正常成熟破骨细胞原代培养
实验材料：1. 细胞来源：新生大鼠或兔，妊娠6个月以内的引产胎儿等；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 细胞支持物：薄骨片、盖玻片；4. 培养液：199培养基、MEM或DMEM培养基均可，须补加15%—20%小牛血清、25mmol/L HEPES及青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml；实验方法：1. 薄骨片的制备：取新鲜牛股骨干的密质部分，沿骨纵轴用骨锯切割成大小约0.5cm×0.5CM、厚为0.1cm的小块，再用金刚砂轮磨成厚约10—50μm（以便在相差显微镜下观察）的薄骨片。使用前用超声波清洗仪超声洗涤3次，每次约10min。然后依次浸泡在3个盛有含青霉素（1000IU/ml）、链霉素（1000μg/ml）、两性霉素B（3μg/ml）的抗生素溶液的小容器中，每次10—20min。最后可浸于盛有含抗生素的培养液的容器内，置4℃（短期）或......阅读全文
正常成熟破骨细胞原代培养
实验材料：1. 细胞来源：新生大鼠或兔，妊娠6个月以内的引产胎儿等；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 细胞支持物：薄骨片、盖玻片；4. 培养液：199培养基、MEM或DMEM培养基均可，须补加15%—20%小牛血清、25
正常成熟破骨细胞原代培养
实验材料：1. 细胞来源：新生大鼠或兔，妊娠6个月以内的引产胎儿等；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 细胞支持物：薄骨片、盖玻片；4. 培养液：199培养基、MEM或DMEM培养基均可，须补加15%—20%小牛血清
正常骨内成骨细胞原代培养
实验材料：1. 骨组织来源：新生或胚胎大鼠、兔、人类胚胎或手术切除之骨组织；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 消化液：0.25%胰蛋白酶溶液，1mg/mlⅡ型胶原酶溶液；4. 培养液：RPMI 1640培养基，配制培养液
正常人骨膜内成骨细胞原代培养
实验材料：骨组织来源：手术切除之骨组织；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1&time，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 消化液：0.25%胰蛋白酶溶液，1mg/mlⅠ型胶原酶溶液；4. 培养液：RPMI 1640培养基，配制培养液时加入15%的小牛血清，并用
正常人骨膜内成骨细胞原代培养
正常人骨膜内成骨细胞原代培养实验材料：1. 骨组织来源：手术切除之骨组织；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 消化液：0.25%胰蛋白酶溶液，1mg/mlⅠ型胶原酶溶液；4. 培养液：RPMI 1640培养基，配制培
成骨细胞原代培养
实验方法原理 采用植块培养方法时，用少量培养液孵育，使骨组织块贴附于培养瓶。骨组织块浮起后观察细胞长出情况。采用分离细胞的单层培养方法时，将松质骨切成 2~5 mm 大小，用胶原蛋白酶和胰蛋白酶消化。将混悬的细胞接种于培养瓶，用 F12 培养液培养。试剂、试剂盒 Hams F12 培养液用于细胞传代
原代软骨细胞分离培养
1、一般根据实验要求，选取不同年龄组的兔子，实际上兔子的年龄越小越好，毕竟幼体组织的活力要高于成体组织的活力，耳静脉空气注射法处死后,无菌条件下分离后肢关节软骨和肋软骨，剥离包裹软骨组织的筋膜和软骨膜，放入盛有PBS液的培养皿中。2、将分离得到的软骨组织剁碎成0.3-0.5mm的组织块，移入25cm
成骨细胞原代培养实验
实验方法原理采用植块培养方法时，用少量培养液孵育，使骨组织块贴附于培养瓶。骨组织块浮起后观察细胞长出情况。采用分离细胞的单层培养方法时，将松质骨切成 2~5 mm 大小，用胶原蛋白酶和胰蛋白酶消化。将混悬的细胞接种于培养瓶，用 F12 培养液培养。 实验材料骨标本试剂、试剂盒Hams F12 培养液
