正常滑膜细胞原代培养

正常滑膜细胞原代培养实验材料:1. 实验动物:大鼠、兔,人手术切除的关节等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 培养液:RPMI1640培养基,补加15%小牛血清;实验方法:1. 将大鼠处死后,用75%酒精消毒;2. 用手术剪剖开其四肢皮肤与肌肉,暴露长骨两端的关节,取出关节面滑膜组织置于盛有缓冲液的培养皿中;3. 剔除滑膜组织外层结构及周边软骨组织,用缓冲液洗2—3次;4. 将滑膜组织置于盛有少量小牛血清的培养皿中,剪碎成1mm×1mm×1mm大小的植块;5. 将制备的植块接种到螺旋口培养瓶中。反转培养瓶,使植有组织块的一面朝上,加入培养液,盖好瓶盖。将培养瓶放入含5%CO2的培养箱中,在37℃条件下进行培养;6. 培养4h后,组织块较牢黏附于瓶底时,再轻......阅读全文

正常滑膜细胞原代培养

正常滑膜细胞原代培养实验材料:1. 实验动物:大鼠、兔,人手术切除的关节等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 培养液:RPMI1640培养基,补加15%小牛血清;实验方法:1. 将大鼠处死后,用75%酒精消毒;2.

正常滑膜细胞原代培养

实验材料:实验动物:大鼠、兔,人手术切除的关节等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 培养液:RPMI1640培养基,补加15%小牛血清;实验方法:将大鼠处死后,用75%酒精消毒;2. 用手术剪剖开其四肢皮肤与肌肉

人滑膜细胞原代培养实验

酶消化法             实验方法原理 将人滑膜从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置α-MEM生长培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。

人滑膜细胞原代培养实验

酶消化法             实验方法原理 将人滑膜从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置α-MEM生长培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。

人类滑膜原代细胞培养步骤和体会

1、将切下的组织在手术台上请护士将标本放入低温生理盐水中(可不要动它),在手术完成时将标本放入PBS冰水液中并放入消毒的容器中带回实验室;2、在超净台中将标本放入培养皿中,加入α-MEM洗涤;3、获得组织切开,仔细辨认于关节反折处及增生的白色光滑的滑膜组织,附于关节软骨面的增生的血管翳也为滑膜组织(

人滑膜细胞原代培养实验_酶消化法

人滑膜细胞原代培养可应用于:(1)细胞保种;(2)用于相应细胞生理、形态学研究;(3)用于相关疾病研究。实验方法原理将人滑膜从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置α-MEM生长培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料滑膜组织试剂、试剂盒Ⅰ型胶原酶胎牛血清生理盐水

人滑膜细胞原代培养实验_酶消化法

人滑膜细胞原代培养可应用于:(1)细胞保种;(2)用于相应细胞生理、形态学研究;(3)用于相关疾病研究。实验方法原理将人滑膜从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置α-MEM生长培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料滑膜组织试剂、试剂盒Ⅰ型胶原酶胎牛血清生理盐水

正常小梁细胞原代培养

实验材料:1.    材料来源:人眼、兔眼或者猪眼等;2.    清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3.    器械:小梁剪与无齿镊等;4.    消毒液:200IU/ml的庆大霉素生理盐水;5.    培养液:基础液由DME

人滑膜细胞培养实验

            实验方法原理 滑膜细胞是衬于关节内表面的细胞性内膜和内膜下层,分为A型滑膜细胞(滑膜巨噬细胞)和B型滑膜细胞(滑膜成纤维细胞).其中A型细胞最显著的功能是吞噬作用和胞饮作用,该型细胞具有吞噬坏死细胞碎屑及病理状态下关节腔内其他物质的功能;B型

人滑膜细胞培养实验

实验方法原理滑膜细胞是衬于关节内表面的细胞性内膜和内膜下层,分为A型滑膜细胞(滑膜巨噬细胞)和B型滑膜细胞(滑膜成纤维细胞).其中A型细胞最显著的功能是吞噬作用和胞饮作用,该型细胞具有吞噬坏死细胞碎屑及病理状态下关节腔内其他物质的功能;B型细胞的功能是合成输出蛋白且与透明质酸酶的形成密切相关,同时与

人滑膜细胞培养实验

            实验方法原理 滑膜细胞是衬于关节内表面的细胞性内膜和内膜下层,分为A型滑膜细胞(滑膜巨噬细胞)和B型滑膜细胞(滑膜成纤维细胞).其中A型细胞最显著的功能是吞噬作用和胞饮作用,该型细胞具有吞噬坏死细胞碎屑及病理状态下关节腔内其他物质的功能;B型

正常成熟破骨细胞原代培养

实验材料:1. 细胞来源:新生大鼠或兔,妊娠6个月以内的引产胎儿等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 细胞支持物:薄骨片、盖玻片;4. 培养液:199培养基、MEM或DMEM培养基均可,须补加15%—20%小牛血清

正常视网膜米勒细胞原代培养

实验材料:1. 材料来源:人眼、兔眼或者猪眼等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶-100IU/ml透明质酸酶混合消化液;4. 消毒无菌的手术器械若干;实验方法:1. 取材(1)取自人的供体眼球

