用数字PCR方法单次实验同时检测EGFR活化突变位点和耐药..

用数字PCR方法单次实验同时检测EGFR活化突变位点和耐药突变位点通常生物学样本量有限,通过单次实验获得足够多的信息对于研究人员和诊断人员至关重要。NaicaTMcrystal数字PCR系统实现了单次实验中同时检测和定量多重生物标志物,并确保数据精准度和可信度,通过3个不同的荧光通道,非常明确地区分靶标位点。这种简单快速的技术平台能够兼容多种荧光染料组合,大大地扩展了实验设计的可能性。在NSCLC(非小细胞肺癌)治疗中,EGFR(表皮生长因子受体)是重要的药物作用靶点。EGFR活化突变位点,如L858R和L861Q用于预测TKIs(酪氨酸激酶抑制剂)药物药效,同时EGFR T790M突变用于一代TKIs药物耐药预测。为能够在单次实验中评估TKIs药物反应,在NaicaTMcrystal数字PCR系统上进行的多重数字PCR实验,实现了同时检测EGFR L858R、L861Q、T790M和野生型EGFR。在野生型背景下,可以成功并准......阅读全文

用数字PCR方法单次实验同时检测EGFR活化突变位点和耐药..

用数字PCR方法单次实验同时检测EGFR活化突变位点和耐药突变位点通常生物学样本量有限,通过单次实验获得足够多的信息对于研究人员和诊断人员至关重要。NaicaTMcrystal数字PCR系统实现了单次实验中同时检测和定量多重生物标志物,并确保数据精准度和可信度,通过3个不同的荧光通道,非常明确地区分

两种多重数字PCR试剂检测EGFR的活化和耐药位点

数字PCR应用文献---两种多重数字PCR试剂检测EGFR的活化和耐药位点NaicaTMcrystal数字PCR 通常生物学样本量有限,通过单次实验获得足够多的信息对于研究人员和诊断人员至关重要。NaicaTMcrystal数字PCR系统实现了单次实验中同时检测和定量多重生物标志物,并确保数据精准度

多重数字PCR技术介绍(一)

什么是数字PCR?数字PCR是一种新的绝对定量PCR,通过对PCR反应物进行有限稀释,随后在不同的反应腔室里进行PCR扩增,最后根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例得出靶分子的起始拷贝数或浓度的技术。什么是多重PCR?多重PCR又称多重引物PCR或复合PCR,它是在同一PCR反应体系里加上两对以上

Naica数字PCR技术对NSCLC患者血浆中EGFR相关突变检测的应用

非小细胞肺癌(NSCLC)肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,已成为我国城市人口恶性肿瘤死亡原因的第一位。其中,非小细胞肺癌约占所有肺癌的80%,约75%的患者发现时已处于中晚期,5年生存率很低。而非小细胞肺癌中最常见,且有针对性靶向药物的突变就是“表皮生长因子受体”(EGFR)突变。表皮生长因子受体

多重数字PCR技术介绍

什么是数字PCR?数字PCR是一种新的绝对定量PCR,通过对PCR反应物进行有限稀释,随后在不同的反应腔室里进行PCR扩增,最后根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例得出靶分子的起始拷贝数或浓度的技术。什么是多重PCR?多重PCR又称多重引物PCR或复合PCR,它是在同一PCR反应体系里加上两对以上

精确诊断助力实现肺癌精准治疗

   随着医学诊断技术,特别是分子诊断技术的不断进步,越来越多的肺癌驱动基因被发现,肺癌精准诊疗成为关注热点。近日,在第二十届全国临床肿瘤学大会期间,复旦大学附属中山医院潘柏申教授主持了“罗氏诊断肺癌专题卫星会”,首都医科大学宣武医院支修益教授通过视频进行致辞,北京大学肿瘤医院赵军教授、罗氏诊断总部

EGFR基因扩增与EGFR基因突变有何区别

肺癌是全世界范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,其中非小细胞肺癌(NSCLC)占全部肺癌的80%左右。目前,晚期NSCLC的标准治疗为含铂的双药联合化疗。但化疗药物对改善晚期NSCLC患者的生存期方面作用有限。在非小细胞肺腺癌里,EGFR基因的突变频率非常高,尤其是亚裔非吸烟的女性患者。针对EGFR

知晓PCR,定量PCR与数字PCR的实验方法与选择

从1985年至今的30多年时间里,PCR分析经历了三代技术的发展。一代传统PCR技术,采用琼脂糖凝胶电泳的方法对PCR产物进行定性分析。第二代荧光定量PCR技术,通过在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的积累实时监控PCR进程,最后用Cq值对基因进行定量分析。第三代数字PCR技术,通过将PC

