正常人关节软骨细胞的长期培养

实验材料:1. 软骨细胞来源:20—24周自然流产胎儿的股骨和胫骨;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 消化液Ⅰ:2mg/ml胰蛋白酶和2mg/ml胶原酶混合消化液,用液配制;4. 消化液Ⅱ:0.5mg/ml胶原酶,用培养液Ⅰ配制;5. 培养液Ⅰ:DMEM培养液,补充10%胎牛血清;6. 培养液Ⅱ:DMEM培养液中补加10%胎牛血清、青霉素1000IU/ml、链霉素1mg/ml、两性霉素2.5μg/ml、谷氨酰胺2mmol/L、1%维生素添加剂(vitamin sulements)以及维生素C 50μg/ml;7. 10% poly HEMA:称取6g多聚2-羟乙基甲基丙烯酸酯(2-hydroxyethylmethacrylate,poly HEMA),加到50ml 95%乙醇中,于37℃恒温振荡水浴箱中缓慢振荡过夜,次日将所得......阅读全文

正常人关节软骨细胞的长期培养

实验材料:1. 软骨细胞来源:20—24周自然流产胎儿的股骨和胫骨;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 消化液Ⅰ:2mg/ml胰蛋白酶和2mg/ml胶原酶混合消化液,用液配制;4. 消化液Ⅱ:0.5mg/ml胶原酶

正常人关节软骨细胞的长期培养

实验材料:1.    软骨细胞来源:20—24周自然流产胎儿的股骨和胫骨;2.    清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3.    消化液Ⅰ:2mg/ml胰蛋白酶和2mg/ml胶原酶混合消化液,用PBS液配制;4.    消化

从正常人和骨关节炎患者的关节软骨中分离软骨祖细胞...

从正常人和骨关节炎患者的关节软骨中分离软骨祖细胞实验实验方法原理 实验材料 人关节软骨试剂、试剂盒 胰蛋白酶 EDTA:胰蛋白酶(0.05%)和EDTA(0.53 mmol L)PBSA配制胎牛血清牛血清白蛋白(BSA)10μg ml和1 mg ml PBSC配制血清纤连蛋白 10μg m1 PBS

从正常人和骨关节炎患者的关节软骨中分离软骨祖细胞

从人关节软骨中分离软骨祖细胞 从人滑膜中分离软骨祖细胞、培养、分化 人软骨祖细胞的分化             实验方法原理 实

从正常人和骨关节炎患者关节软骨分离软骨祖细胞实验3

人软骨祖细胞的分化实验材料人软骨试剂、试剂盒灭菌分化培养基PBSA胰蛋白酶 EDTA:胰蛋白酶(0.05%)和EDTA(0.53mmol L)PBSA配制仪器、耗材离心管 15ml圆锥底的离心管(50 ml)血细胞计数板微量离心器实验步骤(a)从培养瓶中吸出生长培养基弃之。(b)PBSA润洗后弃去洗

从正常人和骨关节炎患者关节软骨分离软骨祖细胞实验1

从人关节软骨中分离软骨祖细胞实验材料人关节软骨试剂、试剂盒胰蛋白酶 EDTA:胰蛋白酶(0.05%)和EDTA(0.53 mmol L)PBSA配制胎牛血清牛血清白蛋白(BSA)10μg ml和1 mg ml PBSC配制血清纤连蛋白 10μg m1 PBSC配制仪器、耗材尼龙膜40μm筛孔(“细胞

从正常人和骨关节炎患者关节软骨分离软骨祖细胞实验2

从人滑膜中分离软骨祖细胞、培养、分化实验材料骨关节炎患者全关节置换得到的胫骨滑膜;需要正常组织时使用新鲜的尸体组织试剂、试剂盒DMEM(包含4.5 g L葡萄糖和4 mmol L L-谷氨酰胺)黏附培养基:含100μg ml庆大霉素的DMEM克隆生长培养基:DMEM10% FBS和100μg ml庆

正常关节软骨细胞的短期培养

实验材料:1.    软骨细胞来源:动物材料可选用未成年兔的膝关节、鸡胚胸软骨。人体材料可取自引产胎儿或成年人手术切除的软骨标本;2.    清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3.    消化液:0.2%胶原酶Ⅱ溶液,用PBS

