利用“无创”技术检测活细胞中荧光蛋白表达(三)
细胞混合结果在本次实验中,我们在一个96孔板里混合了多种细胞,保证每个孔大约50,000个细胞。因此,如果是1:1混合,那么每种细胞会有25,000个。如果是1:1:1混合,那么每种细胞将有16,700个。实验板分别用480/510nm(AsGFP和ZsGreen的优化结果)和550/588nm(DsRed设置)的激发和发射来检测。观察到的RFU值与预测值接近。结果总结如下。结果显示,AsGFP和ZsGreen可以和DsRed一起检测,反之亦然。(见图表4)结论Molecular Devices公司的荧光功能微孔板读板机可以检测完整贴壁细胞中的荧光蛋白。波长扫描可调的功能可以优化每一种独特荧光染料的波长结果。底读模式提供最佳检测灵敏度,顶读模式也可以提供可利用的数据,尤其是对含有ZsGreen和DsRed的细胞系。顶读模式检测DsRed细胞系时,可以通过替换无色培养基来达到优化实验结果的目的。......阅读全文
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(三)
细胞骨架如微管、微丝等一直是生命科学研究的重点。近期Johnsson等科学家将SiR直接标记于与微管和微丝分别特异性结合的小分子docetaxel和jasplakinolide,即形成SiR-tubulin和SiR-actin,实现了在不对细胞或组织进行任何转染或基因组修饰的条件下直接进行活细胞成像
无需活细胞的蛋白合成新技术
来自美国能源部橡树岭国家实验室(Oak Ridge National Laboratory)的研究人员研发出了一种无需细胞培养,人工合成蛋白质的新系统,这一研究成果公布在12月22日的Small杂志上。 这个生物反应器采用的是一种混合液,其中包含有大肠杆菌细胞提取物,一种绿色荧光蛋白DNA编码
无需活细胞的蛋白合成新技术
来自美国能源部橡树岭国家实验室(Oak Ridge National Laboratory)的研究人员研发出了一种无需细胞培养,人工合成蛋白质的新系统,这一研究成果公布在12月22日的Small杂志上。 这个生物反应器采用的是一种混合液,其中包含有大肠杆菌细胞提取物,一种绿色荧光蛋白DNA编码
美国Sequenom公司开发无创孕期癌症检测技术
美国Sequenom公司长期以来一直依靠其无创性产前诊断来驱动增长和规模扩增。但如今,该公司推出了全新产品MaterniT21,该产品能够测试孕妇患癌的情况。这一潜在的改变将使Sequenom扩张其市场范围。 这个位于加州圣地亚哥的公司表示,MaterniT21通过检测孕妇外周血样本可以实现同
什么是活细胞荧光
没有听说过这个术语,不过应该很好猜测,就是用荧光技术标记活细胞,可以是只有活细胞才能吸收的荧光物质,该物质被活细胞吸收后,该活细胞就发出荧光可用于观测了。而死细胞不吸收就观测不到荧光,可以区分细胞死活。
体内无细胞DNA的表达
对于一些由缺乏三种特定蛋白质的基因突变引起的疾病(如Leber先天性黑蒙和血友病),直接的想法是将能够表达相关蛋白质的基因“播种”到体内,而不是“种”到基因组中,但在细胞质中自由表达。最典型的例子是几种批准的病毒转染基因疗法(如FDA批准的用于治疗遗传性眼病的基因药物“Luxturna”)。这种方法
无创产前技术概述(一)
什么是无创产前基因检测无创产前基因检测技术全球统称为NIPT(Noninvasive prenatal test),主要是通过采集5毫升的孕妇外周血,从血浆中把游离的DNA提取出来,经过高通量的测序和生物信息学的分析,得出胎儿患染色体异常的疾病风险率的一项技术。这项检测技术可以检测胎儿全部的
动物无创血压测量技术
在过去20年中,研究科学家们一直在寻找更加精确的无创测量小鼠或大鼠血压的方法。 更加精确的用无创的方法测量啮齿动物的收缩压、舒张压、心率、和其他一些血流的参数,对于临床研究是很有价值的。 有创方法测量血压 有创血压是评价无创血压的金标准。当评价无创血压时,有创血压的测量是从动物颈动脉测量的。 利用遥
无创产前技术概述(二)
