体外抗药肿瘤细胞模型的建立实验

实验方法原理 抗药性细胞模型的筛选大多采取长时间药物处理、诱导抗性,最总筛选出具有一定抗性的细胞克隆。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 小牛血清DMEMDOX仪器、耗材 CO2培养箱无菌钢圈实验步骤 一、培养条件用含10%小牛血清的DMEM培养液,5%CO2,37℃培养。二、实验步骤1. 将CHO细胞培养在含10%血清的DMEM培养液中,先用DOX(阿霉素)0.01 ug/ml 诱导培养CHO细胞3个月。2. 然后在3个月内逐步增倍DOX的浓度达0.1 ul/ml,接着进行DOX低浓度的筛选。3. 随后用无菌钢圈套取抗性倍数较高的克隆RC1作CHO和RC1对DOX的剂量-反应曲线,求CHO和RC1的IC50值。4. 抗性倍数即为RC1的IC50与CHO的IC50。注意事项 1. 要具备培养细胞的实验室条件,谨防污染。2. 通过实验计算出敏感细胞对该药物的IC50......阅读全文

体外抗药肿瘤细胞模型的建立实验

实验方法原理 抗药性细胞模型的筛选大多采取长时间药物处理、诱导抗性,最总筛选出具有一定抗性的细胞克隆。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 小牛血清DMEMDOX仪器、耗材 CO2培养箱无菌钢圈实验步骤 一、培养条件用含10%小牛血清的DMEM培养液,5%CO2,37℃培养。二、实验步骤1.  将CHO细胞培

体外抗药肿瘤细胞模型的建立实验_细胞培养技术

实验方法原理体外抗药肿瘤细胞模型的建立实验采取长时间药物处理、诱导抗性,最终筛选出具有一定抗性的细胞克隆。实验材料小鼠试剂、试剂盒小牛血清DMEMDOX仪器、耗材CO2培养箱无菌钢圈实验步骤一、培养条件用含10%小牛血清的DMEM培养液,5%CO2,37℃培养。二、实验步骤1.  将CHO细胞培养在

肿瘤动物模型建立实验

一、肿瘤动物模型建立的意义: (1)评价抗肿瘤免疫治疗的疗效; (2)作为抗肿瘤药物筛选模型; (3)为肿瘤转移研究提供更好的研究平台; (4)为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具。 二、诱发性肿瘤动物模型 实验方法原理:诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病

肿瘤动物模型建立实验

  一、肿瘤动物模型建立的意义:   (1)评价抗肿瘤免疫治疗的疗效;   (2)作为抗肿瘤药物筛选模型;   (3)为肿瘤转移研究提供更好的研究平台;   (4)为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具。   二、诱发性肿瘤动物模型   实验方法原理:诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化

肿瘤动物模型建立实验(二)

2.二烃黄樟素(Dihydrosafrole)诱发大鼠食管癌(1)二烃黄樟素是一种制备啤酒的调味品,在大鼠饲料中加入百万分之二千五百至一万(2500~10000 ppm)黄樟素,就能引起20~75%的食管癌。3.甲基苄基亚硝胺诱发大鼠食管癌(1)用0.2%或0.005% 的甲基苄基亚硝胺水溶液,给动

肿瘤动物模型建立实验(二)

5、鼻咽癌(1)二甲基胆蒽(MC)诱发大鼠鼻咽癌① 取直径2~3 mm的硬质塑米管,在酒精灯上小火拉成锥形,每段长约3.5 cm,管内填以结晶体MC。② 小管一端用火封闭,以防药物外溢,尖端用针刺数孔,使MC能从小妃溢出。③ 取体重120 g左右的大白鼠,雌雄均可,乙醚麻醉后,由前鼻孔将上述含MC的

肿瘤动物模型建立实验(一)

实验方法原理 诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。实验材料 肿瘤细胞小鼠试剂、试剂盒 无血清培养基质3%中性甲醇石腊仪器、耗材 低温离心机血球计数器游标卡尺实验步骤 一、肝癌 1.二乙基亚硝胺(DEN)诱发大白鼠肝癌(1)取体重250 g左右的封闭群大白鼠,雌

肿瘤动物模型建立实验(三)

5、AKR白血病模型AKR小鼠为白血病高发品系,淋巴细胞白血病发病率雄性76%~90%,雌性为68%~90%。6、实验用6~12月龄AKR小鼠, 此时鼠的脾和淋巴结肿大,血象异常。7、经血液检查确诊为白血病后的次日, 配对分组并开始给予受试药,观察结果。8、结果判定观察指标:末梢血象,白细胞数,淋巴

肿瘤动物模型建立实验(一)

一、肿瘤动物模型建立的意义:(1)评价抗肿瘤免疫治疗的疗效;(2)作为抗肿瘤药物筛选模型;(3)为肿瘤转移研究提供更好的研究平台;(4)为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具。二、诱发性肿瘤动物模型实验方法原理:诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。实验材料:

