数字PCR的原理是什么
数字PCR即Digital PCR（dPCR)，它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR，数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数，是对起始样品的绝对定量。 在定量PCR时，我们常常纠结一个问题，究竟是相对定量还是绝对定量呢？如今，你无需纠结了，因为数字PCR（digital PCR）来了。尽管这两种技术有些类似，都是估计起始样品中的核酸量，但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量，而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数，是对起始样品的绝对定量。因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域：拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究（如等位基因不平衡表达）、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。 PCR实际上是一个在模板DNA、引物(模板片段两端的已知序列)和四种脱氧核苷酸等存在的情况下，DNA聚合酶依赖的酶促合成反应，扩增的特异性取决于引物与模板DNA的......阅读全文
数字PCR在早期精准检验疫情的应用
2016年，全球首例数字PCR动物疫病检测试剂研发成功，包括禽流感、禽流感H7N9、蓝耳病、高致病性美州株、猪的流行性腹泻等动物疫病检测试剂盒。此项技术的推出，将有助于在食品安全的源头及早发现疫情，尽早处理避免更大面积的传染，更好地控制漏检，减少传染人的几率；也将有助于国家建立规范化、规模化的动
数字PCR在基因型鉴定的应用
PCR也可以用于检测一个生物中是否存在某特定DNA序列，这被称为基因型鉴定。例如，基因型鉴定可通过发现样品中是否存在某种群特异性序列来判断样本的真实性。基因型鉴定还可用于法医分析判断在现场发现的DNA样品是否和嫌疑人的吻合，令凶手无处遁形。
数字PCR在基因表达差异研究的应用
数字PCR由于检测时完全不依赖传统的Ct值即可实现真正意义上的绝对定量，因而可以提供比实时荧光定量PCR更精确的基因差异表达研究，尤其对于那些靶基因表达差异微小的情况，如：mRNA、microRNA、lncRNAs等的表达分析；等位基因的不平衡表达；单细胞基因表达分析；外泌体核酸分子定量分析等。
数字PCR助力艾滋病疗法的开发
Bio-Rad公司于去年底推出了QX100微滴式数字PCR系统，市场反应不错。最近，Sangamo BioSciences公司的研究人员利用此系统产生了高度精确且重复的数据，离HIV功能疗法的开发又近了一步。 让我们听听Sangamo BioSciences资深科学家Gary Lee的评价。“QX
数字PCR助力艾滋病疗法的开发
Bio-Rad公司于去年底推出了QX100微滴式数字PCR系统，市场反应不错。最近，Sangamo BioSciences公司的研究人员利用此系统产生了高度精确且重复的数据，离HIV功能疗法的开发又近了一步。 让我们听听Sangamo BioSciences资深科学家Gary Le
数字PCR在肠道菌群分析的应用
数字PCR技术直接计算目的序列的拷贝数，对样品中的微生物实现了绝对定量，可用于微生物检测，以便进一步研究肠道菌群的结构、功能以及数量。
数字PCR在病毒临床检测中的应用
概述2015年刚成历史，2016年已在眼前。就这样，年复一年间沧海成桑田。生命科学领域，新方法层出不穷，老方法不断升级，好不热闹。也如孔子的感叹：逝者如斯夫，不舍昼夜。就拿PCR技术来说，荧光定量PCR作为一种进行基因表达分析的技术，截至目前最大的应用市场是病原微生物的核酸体外诊断。展望未来，作为q
crystal数字PCR如何实现的核酸绝对定量？
crystal数字PCR技术是一种核酸分子的绝对定量技术，原理是将PCR反应体系分配到大量微小的反应器中，在每个微反应器中包含或不包含 1 个或多个拷贝的目标核酸分子 (DNA 模板) ，进行"单分子模板"PCR 扩增。扩增结束后，通过阳性反应单元(通过终点荧光信号判断)的数目和统计学方法计
