RFS细胞暴露实验程序的验证及颗粒物急性暴露毒性评价...

RFS细胞暴露实验程序的验证及颗粒物急性暴露毒性评价预测模型的优化项目合作单位德国军队药理学和毒理学研究所,慕尼黑SEH咨询服务,帕德博恩施特劳瓦尔特药理学与毒理学研究所,慕尼黑Cultex实验室有限公司,汉诺威由于工业和制药领域中对于松散固体颗粒的普遍使用使得空气中悬浮颗粒物的影响越来越重要。这些影响因可吸入颗粒物质的种类、粒径和浓度、以及疾病(甚至死亡)严重程度而不同。在欧盟范围内,欧盟REACH法规用以管理化学品的注册、评估、授权和限制(如有必要)。人们预先定义了一个测试策略,用于毒理学评价,该评估对可吸入物质(气体、气溶胶和颗粒物)暴露染毒实验的操作有较高的要求。然而,吸入暴露染毒毒性方面的数据往往不存在,或主要是基于动物实验的。人们对用于动物试验的动物数量的估计值差别很大(多达1000万只动物),其中大约1-2%(即10至20万只动物)用于急性吸入毒性试验。现在,REACH及其他监管措施急需动物实验的替代方法,但是在肺......阅读全文

丙二醇甲醚的暴露控制

丙二醇甲醚的暴露控制在空气中暴露极限:——ACGIH极限值(TLV):100ppm(TWA), 150ppm(STEL)通风系统:建议当地的系统和/或通常的蒸气浓度保持雇员暴露在空气极限之下。通常选择就地的蒸气通风设备,因为它能控制原料污染物的散发。阻止污染物扩散到工作区。请参考ACGIH文件,工业

治疗暴露性巩膜炎的简介

  1、关键问题在于立即消除闭合不全的现象,轻度闭合不一,白天戴用适当的防风眼镜,睡前于结膜囊内放置抗生素眼膏即可。  2、解除眼睑闭合不全的炎因,对于一些因眼球突出、眼肌麻痹引起的闭合不全,一时难以改善者,可考虑作永久性睑裂缝合。  3、全身性疾炎:除请有关科室协助治疗外,可考虑眶减压术。  4、

疫苗试验暴露HIV外壳致命弱点

20年来,研制一种AIDS疫苗一直是研究人员最大的目标。  艾滋病病毒(HIV)终于还是在研究人员面前暴露出了弱点,从而使得有效艾滋病(AIDS)疫苗向着现实又迈进了一步。   9月10日发表在《自然》杂志上的一篇论文揭示了一种疫苗如何让免疫系统抵御入侵的病毒,从而提供针对感染的保护

细胞划痕实验实验步骤

一.准备:所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)二.流程:1.先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。2.在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过一夜能铺

体外暴露染毒技术的优化设计应用于实验重复性的提高-1

1.简介:目前的体外暴露染毒研究中,受试物可在气液界面直接与细胞接触(Cultex),避免了传统浸没培养暴露中培养基成分对实验的干扰。在此气-液界面体外暴露染毒过程中的实验重复性(稳定性和再现性)取决于细胞体外暴露染毒技术及暴露系统的优化设计。 在文献中,我们常见到的受试物在气液界面直接与细胞暴露接

体外暴露染毒技术的优化设计应用于实验重复性的提高-2

图5 颗粒物沉积模式图 3.结果不同粒径及质量的颗粒物在两种不同暴露染毒模块内有不同的沉积结果。通常情况下,虽然粒子的理化性质及粒径大小可能会对颗粒沉积有影响,但在同一粒子的暴露结果可以看出,辐射流暴露染毒系统CULTEX RFS中三个位置暴露数据的具有更低的偏差和相对标准偏差,且相对标准偏差都

细胞计数实验

实验方法原理细胞悬液制备后,需要计算悬液中所含细胞数量;一般以细胞数/毫升表示。因只有健康的细胞才有活力,接种后能够生长增殖,所以在接种关应先检查一下细胞的活力。实验材料细胞悬液试剂、试剂盒台盘蓝酒精培养液仪器、耗材吸管实验步骤1.  计数板用96%酒精冲洗计数板后,用干净鹿皮擦净,另擦净盖片一张;

细胞划痕实验

材料:6孔板marker笔直尺20微升枪头(灭菌)无血清培养基PBS准备:所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)流程:1、先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀地划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。2、在空中加入约

细胞划痕实验

材料:6孔板marker笔直尺20微升枪头(灭菌)无血清培养基PBS准备:所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)流程:1、先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀地划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。2、在空中加入约

细胞计数实验

            实验方法原理 细胞悬液制备后,需要计算悬液中所含细胞数量;一般以细胞数/毫升表示。因只有健康的细胞才有活力,接种后能够生长增殖,所以在接种关应先检查一下细胞的活力。 实验材料

