一种针对细胞表面受体进行抗体筛选的多重分析方法三
多激光扫描mirrorball的三激光使得用户可以利用多种荧光标记的标志物进行细胞计数分析。在该研究中,A549细胞被DiO标记(488nm激光激发),同时利用EGFR抗体和AlexaFluor 647标记物进行多重分析。经过过夜的孵育,利用488nm和640nm双重激光进行细胞数和EGFR标记分析。图2表明在细胞数目恒定的情况下,,细胞的总荧光强度随着EGFR抗体浓度的增加而加强。非常重要的一个特征,细胞数目可以在没有EGFR抗体结合的情况下得到。图2:A549细胞总荧光强度随着EGFR浓度增加而加强,细胞计数可单独读取。细胞的多重分析mirrorball所独有的多种激光同时扫描特征可以在转染和宿主混合细胞中区分出抗原表达和未表达的细胞群体。为了阐明该方面的特性,在A549(EGFR+)和CSFE标记的Jurkat (EGFR-)进行EGFR抗体的结合筛选实验。在分析之前,将Jurkat细胞进行CSFE(10n......阅读全文
多重PCR反应的方法
一)选择目标基因由于多重PCR在同一个反应体系中需要加入多对引物,而模板直接影响扩增的结果分析,这就导致了扩增模板的选择至关重要。同时,扩增区域的选择必须符合分析的目的,如通常对于致病微生物,需要选择其保守序列,如16sRNA,或者毒力基因、毒力相关基因,以防止检测到非致病突变体而无法解释结果;对于
《细胞》:利用RNA干扰抵御艾滋病毒
这种策略可能被开发成对人类的临床应用 美国科学家近日开发出了一种利用抗体将短链RNA(siRNAs)直接送至免疫细胞的方法,并通过RNA干扰极大地帮助抑制HIV病毒对小鼠的感染。相关论文8月7日在线发表于《细胞》(Cell)杂志上。 进行此次研究的是美国哈佛医学院的Priti Kumar和同事。
研究发展出自噬驱动的细胞膜蛋白靶向降解技术
靶向蛋白降解是新的药物研发策略。这一策略利用细胞自身的降解机制,实现对特定蛋白质的选择性清除,在解决传统药物难以触及的“不可成药靶点”方面展现了潜力。位于细胞表面的细胞膜蛋白,广泛参与细胞识别、物质运输、信号转导等生命活动,是重要的药物研发靶点。近年来,针对细胞膜蛋白,涌现出以LYTAC和AbTAC
声学所提出一种针对双耳重放的声源仰角参数化控制方法
仰角感知在双耳重放中起着重要的作用。人类听觉系统对仰角的感知主要依靠双耳接收信号的谱信息。近年来,谱信息对仰角感知的影响一直是科研人员关注的热点,基于头相关传输函数(Head Related Transfer Function, HRTF)的音效定位研究表明频谱中的峰值点和谷点是决定声源仰角感知
利用抗独特型抗体激活表达广泛中和抗体的前体B细胞
诱导保护性的广泛中和抗体(broadly neutralizing antibody, bNAb)产生是成功接种疫苗的关键策略。然而,对于许多重要的全球性疾病,如艾滋病和流感,人们尚未实现高效的疫苗接种。 一种开发新疫苗的策略专注于鉴定出病原体上的特定脆弱靶标,疫苗诱导出的保护性抗体应当能够靶
杂交瘤细胞怎么筛选分离方法
第一次用加入氨基蝶呤的选择培养基选择出融合正确的杂交瘤细胞第二次用抗原抗体反应选择出可以产生抗体的杂交瘤细胞。
药物动力学模拟新算法,将减少新冠药物开发时间
英国《自然》杂志近日在线发表一篇重磅研究。在美国华盛顿大学蛋白质设计研究所所长、2021年生命科学突破奖获得者戴维·贝克的带领下,研究人员创造了一种生产蛋白质药物的强大新方法。利用计算机,他们设计了可以针对体内重要蛋白质(如胰岛素受体,以及病毒的表面蛋白)的小分子结合蛋白。这一进展或有助于开发应对诸
10月王牌聚焦:突破性研究汇集的丰收季节
金秋十月,丰收的季节,生命科学研究也出现了不少重要研究突破,比如CRISPR与非编码基因组,艾滋病研究的重要突变,还有癌细胞转移,表观遗传研究领域的新发现等等。 Science杂志上两项研究完成了迄今为止很难做到的靶向工作,也就是天然人类基因组中与重要表型相关序列中的非编码区域。虽然与传统分析
十大畅销,大分子药物占-80%,你的制药方案够全面吗?