成骨细胞原代培养实验
成骨细胞原代培养实验 实验方法原理 采用植块培养方法时，用少量培养液孵育，使骨组织块贴附于培养瓶。骨组织块浮起后观察细胞长出情况。采用分离细胞的单层培养方法时
成骨细胞原代培养实验
实验方法原理 采用植块培养方法时，用少量培养液孵育，使骨组织块贴附于培养瓶。骨组织块浮起后观察细胞长出情况。采用分离细胞的单层培养方法时，将松质骨切成 2~5 mm 大小，用胶原蛋白酶和胰蛋白酶消化。将混悬的细胞接种于培养瓶，用 F12 培养
软骨细胞的原代培养和传代培养
软骨细胞的原代培养龄新西兰乳兔(雌雄不限，共18只，分6次处理),溺死，置于75％酒精溶液中10分钟，拿入超净工作台，自眼外眦至耳屏前剪开皮肤暴露皮下组织，再次严格消毒，自外眦外将颧弓由根部剪断，暴露髁状突，去净髁状突表面软组织及软骨膜，以眼科剪剪取髁状突表面的透明软骨，以磷酸缓冲液（PBS含青霉素
正常小梁细胞原代培养
实验材料：1. 材料来源：人眼、兔眼或者猪眼等；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 器械：小梁剪与无齿镊等；4. 消毒液：200IU/ml的庆大霉素生理盐水；5. 培养液：基础液由DME
正常关节软骨细胞的短期培养
实验材料：1. 软骨细胞来源：动物材料可选用未成年兔的膝关节、鸡胚胸软骨。人体材料可取自引产胎儿或成年人手术切除的软骨标本；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 消化液：0.2%胶原酶Ⅱ溶液，用PBS
正常关节软骨细胞的短期培养
实验材料：1. 软骨细胞来源：动物材料可选用未成年兔的膝关节、鸡胚胸软骨。人体材料可取自引产胎儿或成年人手术切除的软骨标本；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 消化液：0.2%胶原酶Ⅱ溶液，用液配制，过滤除菌；4. 培养液
破骨细胞的来源
破骨细胞是由骨髓中的髓系祖细胞分化而成的单核巨噬细胞相互融合，所形成的多核巨细胞。早期未成熟的增殖性单核吞噬细胞被称为破骨细胞前体，在化学因子的作用下进入血液循环，再在基底多细胞单位所释放的信号因子的作用下进入骨结构腔体，在各种化学因子、转录因子、细胞因子等信号因子的刺激下融合为多核细胞并最终活
什么是破骨细胞？
破骨细胞是一种骨细胞，破骨细胞打破了骨组织。此功能在维护、修复是关键和重塑的骨头的的脊椎骨骼。破骨细胞通过分泌酸和胶原酶在分子水平上分解和消化水合蛋白质和矿物质的复合物，这一过程称为骨吸收。这个过程也有助于调节血钙水平.在进行再吸收的那些骨表面上发现了破骨细胞。在这样的表面上，破骨细胞被认为位于称为
破骨细胞的作用
破骨细胞以其骨质吸收功能为人所知晓。而且作为骨组织成分的一种，行使骨吸收(bone resorption)的功能。破骨细胞与成骨细胞(osteoblast，亦称bone-forming cells)在功能上相对应。二者协同，在骨骼的发育和形成过程中发挥重要作用。高表达的抗酒石酸酸性磷酸酶(tar
破骨细胞的形态
破骨细胞由多核巨细胞(multinuclear giant cell, MNGC)组成，直径100μm，含有2～50个紧密堆积的核，主要分布在骨质表面、骨内血管通道周围。由多个单核细胞融合而成的，胞浆嗜碱性但随着细胞的老化，渐变为嗜酸性。
破骨细胞的功能
一旦被激活，破骨细胞就会通过趋化性移动到骨骼中的微骨折区域。破骨细胞位于称为Howship\'s腔的小腔中，由底层骨骼的消化形成。密封区是破骨细胞质膜与下方骨骼的连接。密封区由称为足体的特殊粘附结构带界定。整合素受体（例如αvβ3）通过骨基质蛋白（例如骨桥蛋白）中的特定氨基酸基序Arg-Gl
什么是破骨细胞
破骨细胞(osteoclast，亦称bone-resorbingcells)是骨细胞的一种，行使骨吸收（boneresorption）的功能。破骨细胞与成骨细胞（osteoblast，亦称bone-formingcells）在功能上相对应。二者协同，在骨骼的发育和形成过程中发挥重要作用。 破骨细胞
