et al. 1993) 或转染鼠胚胎干细胞(Choi et al. 1993) 时是非常有效的。本实验来源「

DNA片段的回收实验——树脂回收法

目的DNA片段的回收技术是重组DNA中的关键技术,回收是指从电泳介质中纯化出目的片断。实验方法原理本方法特别适合于PCR片段的回收,具有纯度高、操作简洁等特点,经此方法回收的片段可有效的用于重组载体构建。通过15分钟的纯化过程,PCR产物即能被有效地从含引物二聚体、非特异性扩增引物片断等混合物中分离

脉冲场凝胶中DNA片段的直接回收

实验方法原理 低熔点琼脂糖制备规模的 PFGE 经常被用于 DNA 片段的分离。不同大小的 DNA 可以用限制酶酶切产生高分辨率酶切图谱或产生用于插入噬菌体或质粒载体的片段。实验材料 DNA 大小标准基因组 DNA试剂、试剂盒 溴化乙锭酚:氯仿仪器、耗材 水浴实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液溴化

脉冲场凝胶中DNA片段的直接回收

            实验方法原理 低熔点琼脂糖制备规模的 PFGE 经常被用于 DNA 片段的分离。不同大小的 DNA 可以用限制酶酶切产生高分辨率酶切图谱或产生用于插入噬菌体或质粒载体的片段。 实验材料

脉冲场凝胶中DNA片段的直接回收

低熔点琼脂糖制备规模的 PFGE 经常被用于 DNA 片段的分离。不同大小的 DNA 可以用限制酶酶切产生高分辨率酶切图谱或产生用于插入噬菌体或质粒载体的片段。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理低熔点琼脂糖制备规模的 PFGE 经常被用于 DNA 片段的分离。不同大小的 D

从琼脂糖凝胶(Agaros-gel)中回收DNA片段

目的学会从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的基本技术。2.原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后,按分子量大小被分开,排列在琼脂糖凝胶中,可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来,加热或用特殊的试剂熔解凝胶,使DNA溶回到溶液中,再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的 DNA酶切片段。3.器材旋涡混合器,

从琼脂糖凝胶(Agaros-gel)中回收DNA片段

实验原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后,按分子量大小被分开,排列在琼脂糖凝胶中,可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来,加热或用特殊的试剂熔解凝胶,使DNA溶回到溶液中,再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的 DNA酶切片段。实验试剂1. 电泳缓冲液2. 荧光染料3. 电泳级琼脂糖粉4. 10

从琼脂糖凝胶(Agaros-gel)中回收DNA片段

实验概要学会从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的基本技术。实验原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后,按分子量大小被分开,排列在琼脂糖凝胶中,可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来,加热或用特殊的试剂熔解凝胶,使DNA溶回到溶液中,再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的 DNA酶切片段。主要试剂1. 电

DNA回收电泳槽

  产品详细描述   产品特点   □“V”型槽结构,回收凝胶上指定的DNA   □ 回收范围宽,超出200b~20Kb   □ 回收效率高,可达到95%以上   □ 不需透析膜和专用回收试剂,成本低廉   □ 操作简单,容易掌握,可以观察回收效果   有效回收电泳后的指定

DNA片段的回收实验

实验方法原理 本方法特别适合于PCR片段的回收,具有纯度高、操作简洁等特点,经此方法回收的片段可有效的用于重组载体构建。通过15分钟的纯化过程,PCR产物即能被有效地从含引物二聚体、非特异性扩增引物片断等混合物中分离出来,成为高度无盐的、不含其他大分子成分的纯化片断。在较宽的分子量范围内有较高的回收

DNA片段的回收实验

树脂回收法 微量柱法 液氮冻融法 常规方法             实验方法原理 本方法特别适合于PCR片段的回收,具有纯度高、操作简洁等特点,经此方法

DNA片段回收与纯化

    质粒、噬菌体等经酶切,电泳;PCR产物经电泳后,常常需要对一些DNA电泳片段进行回收和纯化,用于亚克隆、探针标记等。DNA回收和纯化常用方法有压碎法、低融点琼脂糖法、冻融法等,也有现成的试剂盒供应。一、冻融法1.  紫外灯下仔细切下含待回收DNA的胶条,将切下的胶条(小于0.6g)捣碎,置于

移动行业聚焦手机回收利用

  专家称,每年生产出的移动手机有超过10亿部,但是仅有不足1%的手机被回收利用。如果这些手机被回收利用,可以节省出数十亿美元。斯普林特公司产品部副总经理法雷德?阿迪布(Fared Adib)说:“有时,手机的体积欺骗了人们,忽略了其对环境产生的影响。”   每部手机使用材料的价值也时常被人们

酶切后产物回收和凝胶回收一样吗

如果没有其他杂带就可以。单一条带的PCR产物,如果酶切后也只有一条带,就可以用产物回收试剂盒回收。但如果酶切后有杂带或多条带,就只能做胶回收。

从琼脂糖凝胶(Agaros-gel)中回收DNA片段实验

实验原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后,按分子量大小被分开,排列在琼脂糖凝胶中,可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来,加热或用特殊的试剂熔解凝胶,使DNA溶回到溶液中,再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的 DNA酶切片段。实验试剂1. 电泳缓冲液2. 荧光染料3. 电泳级琼脂糖粉4. 10

多功能DNA纯化回收试剂盒(离心柱型)说明

多功能DNA纯化回收试剂盒(离心柱型) 产品编号 包装 价格 DP1501 50次 询价

PCR产物的TA克隆

实验概要本实验介绍了DNA回收和连接的基本原理,PCR产物的T-vector克隆。实验原理1. DNA片段回收方法:DNA片段在适当浓度的琼脂糖凝胶中,通上一定电压进行电泳,不同大小的DNA分子由于迁移率的不同而分离开。切下带有所需DNA片段的凝胶,用冻融法、玻璃奶回收法或商品化胶回收试剂盒将目的片