高分辨率熔解曲线(HRM)分析预混Mix(PCR),能基因筛查吗?
高分辨率熔解曲线(high-resolution melting,HRM)是一种基于单核苷酸熔解温度不同而形成不同形态熔解曲线的基因分析新技术,具有极高的敏感性,可以检测出单个碱基的差异。 作为一种高效稳健的"post-PCR"技术,它不受突变碱基位置与类型的限制,无需序列特异性探针,在PCR结束后直接运行高分辨熔解即可完成对样品的分析。HRM技术因操作简便快捷、成本低廉、结果准确,并且实现了真正的闭管操作而受到普遍关注。HRM原理:在PCR反应前将新型DNA饱和荧光染料加入反应体系,然后将PCR产物直接导入高分辨熔解分析仪中,在一定的温度范围内将PCR扩增产物进行加热变性,仪器的光学检测系统采集、分析荧光信号并绘制温度熔解曲线,根据不同熔解曲线形状来区分(单个)碱基差异。最广泛的 HRM 分析应用领域是基因筛查。基因筛查是搜索 PCR 扩增片段中是否存在未知变异,它可在测序步骤之前进......阅读全文
高分辨率熔解曲线(HRM)分析预混Mix(PCR),能基因筛查吗?
高分辨率熔解曲线(high-resolution melting,HRM)是一种基于单核苷酸熔解温度不同而形成不同形态熔解曲线的基因分析新技术,具有极高的敏感性,可以检测出单个碱基的差异。 作为一种高效稳健的"post-PCR"技术,它不受突变碱基位置与类型的限制,无需序列特异性探针,在PCR结
高分辨熔解曲线法HRM实现基因分型
HRM实现基因分型基因分型在动物、植物、微生物的物种、菌种筛查、筛选、缺陷、突变基因的检测,根据个体基因类型实现对诸如癌症治疗、监测等的精准用药,以及消费类基因检测如酒精代谢能力基因检测等等领域有很多应用。通常,基因分型SNP采用荧光探针终点法,检测一个位点需要两个荧光探针,如一个探针的荧光报告基团
什么是PCR熔解曲线法
PCR熔解曲线分析法是做realtime-pcr时分析,用来确定不同的反应产物,包括非特异性产物的分析方法。原理是在扩增反应完成后,通过逐渐增加温度的同时监测每一步的荧光信号来产生溶解曲线,随着反应中双链DNA变性,荧光染料又回复到游离状态导致荧光信号降低,用荧光信号改变的负的一次导数与温度作图,在
什么是PCR熔解曲线法
PCR熔解曲线分析法是做realtime-pcr时分析,用来确定不同的反应产物,包括非特异性产物的分析方法。原理是在扩增反应完成后,通过逐渐增加温度的同时监测每一步的荧光信号来产生溶解曲线,随着反应中双链DNA变性,荧光染料又回复到游离状态导致荧光信号降低,用荧光信号改变的负的一次导数与温度作图,在
什么是PCR熔解曲线法
PCR熔解曲线分析法是做realtime-pcr时分析,用来确定不同的反应产物,包括非特异性产物的分析方法。原理是在扩增反应完成后,通过逐渐增加温度的同时监测每一步的荧光信号来产生溶解曲线,随着反应中双链DNA变性,荧光染料又回复到游离状态导致荧光信号降低,用荧光信号改变的负的一次导数与温度作图,在
高分辨熔解曲线突变检测
高分辨熔解曲线(High Resolution Melting)技术是近年来兴起的一种全新的突变扫描和基因分型的遗传分析方法。HRM不受突变碱基位点与类型局限,无需序列特异性探针,在PCR结束后直接运行高分辨熔解,即可完成对样品的分析。该方法与其他遗传分型技术相比具有灵敏度高、特异性好、成本低廉
新生儿听力筛查、耳聋基因筛查很必要
父母听力正常却连生两聋儿 3月3日是全国“爱耳日”。我国每年新生聋儿3万余名,其中约60%与遗传因素有关。如果加上迟发性耳聋及药物性耳聋患者,每年新增的听障儿童超过6万。专家表示,听力障碍重者导致聋哑,轻者导致语言和言语障碍、社会适应能力低下、注意力缺陷和学习困难等心理行为问题,新生儿听力筛
芯片筛查耳聋基因又快又准
我国的耳聋基因携带人群非常庞大,这些耳聋基因携带者又大多表现听力正常,但在特定条件下会发病造成听力残疾或者在下一代人身上发病,然而这些都还没有引起全社会的足够重视。 近日,在生物芯片北京国家工程研究中心举行的“遗传性耳聋基因筛查突破百万暨科学与国际合作论坛”上,生物芯片北京国家工程研究中心