数字PCR在食品安全检测的应用
食品安全日益成为一个重要的公共卫生问题, 受到社会及国家的高度重视。食源性疾病、食品原料造假、转基因食品等逐渐呈现出普遍增长的趋势。食源性疾病是指通过摄食而进入人体的有毒有害物质等致病因子所造成的疾病。比如常见的食物中毒、肠道传染病、人畜共患传染病、寄生虫病等。食源性疾患的发病率居各类疾病总发病率的
数字PCR在移植排斥监控中的应用
为了降低器官移植中移植物排斥导致的风险，数字PCR技术通过监测受体中移植器官供体的循环DNA水平来检测早期移植排斥。
NaicaTM－crystal－微滴芯片式数字PCR系统
导语：数字PCR技术是基于PCR技术发展起来的核酸检测和定量的最新技术，在众多应用中，在精准医疗方面的应用尤为突出。法国Stilla Technologies公司专注于开发新一代核酸绝对定量技术，其旗下品牌Naica TM Crystal全自动微滴芯片数字PCR仪系统具有高灵敏度、高精
数字PCR在肿瘤治疗的伴随诊断的应用
常用体液来源（如血液，胸腹水，唾液及尿液等）的待检标本中的DNA，有正常脱落体细胞和病变脱落细胞两种来源，前者的量远大于后者。通过微液滴处理能在每个微液滴中有效减少正常体细胞DNA的干扰，实现肿瘤标记物的有效检测，如EGFR，ALK，ROS1，KRAS、BRAF等基因的突变检测、乳腺癌/胃癌的HE
数字PCR在甲基化含量鉴定的应用
作为表观遗传学研究中重要的一个研究方向——甲基化程度分析，现阶段有不同的方法或技术来进行研究：如传统的亚硫酸氢盐处理后的克隆测序法、抗体检测法、定量PCR检测法等受限于方法学的问题，不能获得甲基化程度的精确定量，而数字PCR系统通过对样品的微液滴处理及目标分子的绝对拷贝数定量，为甲基化程度的精确定量
NACIA数字PCR引物探针设计——Geneπ课堂
NACIA数字PCR用引物与普通PCR引物设计要求不同：普通PCR的目的是获得目的基因，对非特异性反应和引物二聚体要求不严格；而数字PCR引物跟real-time PCR引物一样对非特异性反应和引物二聚体要求严格。NACIA数字PCR引物及探针设计的总体原则v 先选择好探针，然后设计引物使其尽可能的
数字PCR在肿瘤的液体活检中的应用
肿瘤学研究是数字PCR的重要应用领域，该技术作为极为重要的工具，能够识别DNA突变（例如EGFR）、肿瘤患者用药监控、基因扩增检测、循环肿瘤细胞（CTC）特性研究、长链非编码RNA检测、液体活检中循环的核酸（cfDNA）和肿瘤细胞（CTC）的绝对定量等研究中。
数字PCR和HRM在肿瘤样本中的应用
摘要：Vogelstein和Kinzler（美国国家科学院院刊，1999年）第一次描述了Digital PCR（dPCR）的概念，一种在微量细胞群中（如原发性肿瘤组织）鉴定突变的方法。通过稀释样品DNA到一个单个分子水平，它可以把PCR自然模拟指数转化为数字信号。当PCR成功的扩增出这些单个
数字PCR新方法来测量端粒长度
近日，新加坡国立大学利用数字PCR技术，开发出一种新颖、快速的端粒测量方法—单端粒绝对长度快速分析法(SATR)，可在临床环境中快速确定癌症和年龄相关疾病中的端粒酶异常，有助于临床医生更快地为患者进行诊断与计划治疗对策。相关研究日前已发表在《Science Advances 》期刊上。STAR分
数字PCR技术能否终结核酸检测“灰区”
郭永（清华大学供图）目前，新冠疫情仍在全球猖狂肆虐。虽国内新冠疫情防控卓有成效，但在西安、河南、天津、北京等地仍有确诊病例出现，特别是新冠病毒接连出现了德尔塔株、奥密克戎株等变异株，无疑让严峻的防疫形势“雪上加霜”。实时荧光PCR核酸检测被认为是新冠检测的金标准，但仍有亟须解决的问题，如单基因阳性、
数字PCR在糖尿病治疗中的应用
数字PCR技术目前在糖尿病中的研究热点，通过定量检测非甲基化DNA的水平，对I型糖尿病β细胞死亡进行定量，从而监控病情发展。
数字PCR技术能否终结核酸检测“灰区”？
