小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)的培养(二)

1. 这些工作均是在 Ralph M.Steinman的参与下完成的;2. Inaba培养的BMDC来源于小鼠股骨和胫骨中的骨髓;3. Inaba先用抗体+补体法去除骨髓中的淋巴细胞,以防淋巴细胞对BMDC培养的影响;4. 在诱导分化过程中,为防止粒细胞的干扰,Inaba通过每2天轻摇培养板并3/4体积换液的方法来尽量去除粒细胞;5. Inaba证实单用GM‐CSF通过6‐8天的培养,即可从骨髓细胞诱导得到 大量的 DC 细胞,而且混合淋巴细胞反应提示其为成熟的 DC 细胞;6. 该法可从一个小鼠的骨髓中培养获得5‐7 x 106个DC细胞。1994年---奥地利因斯布鲁克大学(University of Innsbruck)的Romani等发现GM-CSF和IL-4(白细胞介素 4)联合诱导,可从人血液 PBMC(外周血单个核细胞)制备出大量的DC,而GM-CSF单独诱导的效果不好[4].后来,科学家也将IL-4应用于......阅读全文

小鼠腹腔巨噬细胞培养

实验方法原理 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 1640 培养基小牛血清双抗台盼兰仪器、耗材 手术器械一次性注射器眼科镊眼科剪96 孔板CO2培养箱实验步骤 一

小鼠肝细胞原代培养

实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 DMEM无血清DMEM培养基胰酶PBS仪器、耗材 饭盒纱布剪子镊子烧杯平皿研磨玻片滤网离心管6孔培养板吸管移液管手套微量加样器实验

小鼠骨髓间充质干细胞的原代取材

实验概要小鼠骨髓间充质干细胞的原代取材主要试剂75%酒精、含2% SP(Pen Strep)的DPBS、间充质干细胞培养液主要设备眼科剪、眼科镊、手术剪、手术镊、5 mL注射器、10 mL注射器、7号针头、400目细胞筛、15 mL离心管、3.5 cm培养皿实验步骤①断颈法处死小鼠,用手术器械完整地

小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的测定

实验原理:染色单体或染色体的无着丝点断片,或因纺锤体受损而丢失的整个染色体,在细胞分裂后期,仍然在细胞质中。末期之后,单独形成一个或几个规则的次核,被包含在子细胞的胞质内,因比主核小,故称为微核。大小应为主核的1/20~1/5。微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样。微核率是和用药的剂量或辐射累积

中科院Hepatology文章发表干细胞研究新成果

  来自中科院上海生命科学研究院/上海交通大学医学院健康科学研究所的研究人员在小鼠中证实,间充质干细胞可以通过诱导调节性树突状细胞,缓解细菌诱导的肝损伤。相关论文发布在国际著名肝脏疾病杂志Hepatology上(最新影响因子11.665)上。   来自健康科学研究所的张雁云(Yanyun Zhan

树突细胞的分离实验

实验步骤基 本 方 案 1 塑 料 黏 附 和E A 玫 瑰 花结 富 集DC此种技术用于分离DC已经使用了很多年,其间只经过了微小的修改(Steinman衫aZ., 1979)材 料(带V 项 目 见 附 录 1)胶原酶消化的脾脏细胞悬液(见辅助方案)高密度牛血清白蛋白(BSA) 溶液R P M

小鼠来源的巨噬细胞系RAW264.7细胞是什么

RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞. 此细胞株源自雄性Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤。 sIg-, Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原阴性。此细胞株不分泌可检测到的病毒颗粒,XC斑点形成试验阴性。 可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖。 可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞

小鼠来源的巨噬细胞系RAW264.7细胞是什么

RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞. 此细胞株源自雄性Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤。 sIg-, Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原阴性。此细胞株不分泌可检测到的病毒颗粒,XC斑点形成试验阴性。 可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖。 可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞

SIVmac239感染中国恒河猴中树突状细胞亚群研究获进展

  艾滋病灵长类动物模型对于艾滋病发病机制研究、抗艾滋病药物和疫苗的评价具有十分重要的意义。迄今应用最为广泛的艾滋病灵长类动物模型是SIVmac或SHIV感染的印度恒河猴模型。已有研究表明,中国恒河猴是较印度恒河猴更为适合的艾滋病模型灵长类动物,SIV感染中国恒河猴的疾病进程较为缓慢,

骨髓基质来源的间充质干/祖细胞培养基本原则和鉴定

实验材料骨髓基质试剂、试剂盒完全培养基(CCM)无钙或镁的磷酸盐缓冲液无钙或镁的Hank’s平衡盐溶液Ficoll-Paque淋巴细胞分离液仪器、耗材聚丙烯离心管 15 mL和50 mL塑料组织培养皿 直径15 cm塑料微量移液器枪头 10μL实验步骤(a)去除抗凝管盖子,将骨髓液转移至50mL离心

细胞治疗法的方法分类

目前治疗性的细胞包括:细胞因子或单克隆抗体活化的免疫细胞,树突状抗原呈递细胞,成体组织间充质细胞,血液-淋巴干细胞,人工诱导的多能干细胞等。  细胞因子或单克隆抗体活化的免疫细胞  以制备技术命名,是用细胞因子和/或单克隆抗体活化的淋巴细胞。临床上应用的LAK、CIK,都是以来自外周血或脐血的单个核

细胞培养支原体污染来源

支原体(Mycoplasma)是一种大小介于细菌和病毒之间(0.1 - 0.6μm),没有细胞壁、并独立生活原核生物,形态呈高度多形性,呈圆形、丝状或梨形。由于支原体直径较小,进行除菌过滤是,约1%的支原体可以直接穿过常规的0.22μm的微孔除菌滤膜,造成细胞的支原体污染。支原体污染的来源包括:(1

