使用Ostro样品制备产品从血浆中提取磷脂(一)

简介:多数“组学”研究的共同目标是鉴定疾病分子标记物、理解疾病作用机理,进而发现潜在的药物靶点。通常情况下,用于研究的体液因为与活体器官和组织密切接触所以其对身体病理状态特定反应非常灵敏。在脂质组学分析中,通常采用液液提取的方式对血浆的磷脂进行研究。过去也曾有固相萃取的应用。氨丙基硅胶柱也可用于分析脂质,但多着重于脂肪酸,或是会根据洗脱条件的不同进行筛选。Ostro 96孔样品制备板则针对日常生物分析中的小分子进行研究,捕获并去除样本制备过程中大量的磷脂成分。在该通用流程中,脂质保留在Ostro板上,并不进行洗脱。对上样和洗脱条件进行调整,就能实现选择性富集特定类型磷脂或萃取全部磷脂。实验条件:样品制备:人血浆样本来源:新加坡国立大学生物科学中心志愿者,或商业样本(Sigma,P/N P9523)。萃取流程:1. 将Ostro板放置在2 mL收集板上,并安置在真空装置上。2. 使用移液管将100 μL血浆直接上样到Ost......阅读全文

能够从少量血样中快速收集血浆的新技术

Noviplex Card——快速收集和分析血浆的下一代样本采集技术一种“卡片实验室”采集技术现在能用一份指血样本快速生成LC-MS/MS分析等应用所需的高质量血浆。日本京都岛津公司的子公司岛津科学仪器公司(SSI; Columbia, MD, USA)推出了下一代样本收集工具——Noviplex卡

血浆提取操作方法

  很多人都不清楚血液是怎么获取的,因而,想掌握有关的专业知识,那麼,血液到底是怎么获取的呢?获取的方式及流程实际有什么呢?下边对于这一问题一起来开展简易的掌握和了解吧,期待以下几点对大伙儿有一定的协助!  血液到底是怎么获取的呢?  1、提取血液后要添加到挂有抗凝剂的试管婴儿中。不然按本实际操作一

样品预处理中样品溶液的制备方法分解法

分解法分为全部分解法和部分分解法。全部分解法是将样品中所有有机物分解破坏成无机成分,又称为无机化处理,适用于测定样品中的无机成分;部分分解法是将样品中大分子有机物在酸、碱或酶的作用下,水解成简单的化合物,使待测成分释放出来,适用于测定样品中的有机成分。

样品预处理中样品溶液的制备方法溶解法

采用适当的溶剂将样品中的待测组分全部溶解。(1)水溶法用水作为溶剂,适用于水溶性成分,如无机盐、水溶性色素等。①酸性水溶液浸出法。溶剂为各种酸的水溶液,适用于在酸性水溶液中溶解度增大且稳定的组分。②碱性水溶液浸出法。溶剂为碱性水溶液,适用于在碱性水溶液中溶解度增大且稳定的成分。(2)有机溶剂浸出法适

脑磷脂的提取方法介绍

丙酮萃洗粉末磷脂用丙酮反复萃洗大豆磷脂,其中的油脂和游离脂肪酸会溶解在丙酮之中,而磷脂却不溶解,经过多次萃洗之后可进一步精制磷脂。准确称取一定量大豆粉末磷脂,置于三口烧瓶中,加入一定比例丙酮溶液,开动搅拌器,控制温度在所需的范围内,萃取时间达到要求后停止搅拌,产品进行抽滤,得粉末状精制磷脂(PE含量

血浆蝰蛇毒磷脂时间测定的概述

  血浆蝰蛇毒磷脂时间测定是在血浆中加入蝰蛇毒,用于检查凝血时间,诊断血浆内因子。需要检查的人群有软弱无力疲乏、困倦,皮肤、黏膜苍白,心悸,头晕、头痛、耳鸣、眼花、注意力不集中、嗜睡症状的人群。

使用复合模式SPE技术去除血浆样品中的聚乙二醇400(三)

将PEG 400从血浆中去除的主要目的就是为了清除可能引发的离子抑制效应。图5为由下面方程式得出的基质效应数据一览,据最新AAPS论文报道6。基质效应 =(含PEG的峰响应值/不含PEG的峰响应值) 图表A所示数据来源于经Oasis MCX萃取去除PEG的血浆样品。图表B所示数据来源于经萃取后又

