SEA链交换扩增技术检测单增李斯特菌的性能指标

基于变性泡介导的链交换扩增技术(Strand Exchange Amplification, SEA)是我公司自主知识产权的新一代等温核酸检测技术,具有简单、快捷、经济、高特异性、高灵敏度,高扩展性等特点,在医疗健康、食品安全、检验检疫、环境监测、动物疫病等领域具有广阔的应用前景。 单核增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)是一种常见的土壤细菌,在土壤中它是一种腐生菌,以死亡的和正在腐烂的有机物为食。它也是某些食物(主要是鲜奶产品)中的一种污染物,能引起严重食物中毒。单核细胞增生李斯特氏菌是一种人畜共患病的病原菌。它能引起人、畜的李氏特菌病,感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多,严重威胁人类的健康,因此单增李斯特菌在食品中的检测尤为重要。 应用SEA技术以单增李斯特菌为研究对象,本团队开发了检测单增的核酸快速检测试剂盒,并将研究结果发表在Anal,Biochem.2018, 545: 3......阅读全文

SEA链交换扩增技术检测单增李斯特菌的性能指标

基于变性泡介导的链交换扩增技术(Strand Exchange Amplification, SEA)是我公司自主知识产权的新一代等温核酸检测技术,具有简单、快捷、经济、高特异性、高灵敏度,高扩展性等特点,在医疗健康、食品安全、检验检疫、环境监测、动物疫病等领域具有广阔的应用前景。 单核增生

单核细胞增生李斯特菌的增菌检测方法!

单核细胞增生李斯特菌的增菌检测方法1、在225mL的Fraser基础肉汤中分别加入2.25mL无菌氯化锂溶液、0J3mL尤菌萘啶酮酸钠盐溶液、1.12mL无菌吖啶黄溶液和2.25mL无菌柠檬酸铁铵溶液(详见附 录1中培养基及其无菌添加物)。混合后制成50%的Fraser肉汤,加人样品后置于30C 培

李斯特菌检测技术应用概述

本文比较分析了国内外李斯特菌的检测方法、不同标准限量值的差异。介绍了国内外李斯特菌快速检测技术的应用及存在的问题,对我国微生物快速检测的现状进行了概述,探讨了李斯特菌快速检测技术的未来发展方向,对李斯特菌检验方法探索及快速检测技术的发展具有一定的借鉴意义。 李斯特菌(Listeria

常见的李斯特菌快速检测技术

李斯特菌快速检测方法为增菌以后,生化鉴定之前,对样本进行快速筛选,以缩小检测范围,减少检测任务,提高检测效率。常见的李斯特菌快速技术有: 1即用培养技术即用培养基技术则省掉了前期准备工作,可以直接检测样品,从而节约了大量人力成本。目前,商业化的固定培养基技术主要有两种:纸片法和即用平皿法。纸片法是指

美FDA发布修订控制即食食品中单增李斯特菌措施指南

  2017年1月13日,美国食品药品监督管理局(FDA)发布修订控制即食食品中单增李斯特菌措施的指南文件。2017年1月17日开始接受对于该通报的评价建议,评议时间为180天。  单增李斯特氏菌是一种环境病原体,它可以污染食物引起人类胃肠道炎症。鉴于即食食品中单增李斯特菌能够在低温、冷藏环境下生长

核酸扩增—链置换扩增技术(SDA)

  SDA是一种基于酶促反应的DNA体外等温扩增技术,采用标记的两种不同荧光基团的探针。在SDA过程中,该探针被掺入到双链扩增产物中,由限制内切酶的酶切使淬灭基团与荧光基团分开,从而释放荧光,用荧光偏振检测法定量检测。SDA较之PCR有更高的扩增效率,耗时仅30min。其基本系统包括一种限制性核酸内

单核细胞增生李斯特氏菌的分子生物学检测方法

  随着核酸探针杂交技术的应用,使对单核细胞增生性李斯特氏菌的检测进入了分子水平。  1、探针检测技术  这一技术是最早应用于李斯特氏菌检测的分子生物学技术。早在1988年,Atin 等就克隆出李斯特氏菌β溶血素基因的一个500bp DNA 片断并测序,以此序列合成4种寡核苷酸探针,以32P 标记该

单核细胞增生李斯特菌感染检测方法大盘点

单核细胞增生性李斯特菌 (L.monocytogenes)属于李斯特菌属(Listeria), 是一种人兽共患的病原菌,能引起人和多种动物共患的李斯特菌病。李斯特菌在自然界广泛存在,食品中存在的单核细胞增生性李斯特菌对人类的安全具有危险, 并被列为 21 世纪对中国人卫生健康具有重大影响的

