突破!研究团队攻克荧光蛋白和染料在活细胞成像中的局限
近日,我所生物技术研究部分子探针与荧光成像研究组(1818组)徐兆超研究员、苗露副研究员团队通过调控荧光蛋白与荧光染料之间的荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer,FRET),提高了荧光蛋白的光稳定性,并基于化学遗传学策略赋予外源荧光染料遗传编码荧光,解决了荧光染料因非特异性标记而产生背景荧光信号的问题,协同提高了荧光蛋白和染料在活细胞成像中对靶蛋白标记和成像的性能。荧光蛋白和荧光染料是分子探针和生物成像中的两种主要荧光团,但各自存在发光和应用上的局限。荧光蛋白因遗传编码的属性具有专一靶向性和优良生物相容性,但其光稳定性较差,且结构改造困难;而荧光染料则在光稳定性和光谱多样性上具有优势,但作为外源物质在细胞内的靶向性较差,且难以精确控制染料分子在细胞内的定位和数量,存在背景荧光干扰的问题。研究团队提出了一种化学遗传策略,将合成染料与遗传编码荧光蛋白通过FRET机制相结合,使......阅读全文
全自动活细胞实时荧光成像系统概述
全自动活细胞实时荧光成像系统是一种用于生物学领域的分析仪器,于2018年12月11日启用。 1、显微镜采用全封闭箱式设计,并可通过机身TFT触摸屏进行自动进样,调用预设实验程序自动进行成像实验。 2、全自动成像方式,无需任何手动调节即可实现普通明场、斜照明和高衬度浮雕效果PGC成像,并可在荧
突破!研究团队攻克荧光蛋白和染料在活细胞成像中的局限
近日,我所生物技术研究部分子探针与荧光成像研究组(1818组)徐兆超研究员、苗露副研究员团队通过调控荧光蛋白与荧光染料之间的荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer,FRET),提高了荧光蛋白的光稳定性,并基于化学遗传学策略赋予外源荧光染料遗传编
荧光响应型CRISPR荧光探针实现活细胞基因组高清成像
中国科学院动物研究所研究员李幸系统梳理并评述了荧光点亮响应型CRISPR成像探针在活细胞基因组DNA成像中的最新进展,为这一前沿领域提供了全面的技术概览与未来展望。相关论文在线发表于《细胞-化学生物学》。 在活细胞中原位解析基因组DNA的动态行为,对揭示染色质三维结构、DNA相互作用、基因表达
快速活细胞成像系统
快速活细胞成像系统是一种用于材料科学领域的大气探测仪器,于2019年7月13日启用。 技术指标 有效像素数量512×512,单位像素面积16μm×16μm,最大读出速率70-1000 fps,光电转换量子效率90%(峰值),模/数转换器16 bit(全频率),冷却温度-65℃至-100℃;固
活细胞成像技术活细胞工作站介绍
我们知道以往的固定组织揭示了非常多的自然秘密,给了我们很大的启示,现在的科学研究则向在最真实的条件下观察自然发展。纵观显微镜的历史,直到15年前,科学家主要还是处理死细胞。现在,活细胞的应用已经非常普及了。 加拿大McGill大学成像实验室主任Claire M.Brown表示,要达到这个研究目的,我
活细胞蛋白质标记与成像研究获进展
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/7/504935.shtm近日,华东理工大学光遗传学与合成生物学交叉学科研究中心杨弋、朱麟勇、陈显军团队在活细胞蛋白质标记与成像研究中取得重要进展,相关研究在《细胞发现》发表。 ?人造荧光蛋白及荧光
活细胞成像显微镜
活细胞成像显微镜是一种用于生物学领域的分析仪器,于2012年3月15日启用。 技术指标 固态光源SSI(含7条激发谱线),高精度电动载物台(X、Y:20nm,Z:5nm),CalSnapHQ2 CCD.EMCCD.湿控及CO2系统装置,自动对焦装置(焦距时间100ms,精度25nm)。10×
活细胞成像实验总结,必看!