此外,在全球领域,华大基因发表文章的数量也是遥遥领先的,与此同时,我们也对百万孕妇进行了地域、种族、年龄分布的分析,甚至发现孕妇体内包含的一些其他的DNA信息进行的大数据的分析,其中在孕妇的耳聋基因携带率,从北向南呈现了递减。随着无创产前技术在出生领域发挥得越来越重要的作用,我们在2016年3月20
无标记活细胞动态分析技术在神经生物学方面的应用-三
上图为悬浮培养的神经球增殖实验。通过降低载物台的移动速度和加速度,减少震动对体系的影响,悬浮细胞同样能进行成像和分析。实验结果表明,给药处理后显著抑制了神经球的增殖。 六、相差和荧光分析的结合除了在相差图片上的无标记分析外,Cell-IQ还提供了3种荧光通道,多达30多种荧光滤片的选择,可以满足绝大
新技术同时检测基因和蛋白表达
美国俄亥俄州立大学的研究人员近日开发出一种新技术,能同时观察细胞中的基因数量和蛋白表达。此技术能够详细分析基因状态以及相应蛋白表达之间的关联,并更透彻地了解癌症及其他复杂疾病。该成果发表在《Neuro-Oncology》上。 这种新技术称为荧光原位基因蛋白分析(fluorescent in
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量蛋白质分子中关键活性部位氨基酸残基的改变,会影响其生理功能,甚至造成分子病(molecular disease)。例如镰状细胞贫血,就是由于血红蛋白分子中两个β亚基第6位正常的谷氨酸变异成了缬氨酸,从酸性氨基酸换成了中性支链氨基酸,降低了血红蛋白在红细胞中的溶解度,使
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量蛋白质分子中关键活性部位氨基酸残基的改变,会影响其生理功能,甚至造成分子病(molecular disease)。例如镰状细胞贫血,就是由于血红蛋白分子中两个β亚基第6位正常的谷氨酸变异成了缬氨酸,从酸性氨基酸换成了中性支链氨基酸,降低了血红蛋白在红细胞中的溶解度,使
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量蛋白质分子中关键活性部位氨基酸残基的改变,会影响其生理功能,甚至造成分子病(molecular disease)。例如镰状细胞贫血,就是由于血红蛋白分子中两个β亚基第6位正常的谷氨酸变异成了缬氨酸,从酸性氨基酸换成了中性支链氨基酸,降低了血红蛋白在红细胞中的溶解度,使
哪些实验方法可检测细胞中某种蛋白表达量
蛋白质分子中关键活性部位氨基酸残基的改变,会影响其生理功能,甚至造成分子病(molecular disease)。例如镰状细胞贫血,就是由于血红蛋白分子中两个β亚基第6位正常的谷氨酸变异成了缬氨酸,从酸性氨基酸换成了中性支链氨基酸,降低了血红蛋白在红细胞中的溶解度,使它在红细胞中随血流至氧分压低的外
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量蛋白质分子中关键活性部位氨基酸残基的改变,会影响其生理功能,甚至造成分子病(molecular disease)。例如镰状细胞贫血,就是由于血红蛋白分子中两个β亚基第6位正常的谷氨酸变异成了缬氨酸,从酸性氨基酸换成了中性支链氨基酸,降低了血红蛋白在红细胞中的溶解度,使
突破!研究团队攻克荧光蛋白和染料在活细胞成像中的局限
近日,我所生物技术研究部分子探针与荧光成像研究组(1818组)徐兆超研究员、苗露副研究员团队通过调控荧光蛋白与荧光染料之间的荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer,FRET),提高了荧光蛋白的光稳定性,并基于化学遗传学策略赋予外源荧光染料遗传编
单细胞测序技术应用于癌症无创诊断
2013年12月10日著名学术期刊美国《国家科学院院刊》(Proceedings of the National Academy of Sciences USA)在线发表了北京大学生命科学学院生物动态光学成像中心谢晓亮、白凡课题组与北大肿瘤医院王洁团队合作的研究结果。在题为“Reprod
医工交叉团队成功研发无创血糖检测技术
上海交通大学医学院附属瑞金医院教授王卫庆团队、研究员陈昌团队合作提出一种无创血糖检测技术,即多重微空间偏移拉曼散射(mμSORS)光谱技术,只需将手掌轻轻贴在检测设备上,就能准确测量血糖水平。2月5日,相关研究发表于《自然—代谢》。全球糖尿病患者已超过5亿人,我国成人糖尿病患病率高达12%,糖尿病已