SEA技术助力微流控芯片在快检领域的应用

微流控芯片技术是把生物、化学、医学分析过程的样品制备、反应、分离、检测等基本操作单元集成到一块微米尺度的芯片上,自动完成分析过程,可以实现从样品处理到检测的微型化、自动化、集成化及便携化,承载传统生物实验室和化学实验室的功能,具有强大的发展活力,并在即时检验领域(POCT)有美好的应用前景。体外诊断

酶标抗体法—致病微生物检测的介绍

  不论是在发展中国家还是发达国家,对食品安全影响较大的是致病微生物引起的食源性疾病,而在人们食物链中,单增李斯特菌、空肠弯曲菌、沙门氏菌都是重要的食源性致病菌。已建立检测沙门氏菌的双抗夹心ELISA法,检测单增李斯特菌的ELISA法,耐热菌间接竞争ELISA快速检测方法等。

显色培养基在单核细胞增生李斯特菌快速检测中

作者:张淑红,吴清平,张菊梅作者单位:广东环凯微生物科技有限公司,广州510070;2.广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室,广州510070[摘要] 目的:研究显色培养基对单核细胞增生李斯特菌的检测效果,探讨建立新型快速检测方法。方法:检测按国标GB4789—33程序进行。结果:人工污

单链DNA探针技术简介

用双链探针杂交检测另一个远缘DNA时,探针序列与被检测序列间有很多错配。而两条探针互补链之间的配对却十分稳定,即形成自身的无效杂交,结果使检测效率下降。采用单链探针则可解决这一问题。单链DNA探针的合成方法主要有下列两种:(1) 以M13载体衍生序列为模板,用Klenow片段合成单链探针; (2)

显色培养基在单核细胞增生李斯特菌快速检测中应用研究

作者:张淑红,吴清平,张菊梅作者单位:广东环凯微生物科技有限公司,广州510070;2.广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室,广州510070 [摘要] 目的:研究显色培养基对单核细胞增生李斯特菌的检测效果,探讨建立新型快速检测方法。方法:检测按国标GB4789—33程序进行。结果:人工

生物芯片技术在食源性致病微生物检测-面的应用

  许多常见微生物如水产品中的霍乱弧菌、副溶血弧菌,奶制品、禽肉及其制品中的单增李斯特菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157,炭疽杆菌、绿脓杆菌、结核杆菌、SARS病毒、禽流感病毒等均可污染食品而导致多种疾病的爆发与流行,严重威胁着人类的健康。  目前食源性病毒检测方法主要包括传统方法(主要

单增李氏菌的致病性与毒力机理

1.寄生物介导的细胞内增生,使它附着及进入肠细胞与巨噬细胞。2.抗活化的巨噬细胞,单增李氏菌有细菌性过氧化物歧化酶,使它能抗活化巨噬细胞内的过氧物(为杀菌的毒性游离基团)分解。3.溶血素,即李斯特杆菌溶血素O,可以从培养物上清液中获得,为SH活化的细胞溶素,有α和β两种,为毒力因子。

用噬菌粒载体制备单链DNA

实验方法原理 噬菌粒巧妙地组合了质粒和丝状噬菌体的特征。除了基本特征外,这些质粒通常是高拷贝数的,并带有一个修饰后的丝状噬菌体的主要基因间区。这个区域 ( 野生型为 508 bp)不表达蛋白,但含有全部的顺式作用序列,该作用是病毒 DNA 合成起始和结束及噬菌体颗粒的形态发生必不可少的。实验材料

用噬菌粒载体制备单链DNA

            实验方法原理 噬菌粒巧妙地组合了质粒和丝状噬菌体的特征。除了基本特征外,这些质粒通常是高拷贝数的,并带有一个修饰后的丝状噬菌体的主要基因间区。这个区域 ( 野生型为 508 bp)不表达蛋白,但含有全部的顺式作用序列,该作用是病毒 DNA

用噬菌粒载体制备单链DNA

噬菌粒巧妙地组合了质粒和丝状噬菌体的特征。除了基本特征外,这些质粒通常是高拷贝数的,并带有一个修饰后的丝状噬菌体的主要基因间区。这个区域 ( 野生型为 508 bp)不表达蛋白,但含有全部的顺式作用序列,该作用是病毒 DNA 合成起始和结束及噬菌体颗粒的形态发生必不可少的。本实验来源「分子克隆实验指

李斯特菌的概况

国际上公认的李斯特菌共有十个菌株:1.单核细胞增生李斯特菌(L.monocytogenes)2.绵羊李斯特菌 (L.iuanuii)3.英诺克李斯特菌(L.innocua)4.威尔斯李斯特菌(L.welshimeri)5.西尔李斯特菌 (L.seeligeri)6.格氏李斯特菌(L.grayi)7.