细胞传代实验

细胞培养技术 消化法             实验方法原理 培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代;部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代;悬浮生长

细胞凋亡实验

细胞凋亡(Apoptosis) 又称程序性细胞死亡(Programmed Cell Death,PCD)是指细胞基因调控的一种自主性的自杀现象。即是在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自主结束生命的死亡方式。凋亡一词最早是由年澳大利亚组织病理学家John Kerr通过研究大鼠肝左叶细胞死亡时,

细胞运送实验

实验方法原理 当前培养细胞既可可在国内相互寄赠,也可进行国际间的交流,为此要有运输细胞的方法。装运方法有两种:一是用液氮或干冰保存,效果较好,但需用特制容器如小液氮罐等,又因液氮和干冰蒸发均能较快,适于空运,比较麻烦;另为充液法,比较简便。实验材料 细胞试剂、试剂盒 培养液仪器、耗材 培养瓶实验步骤

细胞划痕实验

细胞划痕实验(Wound Healing)是一种操作简单,经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是,当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。基本的步骤包括“划痕”的制造,细胞迁移期间图像

细胞运送实验

充液法             实验方法原理 当前培养细胞既可可在国内相互寄赠,也可进行国际间的交流,为此要有运输细胞的方法。装运方法有两种:一是用液氮或干冰保存,效果较好,但需用特

细胞划痕实验

实验步骤一.准备:所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)二.流程:1.先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。2.在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过

细胞计数实验

实验原理 在细胞培养工作中,常需要了解细胞生活状态和鉴别细胞死活,确定细胞接种浓度和数量以及了解细胞存活率和增殖度,如用酶消化制备的细胞悬液中细胞活力的鉴别,冻存细胞复苏后的活力检测等。细胞悬液制备后,常用活体染料台盼蓝对细胞进行染色,进行细胞计数。台盼蓝不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着

细胞划痕实验

划痕法             实验方法原理 创伤愈合实验是一种简单、廉价的方法,也是最早发展起来的研究定向细胞在体外迁移的方法之一。该方法模拟了细胞在体内愈合过程中的迁移过程。基本

细胞计数实验

实验方法原理 显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上(又称计菌器),于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。目前国内外常用的计菌器有:血细胞计数板。Peteroff-Hauser 计菌器以及比 Hawksley 计菌器等,它们都可用于酵母、细菌

细胞传代实验

细胞培养技术 消化法             实验方法原理 培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代;部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代;悬浮生长

细胞计数实验

实验方法原理细胞悬液制备后,需要计算悬液中所含细胞数量;一般以细胞数/毫升表示。因只有健康的细胞才有活力,接种后能够生长增殖,所以在接种关应先检查一下细胞的活力。实验材料细胞悬液试剂、试剂盒台盘蓝酒精培养液仪器、耗材吸管实验步骤1.  计数板用96%酒精冲洗计数板后,用干净鹿皮擦净,另擦净盖片一张;

细胞划痕实验

材料:6孔板marker笔直尺20微升枪头(灭菌)无血清培养基PBS准备:所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)流程:1、先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀地划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。2、在空中加入约

细胞传代实验

实验方法原理 培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代;部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代;悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代,或用自然沉降法吸除上清后,再吹打传代。实验材料 细胞试剂、试剂盒 D-Hanks液小牛血清RPMI1640双抗胰蛋白酶EDTANHCl

细胞计数实验

            实验方法原理 细胞悬液制备后,需要计算悬液中所含细胞数量;一般以细胞数/毫升表示。因只有健康的细胞才有活力,接种后能够生长增殖,所以在接种关应先检查一下细胞的活力。 实验材料

细胞划痕实验

材料: 6孔板 marker笔 直尺 20微升枪头(灭菌) 无血清培养基 PBS 准备: 所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内) 流程: 1、先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀地划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5

细菌细胞的制备实验实验

细胞抽提物的制备 核糖体及多核糖体的分离 70S核糖体的纯化 多核糖体的纯化 将核糖体解离为大亚基和小亚基             实验材料

细胞转染实验的实验步骤

细胞传代(1)试验准备:200ul/1mlTip头各一盒(以上物品均需高压灭菌),酒精棉球,废液缸,试管架,微量移液器,记号笔,培养皿,离心管。(2)弃掉培养皿中的培养基,用1ml的PBS溶液洗涤两次。(3)用Tip头加入1mlTrypsin液,消化1分钟(37。C,5%CO2)。用手轻拍培养瓶壁,

细菌细胞的制备实验实验

细胞抽提物的制备核糖体及多核糖体的分离70S核糖体的纯化多核糖体的纯化将核糖体解离为大亚基和小亚基实验材料细胞                                                          试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液                        

细菌细胞的制备实验实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材 弗氏破碎器实验步骤 1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为

细胞转染实验的实验目的

学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法—脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法,观测外源蛋白的表达(绿色荧光蛋白),为染色准备实验材料。