科学家开发新型无创产前基因检测技术
贝勒医学院、德雷克赛尔大学医学院、德克萨斯儿童医院以及RareCyte公司的研究人员近日在《Prenatal Diagnosis》杂志表明,基于母体血液中罕见胎儿细胞的无创产前基因检测是可行的,他们估计,这种方法将在未来1至2年内向公众开放。 本文资深作者Arthur Beaudet博士说,“
基于DNA检测技术的无创产检再获突破
美国最新一期《临床化学》杂志刊登香港中文大学医学院教授赵慧君团队的研究成果:通过抽取孕妇血液即可检测出胎儿遗传自父母的多种单基因变异,有些变异甚至可提前到孕6周测出。赵慧君教授5日接受记者采访时表示,新检测方法不但更安全,操作也大大简化,几乎一般有分子分析经验的医院病理室都可开展,抽血一到两周后
贝瑞和康发表无创基因检测cSMART技术
贝瑞和康与中南大学湘雅医学院医学遗传学国家重点实验室及湖南家辉遗传专科医院合作,采用自主研发的cSMART技术,对无创单基因疾病和无创肿瘤突变检测的研究取得突破性进展。一部分成果在经过国际专家评定之后,发表于本月的Clinical Chemistry杂志。 cSMART技术是贝瑞和康独立自主研
无创产前检测技术(NIPT)应用与研究进展
NIPT检测染色体微缺失微重复是近来热议焦点,美国妇产科医师学会(ACOG)不建议NIPT常规用于染色体微缺失综合征;国际产前诊断学会(ISPD)认为,检测应限于临床意义明确的严重表型类别,同时配套专业咨询;欧洲人类遗传学学会-美国人类遗传学学会(ESHG-ASHG)尚不推荐扩大NIPT检测适应证,
基因检测中活细胞检测和血液检测的区别
基因检测中活细胞检测和血液检测的区别基因检测就是通过血液、其他体液或细胞对DNA进行检测的技术,是取被检测者脱落的口腔黏膜细胞或其他组织细胞,扩增其基因信息后,通过特定设备对被检测者细胞中的DNA分子信息作检测,预知身体患疾病的风险,分析它所含有的各种基因情况,从而使人们能了解自己的基因信息,从而通
BioTechniques:无细胞表达究竟哪家强?
无细胞表达系统让研究人员能够快速生成蛋白质,从而受到人们的青睐。来自真核细胞的裂解物能够对蛋白质进行翻译后修饰,但不同翻译系统的细微差别也会导致蛋白生产的变化。无细胞表达究竟哪家强?亚利桑那州立大学的研究人员近日在《BioTechniques》上发表了他们的比较结果。 在目前的无细胞蛋白合成而
BioTechniques:无细胞表达究竟哪家强?
无细胞表达系统让研究人员能够快速生成蛋白质,从而受到人们的青睐。来自真核细胞的裂解物能够对蛋白质进行翻译后修饰,但不同翻译系统的细微差别也会导致蛋白生产的变化。无细胞表达究竟哪家强?亚利桑那州立大学的研究人员近日在《BioTechniques》上发表了他们的比较结果。 在目前的无细胞蛋白合成而
流式中检测细胞表面和细胞内蛋白表达水平的抗体有何...
流式中检测细胞表面和细胞内蛋白表达水平的抗体有何区别?抗体只是针对相应抗原的,至于是针对胞内还是胞膜对你检测来说并无明显影响,你只需要查清楚到底是针对哪一个部位的抗原的,应该是可以用同一种抗体进行检测的,在流式操作时只需注意:如果是针对胞内,则需要加破膜剂,让抗体能和相应抗原接触,否则就不需要了。
表达蛋白检测实验
实验方法原理 当重组病毒通过噬斑纯化和扩增后,免疫印迹可用于鉴定重组蛋白,并检测其是否有预期的大小以及是否从感染细胞中分泌。下面的步骤是介绍检测非分泌性(细胞内)蛋白的,如果重组蛋白是分泌到培养基中的,可按注解中的步骤操作。实验材料 生长至汇片的单层 BS-C-1 细胞重组痘苗病毒储液试剂、试剂盒
表达蛋白检测实验
免疫印迹法 免疫沉淀法 点印迹法 实验方法原理 当重组病毒通过噬斑纯化和扩增后,免疫印迹可用于鉴定重组蛋白,并检测其是否有预期的大小以及是
SpectraMax-M系列微孔板读板机应用集锦(二)
软件验证对于在GLP或GMP实验室工作的科研人员,SoftMax Pro软件验证方案提供了最为全面的记录文档和可用于验证GxP管理员功能,软件运行和分析能力的工具。- 验证时间从6个月降低到3天支持平行线分析,4-P和5-P曲线拟合验证- 全面复杂的针对常规实验计算的检测- 即时可用于OQ验证检测的