肿瘤动物模型建立实验——诱发性肿瘤动物模型

肿瘤动物模型的建立可应用于:(1)评价抗肿瘤免疫治疗的疗效;(2)作为抗肿瘤药物筛选模型;(3)为肿瘤转移研究提供更好的研究平台;(4)为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具。实验方法原理诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。实验材料肿瘤细胞小鼠试剂、试剂盒无

肿瘤动物模型建立实验——自发型肿瘤动物模型

实验方法原理自发性肿瘤动物模型是指未经人为处理;自然发生的肿瘤动物模型,主要有自发性乳腺癌模型和自发性白血病模型。实验材料C3H小鼠A系小鼠CBA小鼠试剂、试剂盒受试药仪器、耗材记号笔脚规实验步骤一、自发性乳腺癌小鼠模型类型 1.  C3H小鼠:繁殖用雌鼠自发性乳腺癌发生率为85%~100%。 2.

前列腺原位肿瘤模型的建立实验

实验方法原理 10只BALB/C裸鼠前列腺背侧包膜内注入携带红色荧光蛋白(RFP)的前列腺癌PC-3细胞(PR7细胞)悬液20μL,第2、4、6、8周分别用非侵入式活体分子影像系统观察前列腺原位肿瘤发生及其转移情况。尸检取前列腺原位肿瘤、肺、肝、肾、股骨、盆腔淋巴结等组织,制成冰冻切片,通过荧光显微

裸鼠前列腺原位肿瘤模型的建立实验

裸鼠前列腺原位肿瘤模型的建立可以:(1)建立一种更接近于人类肿瘤体内自然生长过程的前列腺癌动物模型;(2)用于前列腺癌侵袭和转移的机制及有效的治疗措施研究。实验方法原理在10只裸鼠下腹部切口,显露膀胱和前列腺,用1 mL TB针筒、29G针头在其前列腺左右腹侧叶包膜下接种人前列腺癌DU145细胞50

裸鼠前列腺原位肿瘤模型的建立实验

实验方法原理 在10只裸鼠下腹部切口,显露膀胱和前列腺,用1 mL TB针筒、29G针头在其前列腺左右腹侧叶包膜下接种人前列腺癌DU145细胞50 μL,共计6 ×106 个,以建立原位肿瘤模型,观察裸小鼠生命体征变化。于濒死状态下处死,并取原位肿瘤、膀胱、盆腔淋巴结、肺脏和肝脏标本,用40

肿瘤动物模型如何建立?

  常规的动物实验,除了皮肤或者骨的缺损修复,癌症也是其中重要的一种。目前,癌症仍然威胁人类的一大疾病,因此需要动物实验来深入了解如何有效进一步治疗癌症。  通常,动物模型一般是研究者利用化学致癌剂或者致癌病毒诱发实验动物肿瘤。那么肿瘤动物实验模型建立的优点主要有:抗肿瘤药物的筛选以及疗效;抗肿瘤转

肿瘤细胞诱导血管生成模型实验

细胞培养技术             实验方法原理 无论原发性肿瘤还是继发性肿瘤,一旦生长直径超过1~2 mm,都会有血管生成。这是由于肿瘤细胞自身可分泌多种生长因子,诱导血管生成。

肿瘤细胞诱导血管生成模型实验

            实验方法原理 无论原发性肿瘤还是继发性肿瘤,一旦生长直径超过1~2 mm,都会有血管生成。这是由于肿瘤细胞自身可分泌多种生长因子,诱导血管生成。 实验材料

基于SDHB突变自发PC/PG肿瘤的大鼠模型及肿瘤细胞的建立...

基于SDHB突变自发PC/PG肿瘤的大鼠模型及肿瘤细胞的建立及意义

人弥漫性大B细胞淋巴瘤小鼠肿瘤模型的建立实验

实验方法原理 采用SCID 小鼠皮下接种107 细胞可成功地建立人人弥漫性大B 细胞淋巴瘤(DLBCL )移植瘤模型,成瘤率70%,肿瘤的组织学表现类似于人DLBCL。实验材料 SPF 级SCID 小鼠试剂、试剂盒 RPMI 1640培养液青霉素谷氨酰胺链霉素CD19 APC抗体CD20 PE抗体

帕金森体外模型帕金森体外模型

体外培养的中脑多巴胺能神经元MPTP损伤模型l实验操作:实验采用胚胎龄14一16天的大鼠,剖子宫取胎,取胎鼠中脑腹侧区。可将多个胚胎来源的组织收集在一起,置Fl2培养基(Gibco)至35mm的培养皿中,以细剪刀剪碎。将2ml含0.125%的胰酶的F12加入到组织中,该混合物于37oC孵育10分钟后

