AnnexinV实验过程中阳性率偏高问题分析
• 细胞本身活力太差。实验中发现未经诱导凋亡的对照细胞经染色后AnnexinV+/PI+双阳性的细胞比例过高，造成这种结果的原因可能是细胞本身活力太差。建议用台盼蓝染色计算细胞的活力，台盼蓝拒染的细胞应大于95%。若活力偏低低，建议重新复苏细胞，通常刚复苏的细胞至少要传代3 次以后才能进行实验。• 细胞操作不当。贴壁细胞消化过程中反复剧烈吹打导致细胞膜破坏，使得假阳性偏高。• 凋亡诱导时间过长。一般情况下诱导几个小时就可以出现早期凋亡，因此通常不需要处理大于48 小时以上，诱导时间过长会使营养物质耗尽，导致细胞状态差，假阳性结果偏高。......阅读全文
流式细胞仪检测细胞凋亡――Annexin－V/PI双染色法
基本原理细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Ann
流式细胞仪检测细胞凋亡——Annexin－V/PI双染色法
基本原理细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Ann
流式细胞仪检测细胞凋亡：Annexin－V/PI双染色法
一、基本原理细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。A
地磅检定过程中常见问题分析
一、地磅检定的硏究Vmin
怎么处理测温仪偏高问题？
首先导致红外线测温仪温度度数偏高的有几点原因，请大家对症。1：没有正常的预估被测物体的温度。2：目标发射率远远高于预期设置或发射率调整不正确导致。3：被测目标光斑尺寸太小。4：存在背景热源的反射干扰太大。5：选型错误，没有正确的分析被测目标使用的测量波段。6：由强磁场引起的引线噪声或互联电缆的不正确
流式细胞仪Annexin－V凋亡试剂盒一般染色检测方法
1.把将被染色分析的细胞用冷PBS洗涤二次并在恰当的染色缓冲液（binding buffer）中以1 x 106 细胞/mL的浓度重悬。（染色缓冲液，binding buffer,中必须含有钙离子） 2.吸取100ul的细胞(1 x 105)至试管中。（必须在室温下进行）3.加入适量的荧光标记的an
多肽分析过程中常见问题解读
小分子越来越难做，大分子发展很强势，似乎成为了近年来药物研发市场的重要表现之一，“多肽”类药物正是其中的一大热门。目前多肽药物的质量监管日趋渐严，在这种趋势下，寻找能满足更高分离度，灵敏度的分析方法就显得尤为重要。很多小伙伴在在开发多肽类样品分析方法中总是遇到各种的问题，无比烦恼。这里小编就总结了一
ELISA试剂盒实验过程中的各种问题
elisa试剂盒的实验操作所要求的条件是比较严格的，无论是对实验的硬件条件还是对实验的操作人员的技术要求，都是如此。因此在做ELISA试剂盒实验时，一定要注意以下几点。[注意事项]1. 操作时必须戴手套，穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度。2. 试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。3. 样品稀释液
细胞凋亡的检测方法
（一） 测原理细胞发生凋亡时，其细胞膜 的通透性也增加，但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点，被检测细胞悬液用荧光素染色，利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。（二） 用价值流式细胞仪检测有下列特点：（1）检测的细胞数量大，因此其反映群体细胞的凋亡状态比
细胞凋亡的检测方法
（一） 测原理细胞发生凋亡时，其细胞膜的通透性也增加，但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点，被检测细胞悬液用荧光素染色，利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。（二） 用价值流式细胞仪检测有下列特点：（1）检测的细胞数量大，因此其反映群体细胞的凋亡
