细胞系错误鉴定:终结的开始(二)
案例和影响交叉污染和错误鉴定已有一段很长的历史,这其中有许多的案例,我们很难去判断哪一个是最重要及代价最高的。已被描述的经典案例是Hela细胞污染(关于Hela细胞污染有好几个案例),令人惊奇的是,许多被Hela细胞污染的细胞系居然在一些备受尊敬的杂志上仍被使用,而这一使用距离它们最先发现为Hela细胞的时间长达40年之久。T24是另外一种生长快速的细胞系,它常常污染许多经推测来源于不同膀胱癌的细胞系。EVC304最先被认为是自发转化的人类正常内皮细胞系,但后来却发现它是T24膀胱癌细胞系。令人感到意外的是,EVC304不是内皮细胞的这一论述对它作为内皮细胞模型的公开发表几乎没多大影响。推测来源于人类的前列腺癌细胞系TSU-Pr1和JCA-1也是来源于T24膀胱癌细胞系。这些研究发表在杂志Cancer Research上,但它并不能阻止后来一篇TSU-Pr1作为前列腺癌细胞系模型的研究论文发表在Cancer Research上。......阅读全文
细胞系错误鉴定:终结的开始(二)
案例和影响交叉污染和错误鉴定已有一段很长的历史,这其中有许多的案例,我们很难去判断哪一个是最重要及代价最高的。已被描述的经典案例是Hela细胞污染(关于Hela细胞污染有好几个案例),令人惊奇的是,许多被Hela细胞污染的细胞系居然在一些备受尊敬的杂志上仍被使用,而这一使用距离它们最先发现为Hela
细胞系错误鉴定:终结的开始
2010年5月ATCC SDO(Standards Development Organization)工作组在Nature review cancer杂志上发表了题为《Cell line misidentification:the beginning of the end》前瞻性报道。以下是全文
细胞系错误鉴定:终结的开始(三)
交叉污染检测许多方法已被用来检测交叉污染,包括同工酶分析、核型分析、人类白细胞抗原(HLA)分型,免疫分型和DNA指纹识别。这些方法都可以鉴别出某一种细胞系,但是分辨能力各不一样。然而,这些方法在不同实验室所得到的数据却不尽相同,以致没有任何一种方法可以用来建立一个标准参考数据库。许多实验室利用ST
细胞系错误鉴定:终结的开始(一)
2010年5月ATCC SDO(Standards Development Organization)工作组在Nature review cancer杂志上发表了题为《Cell line misidentification:the beginning of the end》前瞻性报道。以下是
细胞系交叉污染或错误鉴定对研究是否有影响
细胞系交叉污染或错误鉴定对研究有影响。使用错误的细胞系或者是被污染的细胞系做研究,只会造成时间,金钱和精力的损失,以及造成实验结果的不一致和不可重复。因此如果用被污染或错误的细胞系做研究,在发表文章或做进一步研究时极有可能需要用正确的细胞再重复实验。
什么是细胞系鉴定?
所谓细胞系鉴定即通过STR(短串联重复)图谱所建立细胞系的遗传特征。一株细胞系的遗传特征确立后,细胞系可以通过定期的检测,以防止出现细胞系被误认或交叉污染的情况。
细胞系鉴定的办法和依据
细胞系鉴定目前主要基于国际身份认证委员会的标准。依据该标准,可以通过多重荧光PCR技术,对人源8个STR位点以及1个性别决定位点进行检测。
ABO血型系统鉴定错误的原因分析
正确的血型鉴定是安全输血的关键,ABO血型系统有两个独特性质,一是血清中常存在的反应性强的抗体,而红细胞表面缺乏相应的抗原,二是许多组织细胞表面有规律的存在着ABH抗原,而分泌型的分泌液中也存在着ABH抗原,这两种独有的性质使ABO血型系统成为输血和器官移植中最重要的血型系统,输血前ABO血型鉴
什么时候需细胞系鉴定?
1)当建立或获得一个新的细胞系时; 2)一个涉及到细胞试验项目开始/结束时; 3)在细胞冻存之前,或细胞已连续培养2~3个月时; 4)发表文章或申请课题经费前; 5)细胞系表现不稳定或结果与预期差别较大时; 6)当实验室使用超过一种细胞系时,所有细胞系应先鉴定以排除交叉污染的可能。
为什么要进行细胞系鉴定?