郭永（清华大学供图）目前，新冠疫情仍在全球猖狂肆虐。虽国内新冠疫情防控卓有成效，但在西安、河南、天津、北京等地仍有确诊病例出现，特别是新冠病毒接连出现了德尔塔株、奥密克戎株等变异株，无疑让严峻的防疫形势“雪上加霜”。实时荧光PCR核酸检测被认为是新冠检测的金标准，但仍有亟须解决的问题，如单基因阳性、
Nacia数字PCR在基因表达分析中的应用
华盛顿大学医学院儿科和加利福尼亚大学圣地亚哥分校医学院儿科的研究人员建立了一个稳定可靠的基于RNA磁珠提取和数字PCR的方法，可从粪便样本中检测与EE（热带肠病）关联的人mRNA，灵敏度可达20拷贝GAPDH mRNA/200mg粪便样本。已有报道表明病人粪便中存在人mRNA，可作为反应病人消化道病
数字PCR在－药物基因组检测的应用
能够通过PCR技术实现药物基因组的检测，提高合理用药水平，具有通量较高，操作简单，仪器设备易普及等优点。 数字PCR冷知识：胎儿性别不是只有B超可以看出来，一只精通数字PCR的科研狗，也可以测出来。
数字PCR在无创产前筛查的应用
无创伤的产前诊断, 如21号染色体为3倍体的唐氏综合征、已知父母基因型的胎儿地中海贫血或胎儿遗传性耳聋基因检测等。目前无创检测标本来源主要为孕妇血液，而待检测的胎儿DNA受到母体DNA的干扰，影响了检测的准确性。数字PCR技术可以作为二代测序法的补充来进行无创伤产前诊断，从而提高工作效率、降低检测
数字PCR技术：从液体活检走向商业临床市场
2017年12月Bio-Rad BCR-ABL基因融合ddPCR检测试剂盒获得CE-IVD 认证（产品进入欧盟境内销售的通行证），这是基于ddPCR技术第一个获批的可用于临床检测的、基于血液样本的、用于监测慢性粒细胞白血病患者疗效的诊断试剂。在上周 JP摩根健康产业大会上， Bio-Rad CE
基于EVAGREEN®方法的CRYSTAL数字PCR绝对定量检测
基于EVAGREEN®方法的CRYSTAL数字PCR绝对定量检测EvaGreen®是一种无致突变性、无细胞毒性的DNA结合染料，NaicaTM Crystal全自动微滴芯片数字PCR仪系统可兼容EvaGreen®染料进行的数字PCR实验分析。反应体系中游离的的EvaGreen®染料不发出荧光信号，但
数字PCR技术精确检测癌症基因组扩增
来自斯坦福大学以及Bio-Rad的研究人员证实，数字PCR系统能够精确测定长期存放的癌组织样本中的癌症基因组扩增。该研究成果发表在《Translational Medicine》杂志上。 某些拷贝数变异(如基因组扩增)可能导致特定癌基因的过表达，推动癌症发展。靶定扩增的癌基因有望实现癌
你想要知道的数字PCR应用及前景
一． PCR的发展历史 PCR技术自问世以来，在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用。第一代 PCR在进行扩增后通过凝胶电泳进行定性分析。 随着生物分子荧光技术的发展，1992年实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,
转基因植物产品数字PCR检测方法
转基因植物产品数字PCR检测方法 前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由全国生化检测标准化技术委员会（SAC/TC 387）提出并归口 。本标准主要起草单位 ： 中国检验检疫科学研究院、广西出入境检验检疫局检验检疫技术中心 、中国农业大学 、中国农业科学院油菜作物研究所。本
神通广大的数字PCR，到底有多厉害？
什么是数字PCR？ 提起PCR，在生物及其相关行业内可谓无人不知无人不晓，半个世纪以来分子诊断的高速发展离不开分子生物学技术特别是PCR技术日新月异的进步。1983年由美国Mullis首先提出设想，1985年发明了聚合酶链反应，即简易DNA扩增法，标志着PCR技术的真正诞生。1999 年，美
数字PCR和基因组拷贝数变异研究
概述什么是拷贝数变异？为什么要对拷贝数变异进行研究？复旦大学杜仁骞、金力和张锋三位老师发表于2011年8月《遗传》的综述，给出了简明扼要的说明与回答，特引述如下：“拷贝数变异（Copy number variation, CNV）是由基因组发生重排而导至的，一般指长度为1 Kb以上的基因组大