注意!耳聋基因筛查要趁早
据统计,在我国每年有3.5万的新生儿在出生前就被夺去了听力,加上迟发性和药物聋儿,这个数字达到了6万之多。而大多数人群认为“只有耳聋残疾人才会生育聋儿”。但临床数据显示,80%的聋儿的父母是听力正常的。100个听力正常人中,就有4-5个人存在耳聋基因缺陷,如果同一类型的耳聋缺陷者结为夫妇,他们生
耳聋基因筛查:星火待燎原
▲采集婴儿足跟血做耳聋基因筛查。▲DNA片段 如果表演《千手观音》的舞蹈演员邰丽华出生的时候进行过耳聋基因筛查,或许她和她的同伴们,就有可能避免“一针致聋”的悲剧出现。但是,耳聋基因筛查项目在实际推广的过程中,却因旧的体制、机制的束缚,处于蹒跚前行的状态。 “如果表演《千手观音》的舞蹈演员邰丽华
基因筛查进入单细胞时代
遗传筛选是生物学中最有力的工具,它可以阐明复杂的生物过程。最近四项研究已经开发了一个新的遗传分析方法,通过使用单个细胞作为微观实验室,测定扰动。这些研究开发了CROP-seq、PERTURB-seq和CRISP-seq技术,克服了现有基因筛查方法的局限性,并且可以分析一些原本无法分析的样本。
多个序列突变的筛查HRMA(二)
突变检测 高分辨熔解曲线分析已用于DNA序列突变的检测,是第一个用于基因分型中的技术[Wittwer等,2003]。简便、廉价、容易使用、高灵敏性和高特异性是它的突出特点,使它成为一种用于基因分型和诊断应用实验室中有吸引力的新工具。在萨普,表S1给出了我们所能找到的基于人类基因的实验。高分辨熔
Oncologica前列腺焦点基因筛查测试
总部位于英国剑桥的基因癌症和病毒检测实验室 Oncologica 推出了前列腺癌基因筛查测试,旨在识别患前列腺癌风险增加的男性。 该测试使用患者通过自我样本收集套件或在诊所收集的唾液样本分析 DNA 损伤修复基因。 该测试被送到 Oncologica 的 UKAS 认可的实验室进行基因组分析,并
程京院士:不要忽视耳聋基因筛查
3月3日是全国爱耳日。据统计,在我国每年有3.5万的新生儿在出生前就被夺去了听力,加上迟发性和药物聋儿,这个数字达到了6万之多。 “并不是只有耳聋残疾人才会生育聋儿。临床数据显示,90%的聋儿的父母是听力正常的。 100个听力正常人中,就有6个人存在耳聋基因缺陷,如果同一类型的耳聋缺陷
万人基因筛查,预测疾病风险
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/8/505855.shtm
体温筛查——门式人体筛查测温仪
u 红外人体测温,真人发音报警,提示体温异常,有效防止规模性疾病传染; u 多区位设计:有6,8,12,16,18,24,33等区位设计(需定制) u 内置电源:不怕停电,或者临时户外不插电使用,可连续使用2-8小时(需定制) u 防水:雨天户外可以照样使用;((需定制) 操作方式:
肿瘤筛查,究竟应该怎么查?
过去一年,转化医学网通过采访多位肿瘤专家,均得到一致的结论:肿瘤筛查过程中早发现,早诊断, 至少三分之一的癌症基本都是可以治愈的。因此,癌症早期发现、早期诊断、早期治疗很重要!谈“癌”色变是人普遍的生理反应,世界卫生组织(WHO)报道,全世界每年新发现癌症病人约1200万,死亡600万,平均每天有1
孕期TORCH筛查!
据不完全统计,我国TORCH感染率呈逐年上升的趋势,是导致孕妈妈流产、早产、死胎等不良妊娠结局的重要原因之一。因此,对具有高危因素的女性进行筛查至关重要。但很多备孕期的女性或者孕妇对TORCH的理解不是很全面,今天带领大家一起认识下。一、TORCH不是单纯的一种病毒 TORCH是由一组病原
无创产前基因筛查有了“河北模式”
11月15日,最新一期的《中国妇幼保健》杂志以专题形式报道了河北省人民医院主任医师高健等人关于河北省无创产前基因检测民生项目相关研究成果。此项成果涉及河北省无创产前基因筛查模式的理论和实践、项目的卫生经济学效益评估以及无创产前基因检测性能分析等多个方面。 据文章介绍,河北省是全国第一个在全省范
基因组筛查:健康保健的未来?