基于EVAGREEN®方法的CRYSTAL数字PCR绝对定量检测

基于EVAGREEN®方法的CRYSTAL数字PCR绝对定量检测EvaGreen®是一种无致突变性、无细胞毒性的DNA结合染料,NaicaTM Crystal全自动微滴芯片数字PCR仪系统可兼容EvaGreen®染料进行的数字PCR实验分析。反应体系中游离的的EvaGreen®染料不发出荧光信号,但

Talanta:高灵敏和防污染的“准共聚焦”微液滴数字PCR阅读仪

  清华大学医学院生物医学工程系郭永实验室在《分析学家》(Analyst)在线以封底(back cover)发表题为《一种双荧光四分类微液滴数字PCR数据的准确、可靠和自动分类方法——密度分水岭算法》(A density-watershed algorithm (DWA) method for ro

Analyst:数字PCR数据的准确、可靠、非监督自动分类新方法

  清华大学医学院生物医学工程系郭永实验室在《分析学家》(Analyst)在线以封底(back cover)发表题为《一种双荧光四分类微液滴数字PCR数据的准确、可靠和自动分类方法——密度分水岭算法》(A density-watershed algorithm (DWA) method for ro

数字PCR检测技术介绍

数字PCR(Digital PCR-dPCR)技术是一种新的核酸检测和定量方法,又称单分子PCR,它的原理是将一个标准PCR反应分配到大量微小的反应器中,在每个反应器中包含或不包含一个或多个拷贝的目标分子( DNA模板) ,实现“单分子模板PCR扩增”。 扩增结束后,通过阳性反应器的数目“数出”目标

第三代PCR技术纪念Kary-Mullis获得诺奖30周年

Mullis博士在发明PCR技术后曾这样描述:“用一个单分子DNA,PCR能在一个下午内产生100百万个相似的分子。反应很容易进行,只需要一个管子、一些简单的试剂和一个用来加热的设备”(Beginning with a single molecule of the genetic material

肺癌耐药机制及临床诊疗策略制定

  转化医学和分子生物学的发展,揭示了肿瘤驱动性基因突变如何通过不同的信号通道传导机制促进肿瘤的发生和发展,为肿瘤靶向治疗开辟了道路,而紧随靶向治疗之后的耐药问题,也为肿瘤的靶向治疗管理提出了新的挑战。  目前,肿瘤管理往往基于分子诊断的证据基础制定最优的治疗策略。近期,发表在Current Onc

分子生态学词汇高变位点

中文名称:高变位点英文名称:hypervariable site定  义:变异频率很高的DNA位点。应用学科;生态学(一级学科),分子生态学(二级学科)

当EGFR和ALK基因突变同时出现,靶向药物如何用?

  根据目前的数据统计,肺癌依然是临床上最常见和死亡率最高的恶性肿瘤之一,大约75-80%的肺癌为非小细胞肺癌。  在非小细胞肺癌中的肺腺癌亚型中,EGFR和ALK基因突变发生的概率最高,在亚裔肺腺癌患者中,EGFR基因的发生概率高达50%,ALK融合基因突变的概率为5-8%。由于这两个基因突变在免

PCR技术应用五:苯酶同尿症诊断

 经典型的苯丙酮尿(Phenyketon uria简PKU)是由苯丙氨酸羟化酶(PAH)的遗传性 缺陷引起的一种先天性代谢病,其发病早在我国以为1/10000左右,杂合子频率为 1/50.PKU的临床表现  PKU患儿由于苯丙氨酸羟化酶的缺乏或不是使苯丙氨酸在休丙大量堆识,并经旁 路代谢途径产生一系

达普生物最新自动数字PCR系统,开拓数字PCR多重检测能力

前言:2022 年 8 月,达普生物科技有限公司正式推出六色荧光通道的微液滴式数字 PCR——星云六色全自动数字 PCR 系统(Nebula 6 Channel Auto dPCR System)。该系统基于液滴微流控技术,整合高功率长寿命光学系统,超灵敏荧光检测技术及全新的 AI 图像分析算法为一

用碱水解和氯甲苯活化的固定化实验

实验方法原理 用这种方法酯键通过碱的处理被部分水解,用溶在丙酮中的对甲苯磺酰氯化物来活化,用羧基或羟基固定化酶到这个残基上(图 1)。图 1 通过氯化物的活化酶固定化到聚酯上实验材料 酶溶液试剂、试剂盒 磷酸钾 NaClNaOH丙酮对甲苯磺酰氯化物仪器、耗材 吸滤器玻璃料聚酯小片实验步骤 实验所需「