正常成熟破骨细胞原代培养

实验材料:1. 细胞来源:新生大鼠或兔,妊娠6个月以内的引产胎儿等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 细胞支持物:薄骨片、盖玻片;4. 培养液:199培养基、MEM或DMEM培养基均可,须补加15%—20%小牛血清、25

正常人羊膜细胞(HAM)原代细胞培养

实验材料: 1.人胎盘; 2.A/GA:含抗生素的A(庆大霉素,50μg/ml;两性霉素B,1.25μg/ml;链霉素100μg/ml;青霉素100U/ml); 3.丙三醇; 4.含50%丙三醇的DMEM; 5.胰蛋白酶/EDTA; 6.Millicell微孔膜组织培养插片;

正常人羊膜细胞(HAM)原代细胞培养

PriCells: 正常人羊膜细胞(HAM)原代细胞培养实验材料:1. 人胎盘;2. PBSA/GASP:含抗生素的PBSA(庆大霉素,50μg/ml;两性霉素B,1.25μg/ml;链霉素100μg/ml;青霉素100U/ml);3. 丙三醇;4. 含50%丙三醇的DMEM;5. 胰蛋白酶/EDT

正常小鼠原代骨骼肌细胞培养

PriCells –正常小鼠原代骨骼肌细胞培养 一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS

正常骨内成骨细胞原代培养

实验材料:1. 骨组织来源:新生或胚胎大鼠、兔、人类胚胎或手术切除之骨组织;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶溶液,1mg/mlⅡ型胶原酶溶液;4. 培养液:RPMI 1640培养基,配制培养液

正常小鼠原代脑星形胶质细胞培养

一、实验试剂 1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液

人原代类风湿关节炎滑膜成纤维细胞

细胞详述:滑膜是关节囊的内层,淡红色,平滑闪光,薄而柔润,由疏松结缔组织组成。关节腔内的所有结构,除关节软骨、半月软骨板以外,即便是通过关节腔的肌腱、韧带等均全部为滑膜所包裹。滑膜分泌滑液,在关节活动中起重要作用。正常滑膜分为两层,即薄的细胞层(内腔层)和血管层(内膜下层),是血管丰富的关节囊内膜,

正常晶状体上皮细胞原代培养

实验材料:1. 材料来源:人眼、兔眼或者猪眼等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 器械:无齿显微小镊子2把、培养板和培养皿若干;4. 培养液:为含15%胎牛血清的DMEM培养液;实验方法:1. 取材1)摘取动物或人的供体

正常视网膜色素上皮细胞原代培养

实验材料:1.    材料来源:人眼、兔眼或者猪眼等;2.    清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3.    特殊取材器械:眼球托与7-0尼龙线。以灭菌的白色橡胶反口胶塞作为眼球托;4.    消毒液:200IU/ml的庆大

原代胎儿肾小球系膜细胞培养方法步骤

取引产胎儿肾,无菌操作,1小时内完成。2用生理盐水冲洗干净。取肾皮质,用小外科剪剪成碎麽。依次研磨过80目,100目,200目筛网,不断用生理盐水冲洗,最后在200目筛网上收集肾小球,先用0。4%的胶原酶四消化半小时,接种于50ML的培养瓶里,加含有20%小牛血清的DMEM培养基放二氧化碳培养箱培养

细胞原代培养

一、原理将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。二、仪器、材料及试剂仪器:培养箱(调整至37℃),培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术

原代细胞的培养

  原代细胞的培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此,较为严格地说是指成功传代之前的培养,此时的细胞保持原有细胞的基本性质,如果是正常细胞,仍然保留二倍体数。但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。[1]  最常用的原代细胞的培养有组织块培养和分散细胞培养

正常人骨膜内成骨细胞原代培养

实验材料:骨组织来源:手术切除之骨组织;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶溶液,1mg/mlⅠ型胶原酶溶液;4. 培养液:RPMI 1640培养基,配制培养液时加入15%的小牛血清,并用

正常人骨膜内成骨细胞原代培养

正常人骨膜内成骨细胞原代培养实验材料:1. 骨组织来源:手术切除之骨组织;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶溶液,1mg/mlⅠ型胶原酶溶液;4. 培养液:RPMI 1640培养基,配制培

正常人甲状腺细胞的原代培养方法

实验材料: 1. 甲状腺细胞材料来源:人孤立性良性甲状腺腺瘤旁边正常组织、甲状腺功能亢进甲状腺组织或甲状腺肿瘤组织均可作为研究的材料; 2. 不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 培养用液:DME

正常人脐静脉原代内皮细胞培养

PriCells -  正常人脐静脉原代内皮细胞培养一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × P

正常人甲状腺细胞的原代培养方法

实验材料:1.      甲状腺细胞材料来源:人孤立性良性甲状腺腺瘤旁边正常组织、甲状腺功能亢进甲状腺组织或甲状腺肿瘤组织均可作为研究的材料;2.      不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3.      培养用液:DMEM培养液