使用复合模式SPE技术去除血浆样品中的聚乙二醇400(二)

数据管理 色谱系统: MassLynx®V4.1 SCN714和MS软件结果与讨论 PEG 400及其他四种测试化合物的色谱图如图1所示。图中宽峰是PEG400丰度较大的分子离子峰的综合TIC,包括以下分子量的PEG单峰:370、414、458、502、546、590和634。标准品(醋丁洛尔、美托

扫描电子显微镜样品要求及制备-(一)--常规样品制备

样品制备对扫描电镜观察来说也至关重要,样品如果制备不好可能会对观察效果有重大影响。通常希望观察的样品有尽可能好的导电性,否则会引起荷电现象,导致电镜无法进行正常观察;另外样品还需要有较好的导热性,否则轰击点位置温度升高,使得试样中的低熔点组分挥发,形成辐照损伤,影响真实的形貌观察。如果要进行EDS/

流式细胞术的样品制备(七种样品的制备方法)(一)

流式细胞术的样品制备流式细胞术的实验检测对象是单细胞悬液,因此需把样品制备成细胞悬液,细胞浓度为105~107个/ml。制备成的单细胞悬液经荧光或免疫荧光标记即可上机检测。样本制备的基本原则:1.使各种液体和悬浮细胞样本新鲜,尽快完成样本制备和检测;2.针对不同的细胞样本进行适当洗涤、酶消化或EDT

怎么从河流中采集沉积物样品

水中底泥和沉积物采集的办法主要有两种: 一种是直接挖掘的办法,这种方法适用于大量样品的采集,或者是一般需求样品的采 集。在无法采到很深的河、海、湖底泥的情况下,亦可采用沿岸边直接挖掘的方法。但是采集的样品极易相互混淆,当挖掘机打开时,一些不粘的泥土组分容易流走,这时可以采用自制的工具采集。另一种是用

安捷伦推出用于食品检测的样品制备产品

  安捷伦科技近期推出新品Bond Elut脂类去除产品,帮助食品安全实验室更准确地测试高脂肪样品。该款新品采用了创新的吸附剂技术,使食品安全实验室能有更好的方法解决这个一直以来最具挑战性的任务之一。   “使用我们的产品来进行样品制备,实验室将能够更好地消除基质干扰,基质干扰会使得检测结果难以重现

CFAS-2014:食品与农产品样品制备分会

  2014年5月8日下午,第三届中国食品与农产品安全检测国际论坛分会在北京国际会议中心召开。在此次的食品与农产品样品制备分会报告中邀请了山西省产品质量监督检验研究院的李学哲教授;中粮营养健康研究院、食品质量与安全中心的陈士恒先生;上海安谱科学仪器有限公司的强维女士;梅特勒-托利多的董文忠

杆状病毒储液制备实验——从悬浮培养中制备

实验材料悬浮培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1

杆状病毒储液制备实验——从单层培养中制备

实验材料单层培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1

LSCM样品制备中相关实验方法

样品制备中相关实验方法 用于免疫荧光抗体标记组织切片的载玻片需经过明胶、蛋白胶、多聚赖氨酸 ( Poly-L-Lysine)、硅烷(3-氨丙基三乙氧基硅烷,APES) 等处理,以粘贴组织切片,防止组织切片在免疫反应过程中脱落。简易明胶处理方法是将干净的载玻片浸于 0.1% 明胶热溶液中一分钟,取出沥

X荧光样品制备中物理富集技术

1)蒸发和冷冻干燥生物组织试样常用的干燥方法是冷冻干燥法,让生物样品在冷冻状态下用真空泵将水抽干。其优点是样品在处理过程中不会被污染,待测元素不因挥发而损失,但设备昂贵、费时。也可以采用放在氧等离子体低温干燥箱中灰化,低温等离子是气体在低压于高频电场的作用下产生的,在这种情况下,由于分子或原子间的间

X荧光样品制备中化学富集技术

化学富集法有沉淀-共沉淀法、电沉积法、离子交换、液一液萃取法、鳌合一固定法和色层法等。 1)沉淀法螯合物沉淀法(DDTC法)是使溶液中的各金属阳离子与螯合物试剂反应后沉淀过滤,鳌合物沉淀剂常用的有DDTC(铜试剂)、PAN(1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚),8-羟基喹啉,其特点是均可与近20种元素产

核提取物的制备实验(一)