前列腺原位肿瘤模型的建立实验——原位种植法

前列腺原位肿瘤模型的建立可以:(1)连续活体监测前列腺癌发生、发展;(2)用于前列腺原位肿瘤生长及治疗的研究;(3)研究前列腺癌的生物学行为。实验方法原理10只BALB/C裸鼠前列腺背侧包膜内注入携带红色荧光蛋白(RFP)的前列腺癌PC-3细胞(PR7细胞)悬液20μL,第2、4、6、8周分别用非侵

常见体外肝细胞损伤模型

1.四氯化碳体外损伤肝细胞模型原代培养的正常大鼠肝细胞培养24h(贴壁良好)后,置培养皿于一密闭的塑料盒,内置四氯化碳0.4M容积,37度90min,造成肝细胞损伤的模型,后转入正常培养,进行下一步实验。(即熏蒸法)肝细胞培养12h后,吸弃上清,更换培养液并加入CCL4 8mM(事先用DMSO溶解,

个体化裸鼠荷人肺癌肿瘤模型的建立实验

实验方法原理 组织块移植组将直径2 mm的人肺癌新鲜标本癌组织块移植于BALB/C裸鼠背部皮下组织内,每例人肺癌新鲜标本均移植入5只裸鼠体内,成瘤者为第1代。取第1代移植瘤组织块以相同方法每例标本移植于另5只BALB/C裸鼠背部皮下组织内,成功者为第2代。重复上述传代方法得到第3代移植瘤。将人肺癌细

个体化裸鼠荷人肺癌肿瘤模型的建立实验

实验方法原理 组织块移植组将直径2 mm的人肺癌新鲜标本癌组织块移植于BALB/C裸鼠背部皮下组织内,每例人肺癌新鲜标本均移植入5只裸鼠体内,成瘤者为第1代。取第1代移植瘤组织块以相同方法每例标本移植于另5只BALB/C裸鼠背部皮下组织内,成功者为第2代。重复上述传代方法得到第3代移植瘤。将

肿瘤细胞侵袭实验——Matrigel-基质膜模型

肿瘤细胞侵袭实验(Tumour Invasion Assay)可应用于:(1)研究各种细胞因子对恶性肿瘤细胞侵袭和转移的影响;(2)一些抑制血管生成的新药研究;(3)研究肿瘤细胞侵袭和转移机制。实验方法原理Matrigel 是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分,含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸

研究揭示肿瘤细胞抗药新机理

  癌症患者接受化学疗法时产生抗药性,影响疗效。美国研究人员发现,这源于化疗药物损坏恶性肿瘤周围正常细胞,大量生成一种蛋白质,促进癌细胞生长并产生抗药性。   这项研究结果可能有助提高化疗效果,延长癌症患者生命。   生蛋白质   美国弗雷德・哈钦森癌症研究中心成员彼得S・纳尔逊率领

个体化裸鼠荷人肺癌肿瘤模型的建立实验——肺癌动物模型

个体化裸鼠荷人肺癌肿瘤模型的建立可以:(1)疾病定性筛选;(2)抗癌药物的筛选;(3)为患者进行个体化治疗提供药物筛选的依据;(4)为研究经过各项治疗后患者肿瘤细胞发生各种突变的情况和机制奠定基础。实验方法原理组织块移植组将直径2 mm的人肺癌新鲜标本癌组织块移植于BALB/C裸鼠背部皮下组织内,每

体外肝细胞损伤模型建立(CCl4和H2O2)

1 大鼠肝细胞的分离和培养 大鼠4%戊巴比妥麻醉,门静脉插管,先以无钙灌流液灌流,继以37℃通入O2的Ⅳ型胶原酶灌流液继续循环灌流15 min。将肝脏移至一平皿内,轻轻撕去肝包膜后,加入含5%小牛血清的清洗液,用吸管吹打成单个肝细胞悬液,200目尼龙网过滤,低速离心(500 r·min-1,1 mi

Cultex细胞暴露技术建立呼吸道过敏反应的人肺体外模型-2

图3:免疫细胞化学(A-C)和流式(D)的表面标记。A,B:ECs(A)和AMs(B)DAPI染色(蓝色信号)和抗-proSP-C(红色)。在ECs上检测到ProSP-C,但是在AMs上检测不到。C:DCs DAPI染色(蓝色信号)和CD86(红色)。大部分细胞CD86呈阴性(箭头)。 D:DCs

Cultex细胞暴露技术建立呼吸道过敏反应的人肺体外模型-1

方法简介化学品引起的呼吸道过敏反应,不论是体内还是体外,目前尚缺少有效的评价方法。因此,新实验方法的开发收到极大的关注,特别是考虑到REACH(《化学品注册、评估、许可和限制》)新的法规规定。应注意的是,REACH指导方针明确指出,应尽量避免动物实验,其中,化妆品材料应在2013年全面禁止动物实验。