抗体药经过 30 余年的发展,已成为全球医药市场的重要组成部分,目前大分子生物制药市场(包括重组蛋白类药物)急速增长已突破千万亿美元。从 2017 年市场表现来看,全球 10 大最畅销药物中:除 2 个小分子药物以外,另外 8 个都是大分子药物,包括 6 个抗体药物和 2 个融合蛋白。其中药王“
蛋白质“3D照片”有望让未来药物“一石数鸟”
2018新年伊始,上海科技大学iHuman研究所在人体细胞信号转导研究领域再获重大突破。该团队率先解析了与肥胖、精神类疾病密切相关靶点——五羟色胺2C受体(human serotonin 2C receptor, 5-HT2C)的三维精细结构,并以此为线索,揭示了人体细胞信号转导中的“重要成员
用CRISPR/Cas9对CART细胞进行多重基因编辑(一)
作者:Xiaojuan Liu1, *, Yongping Zhang2, *, Chen Cheng1, 3, *, Albert W Cheng4, Xingying Zhang1, 5, Na Li1, Changqing Xia2, 6, Xiaofei Wei7, Xiang Li
用CRISPR/Cas9对CART细胞进行多重基因编辑(二)
细胞系 Cell linesThe following CD19-expressing immortalized cell lines were used: Raji (Burkitt’s lymphoma cell line, ATCC-CCL86),Daudi (B lymphoblast ce
亲和质谱技术:药物靶标配体的高通量筛选
疾病相关的药物靶标蛋白与小分子化合物的亲和作用研究是当今开发新药分子的热点领域。亲和质谱技术(Affinity Selection Mass Spectrometry)作为一种间接筛选小分子配体的方法,已经成功应用于许多受体、酶等靶蛋白的配体的筛选,并且得到了广泛的应用。 亲和质谱分析的基本原
气体吸附法进行比表面及孔径分析仪分析进展
气体吸附法是获得多孔材料全面表征的极好方法,它可以反映比表面、孔径分布等方面的信息。但是,这需要对吸附过程有一个详细的了解,包括多孔材料对流体的吸附和相变化及其对吸附等温线的影响,这是表面分析和孔分析的基础。 孔宽,孔形及有效的吸附能与孔填充过程有关。如果是所谓微孔(按照IUPAC 分类,
最新Cell!上科大团队揭示GPCR多重药理学分子机制
近几年来,以上海科技大学和中科院上海药物所为代表的国内研究机构屡次在GPCR领域取得重要进展,特别是去年5月份,Nature集中发表中国科学家多项GPCR重大成果,这标志着国内在该领域处于世界前列。 2018新年伊始,中科院上海药物所吴蓓丽研究组在揭示B型GPCR信号转导机制研究方面再次取得重
Biacore分子互作技术加速抗体药研发和申报
【导语】抗体药研发涉及筛选、活性检测、表位作图、一致性评价、免疫原性和质量控制等环节——Biacore 作为药物活性检测平台,可以满足药物研发多个环节的需求,加快研发速度,其准确稳定的数据质量已经得到了药企和监管部门的广泛应用和认可。本文将利用抗体研发与质控中的几个重要环节来展示Biacore 分子
乙肝表面抗体阳性的意义
1、单项抗-HBs阳性 (1)接种乙肝疫苗成功的标志;(2)单项低效价抗-HBs阳性有时为非特异性反应。 2、与抗-HBc、抗-HBe同时阳性 机体自然感染(包括隐性感染和显性感染)乙肝病毒(HBV)以后发生免疫应答,乙肝病毒被清除,机体获得抵御乙肝病毒再次侵袭的特异性免疫力; 3、与HBs
乙肝表面抗体阳性的概述
乙肝表面抗体详解:乙肝表面抗体是人体的保护性的抗体,主要是乙肝病毒表面抗原刺激人体免疫系统而产生的抗体。它的出现,能中和掉人体内的乙肝病毒。具体保护人体的作用。其英文简写为HBsAb。
【干货】抗体药的渐变之路
20世纪90年代末,治疗药物主要由小分子化药主导。而在近几十年里,人类生命健康领域基于抗体药物疗法的使用呈现了指数级增长,并成为了治疗药物的一大组成部分。抗体已被证明在治疗包括癌症、自身免疫、传染病甚至神经退行性疾病在内的多种疾病方面具有广泛的用途[1]。FDA仅在2018年就批准了59款新药,
单抗药和-Remdesivir-组合是治疗新冠肺炎的救星吗?