正常关节软骨细胞的短期培养

实验材料:1. 软骨细胞来源:动物材料可选用未成年兔的膝关节、鸡胚胸软骨。人体材料可取自引产胎儿或成年人手术切除的软骨标本;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 消化液:0.2%胶原酶Ⅱ溶液,用液配制,过滤除菌;4. 培养液

人关节软骨细胞培养操作

人关节软骨细胞培养操作:1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,

从人关节软骨中分离软骨祖细胞

试剂和材料:1. 骨关节炎患者行膝盖关节半切开手术时未累及的部分;2. 链霉蛋白酶消化培养基:DMEM/F12(1:1)、5%的FBS、抗坏血酸 50μg/ml、葡萄糖 1mg/ml、庆大霉素(50mg/ml),0.2%(终浓度100μg/ml)、链霉蛋白酶 70U/ml、HEPES 10mmol/

从人关节软骨中分离软骨祖细胞

试剂和材料: 1.骨关节炎患者行膝盖关节半切开手术时未累及的部分; 2.链霉蛋白酶消化培养基:DMEM/F12(1:1)、5%的F、抗坏血酸 50μg/ml、葡萄糖 1mg/ml、庆大霉素(50mg/ml),0.2%(终浓度100μg/ml)、链霉蛋白酶 70U/ml、HEPES 10mmo

正常人羊膜细胞(HAM)原代细胞培养

实验材料: 1.人胎盘; 2.A/GA:含抗生素的A(庆大霉素,50μg/ml;两性霉素B,1.25μg/ml;链霉素100μg/ml;青霉素100U/ml); 3.丙三醇; 4.含50%丙三醇的DMEM; 5.胰蛋白酶/EDTA; 6.Millicell微孔膜组织培养插片;

正常人羊膜细胞(HAM)原代细胞培养

PriCells: 正常人羊膜细胞(HAM)原代细胞培养实验材料:1. 人胎盘;2. PBSA/GASP:含抗生素的PBSA(庆大霉素,50μg/ml;两性霉素B,1.25μg/ml;链霉素100μg/ml;青霉素100U/ml);3. 丙三醇;4. 含50%丙三醇的DMEM;5. 胰蛋白酶/EDT

正常人脐静脉内皮细胞的培养

实验材料:1. 婴儿脐带;2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3. 培养用液:M199培养液(含20%小牛血清);0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA(1:1,V:V)混合消化液;D-Hanks液、100IU/ml青霉素和1

正常人脐静脉内皮细胞的培养

  正常人脐静脉内皮细胞的培养    实验材料:   1. 婴儿脐带;   2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;   3. 培养用液:M199培养液(含20%小牛血清);0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA(1:

正常人包皮成纤维细胞的培养

正常人包皮成纤维细胞的培养实验材料:1. 细胞来源:新生儿包皮;2. 不含Ca2+和Mg2+的1×,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3. 0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA溶液:两者比例为1:1,用D-Hanks液配制;4. 0.02%大豆胰蛋白酶抑制剂:用DM

原代软骨细胞分离培养

1、一般根据实验要求,选取不同年龄组的兔子,实际上兔子的年龄越小越好,毕竟幼体组织的活力要高于成体组织的活力,耳静脉空气注射法处死后,无菌条件下分离后肢关节软骨和肋软骨,剥离包裹软骨组织的筋膜和软骨膜,放入盛有PBS液的培养皿中。2、将分离得到的软骨组织剁碎成0.3-0.5mm的组织块,移入25cm

关节炎中软骨破坏方向的细胞模型

借用医疗百科的描述“关节炎泛指发生在人体关节及其周围组织的炎性疾病,可分为数十种。我国的关节炎患者有1亿以上,且人数在不断增加。临床表现为关节的红、肿、热、痛、功能障碍及关节畸形,严重者导致关节残疾、影响患者生活质量。”关节炎以慢性炎症为起始,但最终是导致功能障碍及关键畸形。从病理改变来说,软骨层消