李斯特菌的特点

1.分布广:存在于土壤、水域(地表水、污水、废水)、昆虫、植物、蔬菜、鱼、鸟、野生动物、家禽。2.生存环境可塑性大:能在2-42℃下生存(也有报道0℃能缓慢生长)能在冰箱冷藏室内较长时间生长繁殖。3.适应范围大:酸性、碱性条件下都适应。4.带菌较高的食品有:牛奶和乳制品;肉类(特别是牛肉);蔬菜;沙

李斯特菌疫情爆发:为何这种疫情会在十年内变得更少?

  2019年6月在英国爆发的一次李斯特菌疫情感染了9人,同时引起了其中5人死亡,这种致病菌是患者通过在英格兰的7家医院摄入三明治和沙拉进行传播的,研究人员在肉类供应商的样品中检出了单核细胞增生李斯特氏菌(单增李斯特氏菌)。感染李斯特菌的患者会发生李斯特菌病,这对于孕妇、免疫功能低下及老年人都有危险

肠道菌增菌肉汤

成分  蛋白胨1      10g  葡萄糖      5g  牛胆盐      20g  磷酸氢二钠    8g  磷酸二氢钾    2g  煌绿       0.015g  蒸馏水      1000mL  pH7.2制法  按上述成分配好,加热使溶解,校正pH。分装每瓶30mL,115℃高压灭

荷兰出口冷藏奶酪检测出李斯特菌

  据欧盟食品饲料类快速预警系统(RASFF)消息,2020年3月18日,荷兰通过RASFF通报本国出口的冷藏奶酪不合格,因为这些产品受到了李斯特菌的污染。  根据本次通报,产品出口至了比利时和法国,目前已从收货人处撤回。  李斯特菌感染症状包括:恶心、呕吐、腹泻等轻微类似感冒症状,严重时会出现脑膜

单-链-抗-体-的-噬-菌-体-展-示-技-术

实验步骤 基 本 方 案 1 全套单链抗体噬菌体载体的构建材 料新鲜分离的小鼠脾脏或者 IO7 杂 交 瘤 细 胞(单 元 1*3)R N A 提取试剂R T -P C R 试剂D E P C 水寡 核 苷 酸 引 物(表 14. 3.1)DNA marker琼脂糖胶回收试剂盒(Qiaquick G

控制食品中李斯特菌的有效工具

李斯特菌广泛存在于食品中,如不慎食用可致中毒事件的发生。而3M公司的Petrifilm测试片可快速检测、控制食品、环境中的李斯特菌。 单增李斯特菌广泛地存在于自然界中,能耐受较高的渗透压,不易被冻融,在土壤、地表水、污水、废水、植物、青储饲料、烂菜中均有该菌存在。据报道,健康人粪便中单增李

单核细胞增生李斯特氏菌核酸检测试剂盒(一管式PCR荧..

单核细胞增生李斯特氏菌核酸检测试剂盒(一管式PCR-荧光探针法)使用说明说明致病菌检测系列可针对食品、饲料等样品中的致病微生物的特异核酸片段进行扩增,仪器实时监测扩增过程中的荧光信号变化,自动判读结果。本产品用于单核细胞增生李斯特氏菌的检测。检出限为103 CFU/ml。◆ 产品组成(96测试)01

志贺菌属核酸扩增法的检测介绍

  核酸扩增技术,即聚合酶链式反应(polymerase chainreaction,PCR),其基本原理是设计、合成两条寡核苷酸,作为引物,对应于待测病原微生物某一段特异性序列的两端,然后在体外模拟DNA体内复制的过程反复扩增,使靶序列放大上万倍甚至上百万倍而被检测出来。

酶触反应的主要应用

它的原理是细菌在繁殖过程中可合成并释放某些特异性酶,按酶的特性,选用相应的底物和指示剂将这些其配制在相关的选择性培养基中,根据细菌培养后培基的颜色变化,确定待分离的可疑菌株。这种技术是将传统的细菌分离与生化反应有机的结合起来,这样有助于细菌的快速鉴定。          主要应用:        

DNA扩增检测技术的应用

在药物的分析和研究,以及控制药物质量等方面有着广泛应用的药物分析检测技术,可以采用物理、化学等方式对药物进行系统的分析,并结合现代化学、光谱、色谱等技术对药品进行研究。DNA扩增检测技是现代生物学重大发现之一,也是现代药物分析中快速检测技术之一。作为人体生命的重要物质,核酸和蛋白的异常表达往往与癌症

如何有效预防李斯特菌病诱发的人类死亡?

  最近在南非出现了有史以来人类历史记录上最大的李斯特菌食源性疾病暴发事件,据最新数据显示,目前已经有852例确诊病例,42%的患者都是出生不到一个月的婴儿,而且已经有107名患儿死亡。图片来源于网络  李斯特菌是一种可怕的细菌,因为其在我们的冰箱中都可以找到,2008年暴发了加拿大最著名的李斯特菌