数字PCR在病毒临床检测中的应用
概述2015年刚成历史，2016年已在眼前。就这样，年复一年间沧海成桑田。生命科学领域，新方法层出不穷，老方法不断升级，好不热闹。也如孔子的感叹：逝者如斯夫，不舍昼夜。就拿PCR技术来说，荧光定量PCR作为一种进行基因表达分析的技术，截至目前最大的应用市场是病原微生物的核酸体外诊断。展望未来，作为qPCR升级版的数字PCR，最大的应用市场必然将转变成肿瘤相关的液态活检，对此陈斯卡坚信不疑。那么，数字PCR在病原微生物的核酸体外诊断方面，是否仍然存在机会？是否在某些方面具有更出色的表现？对于《Lennette's Laboratory Diagnosis of Viral Infections第四版》的编辑Keith R. Jerome而言，答案是肯定的。2013年1月他就撰文，显然看好数字PCR在病毒检测中的应用前景，但2013年年初时，来自学术界一线的数据还较少，所以那篇综述可以理解为仅仅是他个人的看好。一年后......阅读全文
数字PCR在病毒临床检测中的应用
概述2015年刚成历史，2016年已在眼前。就这样，年复一年间沧海成桑田。生命科学领域，新方法层出不穷，老方法不断升级，好不热闹。也如孔子的感叹：逝者如斯夫，不舍昼夜。就拿PCR技术来说，荧光定量PCR作为一种进行基因表达分析的技术，截至目前最大的应用市场是病原微生物的核酸体外诊断。展望未来，作为q
数字PCR在临床和预后融合基因检测的应用
众所周知，融合基因检测对临床诊断及预后指导都具有十分重要的意义。那么究竟什么是融合基因呢？融合基因的发现始于上个世纪60年代，它是指染色体断裂后又重新拼接。如果恰巧拼接时发生了错误，使两个不同基因互相融合，大多数情况下，它会造成某些序列或功能异常的蛋白表达，亦或者是某些基因表达失调，从而促进肿瘤的发
微滴芯片数字PCR技术在检测新冠病毒的应用
国家卫健委发布了《新型冠状病毒肺炎防控方案（第五版）》，其中在实验室检测技术指南中明确提出，核酸检测结果阴性不能排除新型冠状病毒感染。3月4日，国家卫健委发布的《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第七版）》 中提到了以下两点：对疑似病例要尽可能采取包括快速抗原检测和多重PCR核酸检测等方法对呼吸道病
数字PCR在转基因食品或成分检测中的应用
目前在确定转基因作物或成分的含量时采取定量PCR的标准曲线法，这种方法需要依赖于已知浓度的标准品(Certified Reference Materials Calibrants, CRMCs)。ddPCR绝对定量的方式可以彻底解决这些标准物质的定标工作，从而确保安全和品质。
数字PCR技术在DNA甲基化检测中的应用
DNA甲基化是目前研究最多的表观遗传修饰之一，发生于CpG二核苷酸序列C5位置的胞嘧啶上，多发生于CpG岛上，研究发现，DNA甲基化参与调节多种细胞过程，包括胚胎发育，转录，X染色体失活，基因组印迹、染色体稳定性等。许多研究发现，DNA甲基化在一系列的疾病（如癌症等）起到十分重要的作用。在癌症患者中
数字PCR在致病微生物（病毒、细菌等）的检测的应用
疾病预防控制中心、出入境检验检疫局系统的实验室可以将基于TaqMan探针法的定量PCR体系无缝地转移到数字PCR上，从而满足该类实验室对于检测结果的要求：灵敏度更高、重复性更好、无需依赖标准曲线的绝对定量结果，同时操作简便。
数字PCR在移植排斥监控中的应用
为了降低器官移植中移植物排斥导致的风险，数字PCR技术通过监测受体中移植器官供体的循环DNA水平来检测早期移植排斥。
数字PCR在食品安全检测的应用
食品安全日益成为一个重要的公共卫生问题, 受到社会及国家的高度重视。食源性疾病、食品原料造假、转基因食品等逐渐呈现出普遍增长的趋势。食源性疾病是指通过摄食而进入人体的有毒有害物质等致病因子所造成的疾病。比如常见的食物中毒、肠道传染病、人畜共患传染病、寄生虫病等。食源性疾患的发病率居各类疾病总发病率的