首先进行细胞系STR鉴定是很重要的。很多生物医药的研究都采用培养细胞来进行,这些细胞可能是受赠于其它研究人员,也可能是从细胞库(如美国 ATCC,AmericanTypeCultureCollection)得来。据估计,15-20%的实验室,实验中所使用的细胞已经不是原来的细胞系,或者与其它细胞系发
检测报告常见错误汇总(二)
04签名缺漏漏签名这种问题虽少,但问题性质往往很严重,一般而言,报告编制、审核、批准漏签名的情况基本没有,但要谨防报告出现这两种情况:①三方会签漏签名;②试验日志记事人未签名。05不规则性缺漏在各种质量审核检查中,最常见的一种不规范性缺漏问题是“有栏目空白未填”,如表格有空白栏、“备注”栏空白未加“
方法开发从何开始?(二)
表1和表2中的变量归类方式有点不一样。这里列出了一些变量的特性,可以帮我们来确定首先选择哪一个(类)的变量。我们详细地探讨一下溶剂强度,然后会简要提到表2中其它变量。因为如果能理解表2 中所列的内容的话,大多数的信息就很容易理解了。 溶剂强度(%B):在方法建立过程中,色谱峰间距α的变化是一个希
为什么STR鉴定对于ATCC细胞系来说很重要
ATCC 成立于 1925 年,是大的生物资源中心,由美国 14 家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理,是一家全球性、非盈利生物标准品资源中心。 进行细胞系STR鉴定是很重要的。很多生物医药的研究都采用培养细胞来进行,这些细胞可能是受赠于其它研究人员,也可能是从细胞库(如美国?ATCC,
尚恩答疑-|-细胞系STR鉴定原理及结果解读
1. 匹配度大于多少时,可认为待测细胞系与标准细胞系具有相关性?匹配度大于80%(EV值大于0.8)时,可认为待测细胞系与标准细胞系具有相关性2. 某个小鼠细胞鉴定匹配到另一个小鼠细胞,一定是错误细胞系吗?不一定。首先去数据库确认该细胞系有没有公开的位点数据,如果有数据,且数据与检测结果匹配不上
AB0血型鉴定及交叉配血中常见错误
1.分型血清方面的原因(1)自制分型血清抗体:效价太低、亲和力不强,造成定型不准确。(2)患者纤维蛋白原增高或为异常蛋白血症:如多发性骨髓瘤,巨球蛋白血症等,可产生缗钱状假凝集。(3)患者输入了高分子血浆代用品或静脉注射造影剂等药物:可引起红细胞聚集,易误认为凝集。(4)血清中可能存在的不规则抗体:
ABO血型鉴定及交叉配血中常见错误解析
交叉配血是确定能否输血的重要依据,在血型鉴定的基础上,通过交叉配血试验进一步证实受血者和供血者之间不存在血型不合的抗原一抗体反应,以保证受血者的输血安全。两侧均不凝集可输血。若献血人红细胞与受血人血清(主侧)发生凝集应禁止输血;主侧不凝集,次侧(献血人血清与受血者红细胞)凝集,必要时可少量、慢速输血
二倍体细胞系的定义
中文名称二倍体细胞系英文名称diploid cell line定 义由一物种正常组织细胞的原始培养物得到的细胞群,至少有75%以上的细胞与该物种的正常细胞(2n)的核型一致。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
阳离子的鉴定方法(二)
1. 在HAc-NH4Ac的缓冲溶液中进行2. Cr3+、Fe3+、Bi3+、Cu2+、Ca2+等离子在HAc缓冲溶液中也能与铝试剂生成红色化合物而干扰,但加入氨水碱化后,Cr3+、Cu2+的化合物即分解,加入(NH4)2CO3,可使Ca2+的化合物生成CaCO3而分解,Fe3+、Bi3+(包括Cu
酵母菌的鉴定(二)
实验步骤一、酵母菌糖发酵试验1) 糖发酵基础液配制好后,按培养液容量的1%加入糖,分装于杜氏发酵管中(培养液的高度约为4-5厘米),再在试管内加入倒置的小玻管(约0.4×2.0-2.5厘米)一支。每种糖设三个重复管,高压灭菌15分钟。2) 将酵母分别接入上述各发酵管中,置下培养48-72小时
厌氧菌的分离、培养及鉴定(二)