当Dana Atkinson回忆起今年1月接到的那通电话时,她开始哭了起来。那通电话给她和孩子的未来蒙上了阴影。 38岁的Atkinson是一名护士,在位于美国萨斯奎哈纳河岸附近的杰辛格医疗中心工作。数月前,在一次常规的医疗检查期间,一名实验室技术员从她身上抽了一小瓶血。征得Atkinson的
定量PCR熔解曲线为何不止一个主峰
最主要的原因:1.有非特异性产物2. 有引物2聚体。建议你重新设计引物。而且目前SYBR GREEN的方法已经逐渐被淘汰了,最好改用probe-primer 的方法来做。
农业领域中的应用高分辨熔解曲线分析技术
高分辨熔解曲线分析技术(High Resolution Melting Curves Analysis)是近年来发展起来的一种检测基因突变和刷选SNP的新方法。这种方法也可以与标记和非标记探针结合对已知位点的突变和SNP进行检测以及用于SSR(STR)等短串联重复分子标记分析。该技术已经被大
定量PCR熔解曲线为何不止一个主峰
1.引物设计不够优化。应避免引物二聚体和发夹结构的出现。2.引物浓度不佳。适当降低引物的浓度,并注意上下游引物的浓度配比。3.镁离子浓度过高。适当降低镁离子浓度,或选择更合适的mix试剂盒。4.模板有基因组的污染。RNA提取过程中避免DNA的引入,或通过引物设计避免非特异扩增。
多个序列突变的筛查HRMA(三)
前序列筛查 使用HRMA进行前序列筛查,特别是对于大基因可以节省很大的成本;Provaznikova 等[2008]报道对于MYH9基因可以避免85%的测序。在例中的DMD基因,第79个外显子需要分析(Al-Momani 等),假定每个外显子测序需要10欧元,筛查一个患者总共需要8
结直肠癌筛查指南更新-筛查年龄有调整
近日,ACS更新了结直肠癌筛查指南建议,筛查建议显示,对于平均风险的人群,建议结直肠癌筛查从 45 岁开始,而不是 50 岁。 研究显示,直肠癌发病率增加尤为显着,在1991~2014年之间翻了一番,20~49岁人群发病率翻了一倍(2.6/10万~5.2/10万)。 最近分析发现,1990年
多个序列突变的筛查HRMA(一)
摘要:双链DNA分子转化为两个单链分子,DNA分子变性或熔解用于研究DNA结构和组成已经有多年。最近,新技术的进步提高了这种技术的潜力,尤其是用于DNA序列突变的检测。通过饱和DNA染料的发展和设备的改善,熔解的灵敏度和特异性有了很大的提高(改良的温度精确地结合每个时间单位温度的精确测量)。熔解分析
筛查高危型HPV
2018年,WHO呼吁所有国家采取行动:2030年全球消除宫颈癌。宫颈癌之所以能成为人类即将战胜的第一种恶性肿瘤,是因为在2008年,豪森教授发现人乳头瘤病毒(HPV)与宫颈癌发生密切相关并获得诺贝尔医学奖。随着HPV疫苗的问世以及宫颈癌筛查的普及,未来宫颈癌的发生率和死亡率将显著下降。 目前,建
视力筛查仪简介
视力筛查是早期儿童弱视的最主要检测手段,该类仪器具有客观、准确、快速等优点。自动、无操作性,其距离14英寸(35厘米)按一个按钮就可进行检查了,快速而有效,5秒钟可完成双眼自动测试。 正常值编辑 弱视只发生在单眼视病人,若交替使用两眼者不会发生弱视。 临床意义 异常结果一部分患儿检出患有
多种药物筛查方法
药物筛查是针对特定的要求和目的,通过适当的方法和技术,主要的技术有基因组学、蛋白质组学、代谢组学、计算生物学、生物芯片技术、微流控芯片技术等方法,在一定的可选择范围内,进行药物优选的过程。因此,药物筛选包括新药研究过程中的处方筛选,根据特定目的选择符合要求的药物。药物筛查方法色谱柱:MEGA-1 m
什么是产前筛查?
什么是产前筛查? 通过经济、操作简便、安全性佳、风险性低,准确性高,监测面广,可行性强、依从性好的无创的生化或超声检测方法,查找出患有某种严重遗传病症相对高风险的个体,建议进行相应的咨询和诊断措施。确诊后给予病人帮助和支持以决定是否继续妊娠和采取相应的措施,从而最大限度地减少异常胎儿的