数字PCR在肿瘤的液体活检中的应用
肿瘤学研究是数字PCR的重要应用领域，该技术作为极为重要的工具，能够识别DNA突变（例如EGFR）、肿瘤患者用药监控、基因扩增检测、循环肿瘤细胞（CTC）特性研究、长链非编码RNA检测、液体活检中循环的核酸（cfDNA）和肿瘤细胞（CTC）的绝对定量等研究中。
数字PCR和HRM在肿瘤样本中的应用
摘要：Vogelstein和Kinzler（美国国家科学院院刊，1999年）第一次描述了Digital PCR（dPCR）的概念，一种在微量细胞群中（如原发性肿瘤组织）鉴定突变的方法。通过稀释样品DNA到一个单个分子水平，它可以把PCR自然模拟指数转化为数字信号。当PCR成功的扩增出这些单个
数字PCR在糖尿病治疗中的应用
数字PCR技术目前在糖尿病中的研究热点，通过定量检测非甲基化DNA的水平，对I型糖尿病β细胞死亡进行定量，从而监控病情发展。
Nacia数字PCR在基因表达分析中的应用
华盛顿大学医学院儿科和加利福尼亚大学圣地亚哥分校医学院儿科的研究人员建立了一个稳定可靠的基于RNA磁珠提取和数字PCR的方法，可从粪便样本中检测与EE（热带肠病）关联的人mRNA，灵敏度可达20拷贝GAPDH mRNA/200mg粪便样本。已有报道表明病人粪便中存在人mRNA，可作为反应病人消化道病
血浆中ctDNA甲基化数字PCR检测攻略Naica数字PCR的应用
基因调控区的DNA甲基化状态的改变可导致多种癌症的发生。这种表观遗传学改变在生物学上是稳定的，并存在于循环肿瘤DNA（ctDNA）中，使其适合于早期检测和无创动态监测肿瘤负荷。数字PCR技术凭借其较高的灵敏度、精准度以及对抑制剂的耐受度，在对低拷贝样品检测时表现出了极大的优势。在转移性和II/III
数字PCR在－药物基因组检测的应用
能够通过PCR技术实现药物基因组的检测，提高合理用药水平，具有通量较高，操作简单，仪器设备易普及等优点。 数字PCR冷知识：胎儿性别不是只有B超可以看出来，一只精通数字PCR的科研狗，也可以测出来。
PCR在临床检验中的应用（四）
遗传病是由于遗传基础异常而引起的疾病，人类遗传病约有3000多种，患者占总人口数的10％。遗传病大概可分为单基因、多基因及染色体遗传病。常用诊断方法有家系谱分析、染色体检查（特别是显带法）、生物化分析等。随分子生物学发展，基因诊断愈来愈表现出其优越性，PCR技术是基因诊断的主要技术之一，为快速、准确
PCR在临床检验中的应用（三）
我国恶性肿瘤为人口死亡的第一位原因，其中以肺癌、胃癌及食管癌的发病率最高，占恶性肿瘤死亡总数的60％以上。引起肿瘤的原因非常复杂包括外界环境因素及遗传背景。外界因此可分为三大类即化学、物理及生物因素。肿瘤与遗传有关的证据越来越多，除已知的单基因遗传肿瘤如视网膜细胞瘤、肾母细胞瘤等以外，
PCR在临床检验中的应用（二）
呼吸系统感染性疾病主要的有肺结核、非典型性肺炎等。结核杆菌感染曾给人类健康带来很大威胁，一度是较严重的致死性疾病之一。解放以后由于对结核病的预防的重视，特别是特效抗痨药物的出现，使结核病流行基本被控制。近来结核病有抬头的趋势，基原因可能有两方面，其一是耐药株的不断出现，其二是对结核预防
PCR在临床检验中的应用（一）
医学检验大致可分为形态学、生物化学、血清免疫学和分子生物学几大类，其分别代表几代实验诊断技术。60年代DNA双螺旋结构及半保留复制模式的出现，70年代基因重组及体外基因克隆技术、分子杂交技术的应用使分子生物学在疾病诊断中得到了长足的发展。特别是1985年Mullis发明了聚合酶链式反应（PCR）技术
数字PCR在传染性疾病的检测的应用
数字PCR技术因起高精密度、耐受能力强、高灵敏度等优点，逐渐被用于病毒载量分析的相关研究。如HIV抗逆转录病毒治疗过程中病毒残留量的监控；HBV耐药突变的检测；HCV的分子分型；抗甲氧西林金黄色葡萄球菌的院内感染监控；环境微生物不同功能基因之间的连锁分析等等。