用碱水解和氯甲苯活化的固定化实验

实验方法原理用这种方法酯键通过碱的处理被部分水解,用溶在丙酮中的对甲苯磺酰氯化物来活化,用羧基或羟基固定化酶到这个残基上(图 1)。图 1 通过氯化物的活化酶固定化到聚酯上实验材料酶溶液试剂、试剂盒磷酸钾NaClNaOH丙酮对甲苯磺酰氯化物仪器、耗材吸滤器玻璃料聚酯小片实验步骤实验所需「试剂」具体见

用碱水解和氯甲苯活化的固定化实验

基本方案             实验方法原理 用这种方法酯键通过碱的处理被部分水解,用溶在丙酮中的对甲苯磺酰氯化物来活化,用羧基或羟基固定化酶到这个残基上(图 1)。图 1 通过氯

数问生物CODARARMS-PCR液态活检技术入选2018-ASCO

   中国德清,2018年5月16日--领先的创新诊断产品和医学检验服务企业浙江数问生物技术有限公司宣布,其独创的高灵敏度CODAR-ARMS PCR液体活检技术研究结果入选2018年ASCO(美国临床肿瘤学会)年会会议摘要,首次在国际会议上展示CODAR-ARMS PCR技术的优越性能。  数问开

结核分枝杆菌鉴定方法

1.1 萋尼氏抗酸染色痰涂片显微镜检查 目前萋尼氏抗酸染色痰涂片显微镜检查是我国结核病实验室使用最为 普遍的方法,其操作简单快捷,特异性高,设备要求低,但是灵敏度较低,不能及时发现病人。1.2 发光二极管荧光显微镜(LED荧光显微镜)发光二极管荧光显微镜管利用二极管光源,延长了显微镜使用寿命,不需要

结核分枝杆菌鉴定方法

1.1 萋尼氏抗酸染色痰涂片显微镜检查 目前萋尼氏抗酸染色痰涂片显微镜检查是我国结核病实验室使用最为 普遍的方法,其操作简单快捷,特异性高,设备要求低,但是灵敏度较低,不能及时发现病人。1.2 发光二极管荧光显微镜(LED荧光显微镜)发光二极管荧光显微镜管利用二极管光源,延长了显微镜使用寿命,不需要

常用的分子生物学基本技术(三)

DNA序列分析(DNA sequencing) 应用各种突变检测技术检测到的基因突变,最后都需用序列分析才能确定突变类型及突变位置,其效率可以达到100%。现在的测序方法已与经典的方法有了很大的不同,其基本原理虽仍是双脱氧终止法,但自动化程度大为提高,操作更简便,测序时间也大大缩短。随着PCR技术与

鼎晶生物和臻准生物就ESR1数字PCR项目达成战略合作

  6月18日,鼎晶生物与臻准生物就数字PCR合作的未来方向达成共识,并对ESR1的项目研发、市场推广达成战略合作意向。  此次,鼎晶生物联合臻准生物推出新产品“人ESR1基因突变检测试剂盒(数字PCR法)”,本款试剂盒应用先进的ddPCR技术,通过检测ESR1基因的常见突变位点,可实现乳腺癌患者的

数字PCR应用及前景

 剖析|你想要知道的数字PCR应用及前景 一. PCR的发展历史 PCR技术自问世以来,在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用。代 PCR在进行扩增后通过凝胶电泳进行定性分析。 随着生物分子荧光技术的发展,1992年实时荧光定量PCR(Quantitative Real

数字PCR在临床和预后融合基因检测的应用

众所周知,融合基因检测对临床诊断及预后指导都具有十分重要的意义。那么究竟什么是融合基因呢?融合基因的发现始于上个世纪60年代,它是指染色体断裂后又重新拼接。如果恰巧拼接时发生了错误,使两个不同基因互相融合,大多数情况下,它会造成某些序列或功能异常的蛋白表达,亦或者是某些基因表达失调,从而促进肿瘤的发

数字PCR应用及前景

一. PCR的发展历史 PCR技术自问世以来,在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用。第一代 PCR在进行扩增后通过凝胶电泳进行定性分析。 随着生物分子荧光技术的发展,1992年实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR, qPCR) 应运

你想要知道的数字PCR应用及前景

 一. PCR的发展历史  PCR技术自问世以来,在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用。第一代 PCR在进行扩增后通过凝胶电泳进行定性分析。  随着生物分子荧光技术的发展,1992年实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,