三种流式方法检测细胞凋亡
一、检测原理细胞发生凋亡时，其细胞膜的通透性也增加，但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点，被检测细胞悬液用荧光素染色，利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。流式细胞仪检测有下列特点1、检测的细胞数量大，因此其反映群体细胞的凋亡状态比较准确2、可用许多相关
细胞凋亡的三种流式检测方法
一、检测原理细胞发生凋亡时，其细胞膜的通透性也增加，但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点，被检测细胞悬液用荧光素染色，利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。流式细胞仪检测有下列特点：1、检测的细胞数量大，因此其反映群体细胞的凋亡状态比较准确2、可用许多相
胆红素偏高的原因分析
人的红细胞的寿命一般为120天。红细胞死亡后变成间接胆红素（I-Bil），经肝脏转化为直接胆红素（D-Bil），组成胆汁，排入胆道，最后经大便排出。这就是肝脏内胆红素的正常转化。 但是如果出现其他疾病，则会导致肝脏代谢异常，进而间接胆红素无法正常转化为直接胆红素，导致血清中胆红素偏高。此时可能
在分子荧光分析过程中应注意哪些问题
1、辐射与物质的非吸收作用引起的误差； 2、荧光与光化学反应的影响，一般说来，荧光对分光光度测量产生的误差可以忽略，多数情况下显色体系的荧光效率很小，而且荧光发射是各向同性，只有一小部分沿着透射光方向进入检测器，使测量吸光度偏低，产生负偏离。荧光对吸收测量的影响极大程度上决定于仪器的吸收池和检测器
血气分析仪采血过程中注意的问题
1、 采血部位：动脉血可采任何部位， 一般选用容易采取的动脉。 2、 采血器材：2ml 或5ml 的注射器，使用前先用100u/ml 的肝素湿润内壁，[1]具体操作如下：将2ml 的浓肝素（12500u/ml）全部加到100ml 的生理盐水瓶中，混匀，用注射器吸取稀释的肝素，湿润内
在分子荧光分析过程中应注意哪些问题
1、辐射与物质的非吸收作用引起的误差； 2、荧光与光化学反应的影响，一般说来，荧光对分光光度测量产生的误差可以忽略，多数情况下显色体系的荧光效率很小，而且荧光发射是各向同性，只有一小部分沿着透射光方向进入检测器，使测量吸光度偏低，产生负偏离。荧光对吸收测量的影响极大程度上决定于仪器的吸收池和检测器
在分子荧光分析过程中应注意哪些问题
1、辐射与物质的非吸收作用引起的误差； 2、荧光与光化学反应的影响，一般说来，荧光对分光光度测量产生的误差可以忽略，多数情况下显色体系的荧光效率很小，而且荧光发射是各向同性，只有一小部分沿着透射光方向进入检测器，使测量吸光度偏低，产生负偏离。荧光对吸收测量的影响极大程度上决定于仪器的吸收池和检测器
细菌V.P实验
实验材料大肠埃希氏菌产气肠杆菌普通变形杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒NaOH溶液肌酸甲基红试剂吲哚试剂乙醚溴甲基酚紫指示剂仪器、耗材超净工作台恒温培养箱高压灭菌锅试管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨水培养基糖发酵培养基实验步骤1. 标记试管 取装有葡萄糖蛋白胨培养液的试管，根据需要将培养的细
细菌V.P实验
实验材料大肠埃希氏菌产气肠杆菌普通变形杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒NaOH溶液肌酸甲基红试剂吲哚试剂乙醚溴甲基酚紫指示剂仪器、耗材超净工作台恒温培养箱高压灭菌锅试管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨水培养基糖发酵培养基实验步骤1. 标记试管 取装有葡萄糖蛋白胨培养液的试管，根据需要将培养的细