近年来,活细胞成像活跃于生物学的各个领域。在它的加持下,研究者们可以实时或者在一段时间内观察细胞内部结构和细胞生理过程,从而加深对细胞运作过程的认识。但在各种实验操作和成像条件下,想要成功做好活细胞成像实验并不容易。1、实验前我们先了解一下,什么是活细胞成像,它有哪些作用?通常,我们把使用延时成像技
活细胞成像工作站
活细胞成像工作站是一种用于生物学领域的分析仪器,于2015年5月13日启用。 技术指标 1.三维液压微调控制系统:X-,Y-,Z-轴,移动范围最大10mm;操纵杆移动(X-,Y-轴):最大2mm;控制手移动:250um;规格:驱动单元、控制单元、万向节、磁性金属板等。2.显微操纵器粗调系统:
全自动活细胞实时荧光成像系统的主要功能
实验课题需要解决大量样本在活细胞状态下进行观察和成像的问题,并对细胞的图像进行深度分析,并对细胞现象进行背后的分子机理的解读和阐释。活细胞系统需要长时间观察下,光毒性要求最小,自动化程度高,同时具有一定的软件学习能力。
研究人员合成高性能荧光RNA实现活细胞RNA成像
2019年11月5日,华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室杨弋教授等在Nature Biotechnology(《自然—生物技术》)杂志上发表了封面学术论文,题为“Visualizing RNA dynamics in live cells with bright and stable fl
什么是活细胞荧光
没有听说过这个术语,不过应该很好猜测,就是用荧光技术标记活细胞,可以是只有活细胞才能吸收的荧光物质,该物质被活细胞吸收后,该活细胞就发出荧光可用于观测了。而死细胞不吸收就观测不到荧光,可以区分细胞死活。
机制“协同”提高荧光蛋白和荧光染料细胞成像性能
近日,中国科学院大连化学物理研究所研究员徐兆超、副研究员苗露团队通过调控荧光蛋白与荧光染料之间的荧光共振能量转移,提高了荧光蛋白的光稳定性,并基于化学遗传学策略赋予外源荧光染料遗传编码荧光,解决了荧光染料因非特异性标记而产生背景荧光信号的问题,协同提高了荧光蛋白和染料在活细胞成像中对靶蛋白标记和成像
酶标仪利用”无创”技术检测活细胞荧光蛋白
在过去的五年中,荧光蛋白在监测体内生物学研究中,起到越来越重要的作用。源于维多利亚多管发光水母中的绿色荧光蛋白(GFP)是zui早被我们应 用的荧光蛋白,但是随着时间的推移,现在我们可以使用的荧光蛋白种类也越加丰富,包括加强型的变异GFP蛋白、从其他种类水母中发现的荧光蛋白和珊瑚礁蛋 白。它们都可以
活细胞RNA成像技术获突破
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/9/509263.shtm
浅谈DeltaVision-Elite活细胞成像系统
我们知道以往的固定组织或固定细胞成像揭示了非常多的自然秘密,给了我们很大的启示,但现在的科学研究则希望在最真实的条件下观察细胞。纵观显微镜的发展历史,直到15年前,科学家主要还是处理死细胞。现在,活细胞研究的重要性已经越来越被意识到。加拿大McGill大学成像实验室主任Claire M. B
酶标仪利用”无创”技术检测活细胞荧光蛋白(二)
下一步就是要结合信号/背景优化结果确定最佳激发和发射波长。因为初步检测结果的斯托克顿位移偏小(22nm),显然是要通过降低激发波长和增大发射波长来扩大两者之间的差异,其次还需要找到合适的发射光阻隔滤片优化最佳灵敏度。最终,我们使用5 5 0nm的激发波长来激发, 同时使用570nm的发射光阻
酶标仪利用”无创”技术检测活细胞荧光蛋白(三)
在本次实验中,ZsGreen和DsRed细胞系在底读模式都有着相似的检测限,而且两者都比AcGFP细胞系的检测下限低3到4倍。本次实验一共重复了三次,但是DsRed实验结果并不是每次都能表现的足够好。在一次实验中,它的检测下限近似于AcGFP,但是在另一次实验中,它的检测下限又会很高。我们将这些区别
酶标仪利用”无创”技术检测活细胞荧光蛋白(一)
简介在过去的五年中,荧光蛋白在监测体内生物学研究中,起到越来越重要的作用。源于维多利亚多管发光水母中的绿色荧光蛋白(GFP)是最早被我们应用的荧光蛋白,但是随着时间的推移,现在我们可以使用的荧光蛋白种类也越加丰富,包括加强型的变异GFP蛋白、从其他种类水母中发现的荧光蛋白和珊瑚礁蛋白。它们都可以在众
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(一)