破骨细胞的演变
破骨细胞由多核巨细胞(multi nuclear giant cell，MNGC)组成，直径100μm，含有2~50个紧密堆积的核，主要分布在骨质表面、骨内血管通道周围。由多个单核细胞融合而成的，胞浆嗜碱性但随着细胞的老化，渐变为嗜酸性。 破骨细胞的分离培养始于20世纪80年代，到2018年7
破骨细胞的结构
破骨细胞是一个大的多核细胞，骨上的人类破骨细胞通常有五个细胞核，直径为150–200µm。当使用破骨细胞诱导细胞因子将巨噬细胞转化为破骨细胞时，会出现直径可能达到100µm的非常大的细胞。它们可能有几十个细胞核，通常表达主要的破骨细胞蛋白，但由于非天然基质，它们与活骨中的细胞有显着差异。多核组装破骨
正常滑膜细胞原代培养
正常滑膜细胞原代培养实验材料：1. 实验动物：大鼠、兔，人手术切除的关节等；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 培养液：RPMI1640培养基，补加15%小牛血清；实验方法：1. 将大鼠处死后，用75%酒精消毒；2.
正常滑膜细胞原代培养
实验材料：实验动物：大鼠、兔，人手术切除的关节等；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1&time，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 培养液：RPMI1640培养基，补加15%小牛血清；实验方法：将大鼠处死后，用75%酒精消毒；2. 用手术剪剖开其四肢皮肤与肌肉
破骨细胞的研究发展
自从它们于1873年被发现以来，关于它们的起源一直存在相当大的争论。三种理论占主导地位：1949年至1970年流行结缔组织起源，认为破骨细胞和成骨细胞属于同一谱系，成骨细胞融合在一起形成破骨细胞。经过多年的争论，现在很清楚这些细胞是从巨噬细胞的自我融合发展而来的。1980年初，单核细胞吞噬系统被认为
小鼠破骨细胞分化方案
破骨细胞是高度分化的多核巨细胞，主要来源于单核/巨噬细胞造血干细胞系，是一种具有骨吸收功能，在骨代谢方面起着关键性作用的细胞，因而机体对于破骨细胞的调控非常严格，在破骨细胞分化成熟的过程中，RANK /RANKL/OPG系统起着分化调控枢纽的作用，是调节破骨细胞分化成熟的关键信号途径。核因子κB
正常视网膜米勒细胞原代培养
实验材料：1. 材料来源：人眼、兔眼或者猪眼等；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 消化液：0.25%胰蛋白酶-100IU/ml透明质酸酶混合消化液；4. 消毒无菌的手术器械若干；实验方法：1. 取材（1）取自人的供体眼球
正常人关节软骨细胞的长期培养
实验材料：1. 软骨细胞来源：20—24周自然流产胎儿的股骨和胫骨；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1&time，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 消化液Ⅰ：2mg/ml胰蛋白酶和2mg/ml胶原酶混合消化液，用液配制；4. 消化液Ⅱ：0.5mg/ml胶原酶
正常人关节软骨细胞的长期培养
实验材料：1. 软骨细胞来源：20—24周自然流产胎儿的股骨和胫骨；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 消化液Ⅰ：2mg/ml胰蛋白酶和2mg/ml胶原酶混合消化液，用PBS液配制；4. 消化
破骨细胞研究的临床展望
破骨细胞功能异常会造成骨质吸收的异常，若其功能亢进，会引起骨退行性病变如骨质疏松症、癌症的骨转移、关节炎等；若其功能障碍或衰退，会造成骨硬化症、致密性成骨不全、Paget’s病、大块骨溶解病等。 骨相关疾病的药物主要从破骨细胞的分化、功能与凋亡三方面影响其对骨质的吸收过程。因RANK/RANK