从培养细胞中分离的细胞核制备成的提取物在体外转录和mRNA加工中具有精确的功能,(1)纯化蛋白质(2)核提取物。实验方法原理通过向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后,可以降低蛋白质的溶解度,使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析,是物理变化,可复原。对于特定的蛋白质,影响蛋白质盐析的主要因素

分析血浆样品中白消安的临床研究方法

  应用优势:   ■ 利用色谱和高选择性的质谱检测提高 分析选择性   ■ 宽的动态范围(范围拓宽200倍)   ■ 样品制备过程简单、经济,仅使用极少 量的样品   ■ 分析速度快   白消安是一种双功能烷基化试剂,其生物利用度受个体年龄、疾病状态和药 物相互作用等因素的影响,在不

均质匀浆器从硬组织样品中提取蛋白质

Bead Ruptor24均质匀浆器从硬组织样品中提取蛋白质

中药材分析用样品制备方法连续回流提取法

连续回流提取法适用索氏提取器连续进行提取,操作简便,节省溶剂,蒸发的溶剂经冷凝流回样品管,因其中不含待测组分,所以提取效率高。本法应该选用低沸点的溶剂,如乙醇、甲醇等,提取组分对热应稳定。

食品检测技术样品预处理中样品溶液的制备

样品溶液的制备根据样品中被测组分存在状态的不同,选择溶解法或分解法来制备样品溶液。当样品中被测组分为游离状态时,采用溶解法制备样品溶液;当样品中被测组分为结合状态时,采用分解法制备样品溶液。1、溶解法采用适当的溶剂将样品中的待测组分全部溶解。(1)水溶法用水作为溶剂,适用于水溶性成分,如无机盐、水溶

使用色谱柱时的样品制备

  1、样品应当尽可能溶解在能与流动相相互溶的溶剂中。除特殊指明外,如使用强溶剂溶解样品柱子的分辨率将可能降低。  2、样品溶液在进样前应使用针头式过滤器对样品预先过滤。频繁改变流动相组成,会加速降低柱效。  3、色谱柱由高压匀浆法装填,能承受较高压力。为获得最佳分离效果,使用时请不要超过200kg

利用-Trizol-从植物组织中制备-RNA-实验

实验材料 植物组织试剂、试剂盒 Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水液态N2NaCl柠檬酸钠仪器、耗材 转子-定子均化器研钵和杵圆锥形管实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂Trizol(Invitrogen)氯仿异丙醇乙醇,70%,用焦碳酸二乙酯(DEPC) 处理过的水配制DEPC 处

利用-Trizol-从植物组织中制备-RNA-实验

下述方案是经修改过的 Trizol 方案,用于从植物组织中分离 RNA,其中增加了一个高盐异丙酵沉淀步骤,以选择性地沉淀 RNA,而将多聚糖和蛋白多糖留在溶液里。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。实验材料植物组织试剂、试剂盒Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水液态

利用-Trizol-从植物组织中制备-RNA-实验

            实验材料 植物组织 试剂、试剂盒 Trizol 氯仿 异丙醇 乙醇

不同植物组织中多糖的提取中AIR的制备

实验概要本人总结的多糖提取前AIR制备过程实验步骤AIR (alcohol insoluble residue)提取1)新鲜收取的植物在蒸馏水中清洗以除去培养基等物质,后冻干。2)将冻干的样品在液氮中研磨成粉末。3)AIR (alcohol insoluble residue)制备浮萍、拟南芥叶及根

蛋白质谱样品制备指南(一)

研究过蛋白的人都能深刻体会其复杂性和多功能性,为解决蛋白研究的困境,应运而生了一系列技术、方法、仪器等。质谱技术就是其中一个典型代表,常被用于几个蛋白研究的重要方向:蛋白基础功能探究(结构、相互作用核酸/蛋白/蛋白组、修饰功能等),蛋白鉴定(定位、机理等),蛋白定量等。 很多初入门者一般谈“谱”色变

一文了解icpms血浆样品前处理

ICP-MS以独特的接口技术将电感耦合等离子体的高温电离特性与质谱计的灵敏快速扫描的优点相结合而形成一种高灵敏度的分析技术。  ICP-MS样品前处理是样品分析检测的重要步骤之一,对分析检测结果的准确性有着重要的影响。由于样品的种类繁多,理化性质各异,因此,针对不同的样品及要求有着不同的前处理方法。