年轻小鼠骨髓能够提高老年小鼠大脑的活性

  一项新的研究发现,将年轻实验室小鼠的骨髓移植到老鼠身上可以防止老鼠的认知能力下降,保持他们的记忆力和学习能力。  “虽然之前的研究表明,从幼鼠体内引入血液可以逆转老鼠的认知能力下降,但对于这种情况的发生情况尚不清楚,”Cedars-Sinai医学和生物医学科学副教授Helen Goodridge

树突细胞对B细胞的号令

免疫系统的哨兵—树突细胞(Dendritic cells;DCs),有一个特殊的名声,就是能切碎任何所遇见的外来蛋白(foreign protein)。并且,它们会将剩下需要处理的物质指点给T细胞,帮助协调免疫反应过程。现在,美国的研究者发现:树突细胞还能直接而完整地捕获“战俘”并拖运它们,整个过程

西湖大学团队发现肿瘤免疫逃逸新机制

记者7月1日从西湖大学获悉,该校医学院周挺研究团队揭示了树突状细胞在组织间隙迁移过程中,被肿瘤微环境抑制的新机制。他们还提出利用Pde5抑制剂——西地那非恢复树突状细胞功能的新型肿瘤免疫治疗策略。相关研究日前刊发在《自然》期刊。“作为免疫系统的‘情报员’,树突状细胞负责将肿瘤抗原信息传递至引流淋巴结

人骨髓间充质干细胞的培养

人软骨损伤后,可用软骨组织工程进行软骨缺损修复。软骨可由间充质干细胞分化而来。因而,间充质干细胞的培养和分化具有重要作用。间充质干细胞(MSC)可以2×10的5次方/cm2的密度接种于特定的培养液(低糖DMEM,含15%FBS,100u/L氨卡青霉素,100 mg/L链霉素,250 mg/L两性霉素

关于血细胞来源于骨髓的造血多能干细胞的介绍

  血细胞来源于骨髓的造血多能干细胞(Multipotential stem cell)。干细胞除具有增殖能力外,在一定的情况下尚能从骨髓造血组织中迁出,随着血流到达髓外组织形成造血细胞小结,称为集落形成单位。每一个小结由许多同类型分化的细胞组成,这些细胞是由一个干细胞分裂分化而来。干细胞虽有自身复

小鼠肝细胞原代培养实验

胰酶消化法             实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。 

小鼠腹腔巨噬细胞培养实验

细胞培养技术             实验方法原理 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百

小鼠腹腔巨噬细胞培养实验

            实验方法原理 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。 实验材料

小鼠腹腔巨噬细胞原代培养

实验方法原理 巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。 巨噬细胞也建有无限细胞系,大多来自小鼠,如P331、S774A.1、RAW309

小鼠腹腔巨噬细胞培养实验

小鼠腹腔巨噬细胞培可以:(1)吞噬与清除异物;(2)分泌生物活性物质;(3)对仿生全降解材料,降解后的无机产物与生命过程中有机物的合成作用。实验方法原理取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。实

小鼠肝细胞原代培养实验

小鼠肝细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法胰酶消化法实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEM 无血清DMEM

小鼠肝细胞原代培养实验

胰酶消化法             实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。 

小鼠精原干细胞分离培养

实验概要小鼠精原干细胞分离培养主要试剂0.1%明胶、DPBS、0.25%胰蛋白酶、400目细胞筛、精原干细胞培养液、1 mg/mL胶原酶Ⅳ、7 mg/mLDNase、细胞基础培养液、DMEM-C、精原干细胞冻存液(Kubota et. al., 2004a and 2004b)(4℃条件下可

固有免疫细胞的来源于分布

  吞噬细胞  吞噬细胞主要包括中性粒细胞和单个核吞噬细胞两类。  1.中性粒细胞:中性粒细胞占血液白细胞的60%~70%,是白细胞中数量最多的一种。中性粒细胞来源于骨髓,产生速率高,但存活期短,约为2~3天。  2.单核吞噬细胞:包括血液中的单核细胞和组织器官中的巨噬细胞。单核细胞由骨髓粒-单系祖

小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的测定方法

实验原理:染色单体或染色体的无着丝点断片,或因纺锤体受损而丢失的整个染色体,在细胞分裂后期,仍然在细胞质中。末期之后,单独形成一个或几个规则的次核,被包含在子细胞的胞质内,因比主核小,故称为微核。大小应为主核的1/20~1/5。微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样。微核率是和用药的剂量或辐射累积

牛陀螺状细胞贴壁培养技巧

BT牛陀螺状细胞贴壁生长特性:1、一个一个做!防止污染,和消化细胞时间的不均匀。2、原则上,为了避免细胞系之间的污染,应该一个一个的做。但是如果你能保证无菌操作的原则,也能把握好各种贴壁细胞系消化的时间,是可以同时做,这样效率高。建议你刚开始一个一个的做,熟练以后根据具体情况决定如何做。3、4个可以

小鼠骨髓细胞染色体标本制作与观察

实验目的掌握动物骨髓染色体标本制备基本过程,了解操作步骤的原理实验原理小鼠骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析。实验原理制备方法包括以

厦大团队开发基于树突状细胞的工程化囊泡疫苗新策略

  免疫疗法的探索与发展旨在为肿瘤治愈寻求新突破,但由于肿瘤内部复杂免疫抑制性微环境的存在,传统疫苗及免疫调控方法的疗效受到极大限制。近期,来自厦门大学的科研团队在《Nature Nanotechnology》杂志发表题为“A nanovaccine for antigen self-present