关节炎中软骨破坏方向的细胞模型

  借用医疗百科的描述“关节炎泛指发生在人体关节及其周围组织的炎性疾病,可分为数十种。我国的关节炎患者有1亿以上,且人数在不断增加。临床表现为关节的红、肿、热、痛、功能障碍及关节畸形,严重者导致关节残疾、影响患者生活质量。”   关节炎以慢性炎症为起始,但最终是导致功能障碍及关键畸形。从病理改变来

正常人骨间充质干细胞的培养

实验材料:1. 骨髓来源:骨髓材料由健康人提供;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 分离液:密度为1.073g/ml的Percoll溶液;4. DMEM-LG培养液:含1000mg/L葡萄糖的DMEM培养液,补充1

正常人甲状腺细胞的原代培养方法

实验材料:1.      甲状腺细胞材料来源:人孤立性良性甲状腺腺瘤旁边正常组织、甲状腺功能亢进甲状腺组织或甲状腺肿瘤组织均可作为研究的材料;2.      不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3.      培养用液:DMEM培养液

正常人胚肺成纤维细胞的培养

实验材料:1. 肺组织:取自妊娠14—18周的胎儿;2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶(pH7.6—7.8),0.02%EDTA溶液;4. 培养液:DMEM或RPMI1640,加10%—20%胎

正常人甲状腺细胞的原代培养方法

实验材料: 1. 甲状腺细胞材料来源:人孤立性良性甲状腺腺瘤旁边正常组织、甲状腺功能亢进甲状腺组织或甲状腺肿瘤组织均可作为研究的材料; 2. 不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 培养用液:DME

骨髓造血细胞的长期培养

实验方法原理 将骨髓吸入培养液。作为附着的多层细胞,骨髓至少维持 12 周,可达 30 周。干细胞、趋向成熟的骨髓细胞和成熟骨髓细胞从附着的细胞层释放入培养液。粒细胞或巨噬细胞的祖细胞可用软凝胶培养检测。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 Fischer培养液生长培养液仪器、耗材 注射器纱布拭子解剖剪解剖镊

骨髓造血细胞的长期培养

            实验方法原理 将骨髓吸入培养液。作为附着的多层细胞,骨髓至少维持 12 周,可达 30 周。干细胞、趋向成熟的骨髓细胞和成熟骨髓细胞从附着的细胞层释放入培养液。粒细胞或巨噬细胞的祖细胞可用软凝胶培养检测。

骨髓造血细胞的长期培养

实验方法原理将骨髓吸入培养液。作为附着的多层细胞,骨髓至少维持 12 周,可达 30 周。干细胞、趋向成熟的骨髓细胞和成熟骨髓细胞从附着的细胞层释放入培养液。粒细胞或巨噬细胞的祖细胞可用软凝胶培养检测。实验材料小鼠试剂、试剂盒Fischer培养液生长培养液仪器、耗材注射器纱布拭子解剖剪解剖镊培养瓶实

骨髓造血细胞的长期培养

            实验方法原理 将骨髓吸入培养液。作为附着的多层细胞,骨髓至少维持 12 周,可达 30 周。干细胞、趋向成熟的骨髓细胞和成熟骨髓细胞从附着的细胞层释放入培养液。粒细胞或巨噬细胞的祖细胞可用软凝胶培养检测。

骨关节炎软骨实现无需干细胞负载的软骨缺损修复再生

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/1/515331.shtm近日,西安交通大学化学学院成一龙课题组和口腔医院杨宇轩博士通过聚加成反应构建了一种分别负载生物活性因子单宁酸和软骨分化因子Kartogenin的多重氢键交联水凝胶,作为体内软骨再生的无

微流控软骨芯片在软骨细胞培养的应用

由于人口老龄化,骨关节炎(osteoarthritis,OA)这一常见疾病所造成的社会影响预计将急剧增加,其常见的治疗方式为缓解疼痛或手术治疗。OA治疗药物匮乏,主要源于缺乏准确的临床前OA模型,在传统2D培养和3D培养中,二者均不能准确的模拟软骨细胞的动态培养微环境,以及在关节活动时,软骨细胞所受