PCR检测输血传播病毒DNA的临床应用
在急慢性输血后肝炎、散发性肝炎、急性重型肝炎及肝硬化病例中，有部分病例无法用已建立的甲、乙、丙、丁、戊型肝炎的实验室诊断方法进行病原学分型。继1995年发现庚型肝炎病毒（HGV）后，1997年日本学者Nishizawa等［1］报道了应用代表性分析法发现了一种可能与输血后肝炎相关的病毒，暂时称为输血传
数字PCR在环境监测的应用
基因目标的环境监测，需要对复杂样品中低浓度的目标进行准确检测。ddPCR每次运行中能创建数千个PCR反应室，带来了目标的准确测定，即使它们浓度很低，因此可以实现对土壤、污水、淤泥、酒泥等为样本的环境生物学研究和病原微生物监测。
数字PCR在－癌症标志物稀有突变检测的应用
在一份给定的样本中，相比于野生型DNA，癌症相关的突变序列比例较低，经常无法检测。而凭借其超高灵敏度，dPCR系统可以很容易地定量分析低至0.001%-0.0001%的突变频率。之前用任何方法都无法实现准确稳定检测的样本，现在可以使用dPCR轻松进行定量分析。例如，已实现肺癌相关的表皮生长因子受体
PCR技术在突变基因检测中的应用
基因突变(gene mutation)是遗传病和肿瘤发生的根本原因，检测与遗传病及恶 性肿瘤发生有关的突变基因(mutant gene)是分子生物学，医学遗传学及肿瘤学研究 的热点，它对阐明遗传病和肿瘤发生的分子生物学基础及其诊断和早期诊断具有重要 ＼意义，分子生物学技术的发展，尤其是PCR技术的出
PCR技术及其在临床诊断应用中的进展
一、病原体的定性及定量检测，PCR及其相关技术适用于病毒，细菌、寄生虫等所有病原体的检测，以下就SDA首批的四种病原体基因诊断项目加以说明。1. PCR技术在结核菌检测中的应用及意义结核菌基因诊断的意义主要表现在：a. 区分TB与其它分枝杆菌；b. 检测TB耐药基因；c . 提高TB的阳性检出率。2
数字PCR在癌症早筛和微小残留病灶检测的应用
最近几十年的大量研究表明，在许多血液系统恶性肿瘤中，微小残留病灶（MRD）与临床结果及预后显著相关。癌症中MRD是指癌症治疗达到完全缓解后，用常规的形态学检测方法不能检测到明显的癌病灶，而此时体内仍存在的少量癌细胞。微小残留病灶是肿瘤复发的直接原因。目前应用最广泛最精确的MRD检测手段是通过取患者的
数字PCR在早期精准检验疫情的应用
2016年，全球首例数字PCR动物疫病检测试剂研发成功，包括禽流感、禽流感H7N9、蓝耳病、高致病性美州株、猪的流行性腹泻等动物疫病检测试剂盒。此项技术的推出，将有助于在食品安全的源头及早发现疫情，尽早处理避免更大面积的传染，更好地控制漏检，减少传染人的几率；也将有助于国家建立规范化、规模化的动
数字PCR在基因型鉴定的应用
PCR也可以用于检测一个生物中是否存在某特定DNA序列，这被称为基因型鉴定。例如，基因型鉴定可通过发现样品中是否存在某种群特异性序列来判断样本的真实性。基因型鉴定还可用于法医分析判断在现场发现的DNA样品是否和嫌疑人的吻合，令凶手无处遁形。
数字PCR在基因表达差异研究的应用
数字PCR由于检测时完全不依赖传统的Ct值即可实现真正意义上的绝对定量，因而可以提供比实时荧光定量PCR更精确的基因差异表达研究，尤其对于那些靶基因表达差异微小的情况，如：mRNA、microRNA、lncRNAs等的表达分析；等位基因的不平衡表达；单细胞基因表达分析；外泌体核酸分子定量分析等。
数字PCR在肠道菌群分析的应用
数字PCR技术直接计算目的序列的拷贝数，对样品中的微生物实现了绝对定量，可用于微生物检测，以便进一步研究肠道菌群的结构、功能以及数量。
PCR快速检测技术及其在食品中的应用
[摘 要] 微生物食品安全是当前消费者与食品工业共同关注的话题,食品中致病菌的快速、准确、简便检测,对于食品安全质量控制以及食品链中致病性细菌的溯源追踪具有重要作用。在选用微生物的快速检测方法时，应该考虑到方法的预期目标的精确性、检测时间、经济性、可接受性、操作简便性、技术服务等因素。介绍了P