细菌V.P实验
实验材料 大肠埃希氏菌产气肠杆菌普通变形杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒 NaOH溶液肌酸甲基红试剂吲哚试剂乙醚溴甲基酚紫指示剂仪器、耗材 超净工作台恒温培养箱高压灭菌锅试管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨水培养基糖发酵培养基实验步骤 1. 标记试管 取装有葡萄糖蛋白胨培养液的试管，根据需要将
细菌V.P实验
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测硫仪含量偏高是什么问题
测硫仪故障排除1：硫检测结果偏高故障原因分析 （1） 漏气：检查气路气密封性 （2） 赌气：检查气路上有无堵的地方，如玻璃熔板脏，干燥管下端尼龙件与流量计的连接管 （3） 无气流：检查气泵是否老化，气泵进气口上的密封套管是否脱落，流量计的小浮子粘结，流量计漏气或旋钮关闭 （4） 异径管断：鹤
测硫仪含量偏高是什么问题
测硫仪故障排除1：硫检测结果偏高故障原因分析 （1） 漏气：检查气路气密封性 （2） 赌气：检查气路上有无堵的地方，如玻璃熔板脏，干燥管下端尼龙件与流量计的连接管 （3） 无气流：检查气泵是否老化，气泵进气口上的密封套管是否脱落，流量计的小浮子粘结，流量计漏气或旋钮关闭 （4） 异径管断：鹤
流式图四个象限怎么看凋亡
流式图四个象限看凋亡：在二维散点图上，PI 和 annexin V 分别是X和Y轴。一般认为PI单染的细胞是已经死亡的细胞，annexin V 单染的细胞是凋亡早期的细胞，而双染是凋亡中期的。需要在散点图上先画出4个象限，位置根据无染色的阴性细胞先定出左下象限。Annexin V是一种检测细胞凋亡的
流式图四个象限怎么看凋亡
流式图四个象限看凋亡：在二维散点图上，PI 和 annexin V 分别是X和Y轴。一般认为PI单染的细胞是已经死亡的细胞，annexin V 单染的细胞是凋亡早期的细胞，而双染是凋亡中期的。需要在散点图上先画出4个象限，位置根据无染色的阴性细胞先定出左下象限。Annexin V是一种检测细胞凋亡的
流式图四个象限怎么看凋亡
流式图四个象限看凋亡：在二维散点图上，PI 和 annexin V 分别是X和Y轴。一般认为PI单染的细胞是已经死亡的细胞，annexin V 单染的细胞是凋亡早期的细胞，而双染是凋亡中期的。需要在散点图上先画出4个象限，位置根据无染色的阴性细胞先定出左下象限。Annexin V是一种检测细胞凋亡的
甲胎蛋白偏高分析
核心提示: 甲胎蛋白的含量高低和肝癌有着千丝万缕的关系。很多人担心自己可能患上了肝癌。如果只是偏高一点点的话，患者朋友完全不必要过于担心。怀孕，肝炎等情况都能引起体内甲胎蛋白含量升高。患者需要做进一步的检查来排除肝癌的可能性。 甲胎蛋白这个医学名词相信很多人并不陌生。这个医
Western－Blot过程中常见的问题及可能原因分析
问题可能原因验证或解决办法背景高膜没有完全均匀湿透使用100% 甲醇浸透膜5-10min洗膜不充分增加洗液体积和洗涤次数阻断不充分增加封闭液孵育时间，或者提高温度。选择合适的封闭试剂（脱脂奶粉，BSA，酪蛋白等）二抗浓度过高降低二抗浓度检测过程中膜干燥保证充分的反应液，避免出现干膜现象曝光过度缩短曝
雷迈分析包衣过程中常见问题及对策
机在实际操作中如遇到如下的问题： 包衣机在实际操作中如遇到如下的问题： 1、粘片多发生在包隔离层。原因是素片表面不光华，单糖浆加入过量且温度低，水分蒸发慢，搅拌不及时，彼此粘附所致。 对策：一是糖浆应控制在40℃～50℃,与素片的比例
细胞凋亡检测
实验概要细胞凋亡是细胞生物学研究的重要领域。检测药物或某种处理对于细胞细胞的影响时，细胞凋亡检测是一个重要检测指标。以Annexin V联合PI法为例简述细胞凋亡检测。实验原理在细胞凋亡早期，位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine，PS）迁移至细胞膜外侧。磷脂结合蛋白V（