截止至2020年2月10日17时,2019-nCoV所致的肺炎死亡率为2.3%左右。可以预见,进一步研究2019-nCoV病毒感染致病机制,进而针对性开发有效药物,最终降低新型冠状病毒肺炎的死亡率,将是今后新冠肺炎防治工作和相关科学研究的重要组成部分。 但问题是: ● 治疗新型冠状病毒肺炎未
Cell:将受体固定在癌细胞表面,免疫治疗精准打击
一种安全可控的体内内吞操作可能具有破坏性的治疗潜力。为此,来自昆士兰大学的研究人员领导的研究小组证明了抗吐剂/抗精神病药丙氯哌嗪可被重新使用,以可逆地抑制治疗性单克隆抗体靶向的膜蛋白的体内内吞作用。 研究人员在人肿瘤体外实验中直接证明了这一点。短暂的抑制内吞可增强靶细胞的可用性,并提高自然杀伤
FcRn亲和层析HPLC法可用于评估IgG抗体质量属性
IgG抗体与新生儿Fc受体(FcRn)的结合力与抗体的血清半衰期相关。细胞通过胞饮作用以非特异性方式将IgG抗体摄入。在初级内体囊泡(early endosome vesicle)的低pH下,IgG抗体能够以pH依赖性方式与FcRn结合,随后再循环回到细胞表面上,而不是在溶酶体中被降解。一旦这种
SLAS-2013分会:美国年会创新计划奖项的侯选者及获得者
2013年6月6日,实验室自动化与筛选协会2013亚洲会展在上海金茂君悦大酒店盛大开幕,国内外知名药企、生物医学研究专家、学者等应邀参会。“美国年会创新计划奖项的候选者及获得者”报告分论坛于6月7日下午举行,由RainDance科技研发副总裁Darren R.Link博士、百时美施贵宝公司高级研
ABI-8200-FMAT的理想替代技术:“混合即读一步法检测”模式-3
图3 Mirrorball允许不依赖荧光抗体的结合量来测量CFSE标记的细胞。而在ABI 8200平台上,细胞必须有荧光抗体的结合才能被检测的到不仅Mirrorball提供了和ABI 8200一样的高灵敏度,而且与ABI 8200只能扫描1 mm2的区域相比,它能够扫描整个孔内的细胞并且不受细胞分布
Mirrorball高通量抗体筛选平台的应用:一步法检测,抗...2
数据结果 为了比较Mirrorball和ABI 8200在EGFR检测灵敏度方面的差异性,将A431细胞与梯度稀释的EGFR一抗以及AlexaFluor647标记的goat anti-mouse IgG二抗共同孵育。在用Mirroball分析时,用CFSE对细胞进行染色,预先定位细胞并进
科学家建立一种新的离子通道药物筛选方法
9月26日,《自然-通讯》期刊在线发表了中国科学院神经科学研究所、中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心、神经科学国家重点实验室蔡时青研究组与首都医科大学附属北京安贞医院教授兰峰团队合作的题为《利用离子通道疾病线虫模型筛选调控离子通道功能的小分子化合物》的研究论文。该研究构建了在小动物体系高通量
DIN发布针对泳池进行全面风险评估的标准
德国标准化协会(DIN)发布修订后的系列标准DIN EN 15288“公共游泳池”,其中包括第1部分“规划和施工的安全要求”和第2部分“操作的安全要求”。该系列标准主要针对泳池工作人员、建筑商和审查员。标准中规定,泳池运营人员应在泳池投入使用之前确定泳池所需的基础设施、组织和人员要求。如果泳池已经投
分子互作方法之BIAcore!
BIAcore是一种基于光学表面等离子共振(Surface Plasmon Resonance,简称SPR)原理的用于分子互作分析的常用方法。因为其准确性高、重复性好、应用广泛,目前SPR原理用于药物分析的方法已经被录入中国、美国、日本的药典,基于BIAcore方法的文献也已经超过了15000篇。那
细胞表面抗原检测实验_免疫荧光抗体法
细胞表面有糖蛋白,这种蛋白质上有多糖,起到识别作用,当无法识别的糖蛋白进入血液就会引起身体的免疫反应引来严重后果,直接输血才会引起,如果喝就不会,因为胃都将其降解成氨基酸了,进入身体合成自身蛋白质就不会有事故。实验方法原理用人结肠癌细胞为免疫原,免疫小鼠,制得鼠抗人结肠癌细胞表面抗原(Ag)的单克隆
不规则抗体筛选的检查过程
采集被检对象静脉血,在检验卡的三管中分别加入抗体筛查Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号细胞各50µ;l,25ul待检样本血浆或血清;37℃孵育15分钟;专用离心机离心后判断结果。