4.1.3 分离 (1)编号 取五支无菌水试管,分别用记号笔标明10-1、10-2……10-5。 (2)稀释 在无氧无菌的超净厌氧手套箱中的条件下,用无菌注射器吸取1mL混合均匀的液体样品,加入装有预还原生理盐水的厌氧试管中,用震荡器将其混合均匀,制成10-1稀释液。用无菌注射器吸取1mL10-1稀
二次空气喷射系统流量错误怎么解决
具体如下:1、二次空气系统是为保证冷启动时降低尾气排放设计的。2、由于冷起动时为保证起动性能混合气必须加浓,所以尾气中有未燃烧的混合气,这是往尾气中打入多余的新鲜空气,使之再次燃烧降低尾排。 3、出现这个故障码说明电脑监控二次供气流量出现问题,如果是低那么有可能空气泵压缩机运行能力下降,空气量不足
二次空气喷射系统流量错误怎么解决
检查二次空气喷射系统空气管路及组合阀,一般为组合阀堵塞(拆卸后用压缩空气检查是否通畅)需更换。
食管癌细胞系中干细胞样SP细胞的分离鉴定实验
实验材料 人食管癌细胞系试剂、试剂盒 胰酶RNA酶碘化丙啶四甲基偶氮唑盐小牛血清DMEMDMSOK2HPO4Na2HPO4NaCI仪器、耗材 无菌分选管400目细胞筛水浴锅离心机酶标仪电泳仪显微镜PCR仪实验步骤 一、材料准备1. 青霉素储存液(1)将青霉素小瓶中的80万单位的干粉充分溶解于8 m
SEM灯丝寿命的终结
SEM灯丝寿命的终结 如何判断灯丝寿命的尽头?对于钨灯丝,你根本看不到它的到来。这意味着灯丝可能在成像或分析过程断裂,这会带来很多不便。来自灯丝的碎片也可能污染真空柱的其他部件,这不仅需要换灯丝,还要清理、甚至更换其他部件,如韦氏帽。 当然,可以在使用寿命结束前更换灯丝,但它没有得到充分利用,因此需
你的细胞有做过-STR-鉴定吗?
据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识,因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……,这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa c
STR细胞鉴定意义
导读:新买到的细胞,实验室传了几代的细胞,又或者储存于超低温冰箱几年不用的细胞,被污染了么? 鉴定正确么?用它做研究会影响实验结果么? 没有经过相应的细胞鉴定,使用了被污染的细胞,经过大量的实验,写出一篇论文,但是结论被推翻,论文被召回,大量的时间、物力和人力被浪费,一切都要从头再来。背景介绍应
STR基因分型应用于细胞鉴定的意义
新买到的细胞,实验室传了几代的细胞,又或者储存于超低温冰箱几年不用的细胞,被污染了么? 鉴定正确么?用它做研究会影响实验结果么? 没有经过相应的细胞鉴定,使用了被污染的细胞,经过大量的实验,写出一篇论文,但是结论被推翻,论文被召回,大量的时间、物力和人力被浪费,一切都要从头再来。 背景介绍应用于
STR细胞鉴定意义
导读: 新买到的细胞,实验室传了几代的细胞,又或者储存于超低温冰箱几年不用的细胞,被污染了么? 鉴定正确么?用它做研究会影响实验结果么? 没有经过相应的细胞鉴定,使用了被污染的细胞,经过大量的实验,写出一篇论文,但是结论被推翻,论文被召回,大量的时间、物力和人力被浪费,一切都要从头再来。
“GDP崇拜”能否终结?
今年是实施“十二五”规划的第一年。中央关于“十二五”规划的《建议》指出,“十二五”时期,是全面建设小康社会的关键时期,是深化改革开放、加快转变经济发展方式的攻坚时期。 笔者认为,实际上,“关键时期”与“攻坚时期”这二者之间存在着内在的逻辑关联,从一定意义上说,全面建设小
进行细胞鉴定(Cell-Authentication)的根本原由-细胞错误识别被污染的危害及现状
2009年Nature号召建立细胞STR数据库、2010年IJC(Int J Cancer)期刊开始要求作者提供细胞鉴定报告、2011年ATCC的标准发展组织 (Standards Development Organization, SDO) 颁布了ASN-0002标准《Authentication