如何免除活细胞标记中的清洗(washout)步骤?SNAP-tag等标记方法为活细胞显微成像带来了革命性的变化,也因此被Nature杂志评为2004年最热门的科研技术之一。但是传统的SNAP-tag标记仍然有很大的缺陷。将带有荧光探针的底物BG加入细胞后需要多次清洗细胞,才能将未结合的BG去除从而消
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(三)
细胞骨架如微管、微丝等一直是生命科学研究的重点。近期Johnsson等科学家将SiR直接标记于与微管和微丝分别特异性结合的小分子docetaxel和jasplakinolide,即形成SiR-tubulin和SiR-actin,实现了在不对细胞或组织进行任何转染或基因组修饰的条件下直接进行活细胞成像
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(二)
图5.EGFR在细胞中转运的实时记录。(a)示意图,用于解释如何利用FAPL探针来实时追踪EGFR相关的细胞膜转运过程。(b)COS7细胞中表达的EGFR用DRBG-488标记(绿色),溶酶体用lysosometracker(红色)标记。(c)对表达SNAP-EGFR–CFP的MDCK细胞进行共聚焦
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(五)
SNAP-tag技术在STED超高分辨率显微成像中的应用近十年中,显微成像技术得到了飞跃的发展,填补光学显微镜(~200 nm)到电子显微镜(~0.1 nm)分辨率缺口,打破光学衍射极限的超高分辨率显微镜也越来越趋于成熟化。其中,德国马普研究所的Stefan Hell教授凭借其研发的受激发射
研究实现活细胞及线虫体内DNA和RNA的同步荧光成像
近期,中国科学院合肥物质科学研究院智能机械研究所智能微纳器件研究室研究员张忠平和王振洋领导的团队在生物体核酸结构的同步原位影像分析方面取得新进展,合成了一种具有高效生物膜穿透能力的阳离子碳量子点,实现了对活细胞及线虫体内DNA和RNA的同步荧光成像。相关研究成果发表在国际化学期刊《德国应用化学》
浙江大学250万采购多通道活细胞单分子荧光成像系统
近日浙江大学发布2022年7月采购意向,预计花费250万元采购多通道活细胞单分子荧光成像系统。多通道活细胞单分子荧光成像系统项目所在采购意向:浙江大学2022年7月政府采购意向采购单位:浙江大学采购项目名称:多通道活细胞单分子荧光成像系统预算金额:250.000000万元(人民币)采购品目:A021
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(四)
荧光显微镜在研究活细胞中蛋白质分子的定位、相互作用及动力学等生命活动中起着不可或缺的作用。将荧光蛋白如绿色荧光蛋白和目的蛋白融合表达,然后利用荧光蛋白发出的特异性荧光来观察和追踪目的蛋白分子在科学研究中得到了广泛的应用。但是荧光蛋白具有量子产量低、成熟速度受限、光谱容易受到环境因素影响及容易形成聚集
实时动态活细胞成像分析仪
实时动态活细胞成像分析仪是一种用于药学领域的医学科研仪器,于2019年9月25日启用。 技术指标 IncuCyte Zoom HD/2CLR的相差光源和荧光光源均为LED光源,有高灵敏度CCD成像系统及高清晰度光学元件,10倍物镜的成像分辨率为1.22µm/像素,像素1392×1040,输出
活细胞成像用哪种显微镜
活细胞成像可以选择共聚焦显微镜,共聚焦与传统显微镜的原理差别在于照明方式不同:传统显微镜是一次性照明整个视野中的样品,因此可以用眼睛直接观察或者用CCD获取图像,没有时间延迟;而共聚焦显微镜是逐点成像,无法用CCD获取图像,只能用探测器收集每个象素点的信号,再通过软件重构图像,有一定的时间延迟。共聚
活细胞成像和数据分析系统
活细胞成像和数据分析系统是一种用于生物学领域的分析仪器,于2018年11月26日启用。 技术指标 光源:IncuCyte Zoom HD/2CLR的相差光源和荧光光源均为LED光源。 物镜倍数:IncuCyte Zoom HD/2CLR的物镜倍数是4倍或10倍或20倍,可由用户自行更换。 成
光学磁扭仪和荧光诱导活细胞细胞核蛋白的分解
实验概要机械力在生物过程中发挥着显著作用。这些机械力可以通过骨架长丝网络传送到细胞,诱导胞浆内不同的生化反应。虽然已经有充足的报告显示,细胞质酶可被细胞表面的局部应力直接激活,但一直没有证据表明,机械力可以直接改变核功能,包括卡哈尔体蛋白质复合物的结构变化。本实验描述了通过利用磁场扭曲力改变,流式细